仙草提取物对糖尿病大鼠的治疗作用研究.doc

仙草提取物对糖尿病大鼠的治疗作用研究?268?福州总医院2005年l2月|12卷第4,5期?经验交流与简报?仙草提取物对糖尿病大鼠的治疗作用研究刘莹朱东屏徐向进范尚坦陈明珠李萌仙草是菊三七属一新种植物,近年来民间用其叶子治疗糖尿病取得较好的疗效.因本植物为一新种植物.其降血糖作用的研究尚未见报道,为此本实验进行了其对正常和STZ糖尿病大鼠血糖,血脂及肾脏病变影响的研究,为其治疗糖尿病提供药理学依据.1材料与方法1.1动物清洁级SD大鼠64只,体重180200g.台,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,合格证号:SOXK(沪)20030003.1.2药物优降糖(Glibenclarnide,天津太平洋制药有限公司产品,批号:030310);二甲双胍(Metformin,北京嘉德制药有限公司产品,批号:20040908);仙草采自福建省福州市.1.3受试环境中国人民解放军南京军区福州总医院动物实验科为医学实验动物环境二级标准,许可证号:SYXK一(军)2002046.,受试大鼠采取标准大鼠饲料喂养.自由摄食与饮水.室温调节在1825.1.4主要试剂及仪器链脲佐菌索(S,rz.美国Sigma公司产品)iAdvantage电子感应血糖仪及配套试纸条(美国罗氏公司产品);OLYMPus全自动生化分析仪(日本MishimaOlympus公司产品,型号:A,.2700)1.5方法1.5.1仙草的提取物取仙草新鲜叶片1kg,粉碎.用95%的乙醇浸泡10h,超声提取30rain,过滤,滤液浓缩得34.5g浸膏.临用前用生理盐水配制成混悬液.给药量均折合生药量计.1.5.2分组与给药将大鼠随机分成正常对照组(空白对照组,仙草正常组(2g?kgI1-d一1)和实验组.实验组大鼠禁食12h后.ipSTZ60mg?lqg.72h后取尾血测血糖.凡血糖大于16.7mmol-LI1的大鼠即为糖尿病模型大.成模大鼠又随机分为模型对照组,阳性药物对照组(二甲双胍组(150mg-kg-1-d一1),优降糖组(1.35mg?lqg?d一1),仙草低,中,高剂量组(1,2,4g?lqg-I.d一1).每组各8只以上各组大鼠给药,1天2次.连续14d.空白对照组和模型对照组给予等容积生理盐水.1.5.3观测指标一般状况:观察精神状态,毛色,尿量,饮食,饮水等状况,测定0,4,8,14d体重(Weight);空腹血糖(.FBG):测定0,7,14d禁食8h,ig1h后的血糖,采用Advantage电子感应血糖仪及配套试纸条;于第14dig前禁食8h,ig1h后心脏取血,取肾测血清胆固醇(TC),甘油三酯(TG),尿素氮(BuN);肌酐(cr),丙氨酸转氨酶(ALT).采用OLYMPUS全自动生化分析仪;肾脏组织学用HE,PAS,PAMmaon三色染色,光镜下观察肾组织病理改变.1.5.4统计分析实验数据以s表示,组间比较采用t检验.2结果2.1对STZ糖尿病大鼠一般情况的影响:造模后实验组大鼠均出现反应迟钝,毛竖无光泽,进食虽,饮水量及尿量明显增加,体重显着下降的表现;经仙草各剂量组治疗后的大鼠较模型对照组反应灵活,毛发平伏有光泽,体重显着增加(P<0.050.01).而阳性药物对照组大鼠体重未见增加,与模型对照组比较P>0.05.同时我们观察到仙草还能够降低正常大鼠的体重(P<0.05).见表1衰仙草对正常和糖尿病大鼠体I的影响作者单位:福州总医院药学科福州总医院2005年12月第12卷4,5期?269?*P<O.05.*-P<O.01与模型对照组比较;P<O.05.P<O.01与空白对照组比较*P<O.05._*P<0.01comparedwiththemodel;P<0.05,P<0.01eomrmeawiththecontrol2.2对正常和SIZ糖尿病大鼠血糖的影响:仙草低剂量组血糖与空白对照组比较无显着差异(P>0o05);二甲双胍与模型对照组比较血糖下降了14.61%(7d)和l5.50%组也有显着的降糖效果(P<0.05).但优降糖组无明显作(14d).但无统计学差异:中,高剂量组均有显着降糖作用(P>0.05).见表2用.且高剂量组效果更明显(P<0.01);仙草正常组大鼠衰2仙簟对正常和糖屎病大血糖的影响*P<0.05.?*P<0.01与模型对照组比较*P<0.05.*P<0.01comparedwiththemodel2.3对正常和STZ糖尿病大鼠血脂的影响:仙草中,大鼠TG(P<O.o5);仙草正常组与空白对照组比较无显着高剂量组Tc较模型对照组有所下降,但无统计学意义(P差异(P>0.05).见表3>0.05);仙草高剂量组和二甲双胍组均可显着降低糖尿病表3仙簟对正常和糖屎病大叠TC,TG的影响*P<0.05.*P<0.01与模型对照组比较*P<0.05.*P<0.01comparedwiththemodd2.4对正常和STZ糖尿病大鼠Cr,BUN,ALT的影出显着的降Cr作用;实验组大鼠的ALT都明显升高,与响:仙草各剂量组均有显着降低糖尿病大鼠BUN,Cr的空白对照组比较有显着差异(P<O.05).见表4作用(P<0.050.01);阳性药物对照组仅优降糖组表现衰4仙草对正常和糖屎病大Cr,BUN,ALlT的影响-P<0.05.*-P<0.01与模型对照组比较;P<0,05,AAP<0.01与空白对照组比较*P<0.05.-*P<0.01eompexedwiththemodel;P<0.05.P<0.01o0mparedwiththecontrol(下转第256页)?256?变色等异常现象.在临床试验中也未出现破碎现象,质量可靠.中空栓对易氧化,变色,吸湿性的药物更为适宜.因为中空栓外壳是纯基质,内部是不含基质的药物,因此比普通栓更加稳定.我们研制的水合氯醛中空栓【4】已在临床应用三年.质量稳定,效果满意.前列中空栓可进行批量生产.采用专用中空栓模,可提高生产效率.3讨论3.1中空栓是一种新型的栓剂,药物是以液体状态存在,而是栓壁很薄,在2rrdn以内就软化变形,药液立即释放,即药诫与栓剂基质完全分开,不存在油水分配过程,因此起效远远快于普通栓.3.2我们制各的前列中空栓是利用普通栓模采用一定的技巧制备而成,不太适宜批量生产,近年来孔祥洪等人研制的中空栓模.由4部分组成:阴模,阳模,模垫和模底,可制成不同类型的中空栓.有助于参考改进.福州总医院2005年12月第12卷幂43.3我们根据临床验方,将大黄,川芎,丹参提取浓缩并制备成新型栓剂中空栓,局部给药,药物几乎直接作用于前列腺.局部浓度高,起效快,我们今后将在临床做进一步的研究.参考文献1候金成.栓剂在治疗前列腺炎中的应用.医药导报.1998,17(3):1421432国家药典委员会.中国药典(一部)S.北京:化学工业出版社,2005,.183梁华坚.用同一薄层板鉴别清脑复神液中大黄酚与丹参酮IIA.药物分析杂志.1998.18(3):2072084予西全.刘锡钧,叶礼燕.水台氯醛中空栓的研制.中国医药工业杂志.1995.26(儿):4975孔祥洪,王玉.昊子海,等.中空栓剂模具的研制.中国医院药物杂志,1997.17(7):321322(上接第269页)2.5对STZ糖尿病大鼠肾组织病理变化的影响:光镜下可见到模型对照组大鼠肾小球体积增大,主要改变为系膜基质增宽,系膜细胞增生,肿胀,毛细血管腔受压狭窄.见图1,3;仙草治疗组大鼠肾小球体积基本恢复常态,系膜区病变不明显.毛细血管腔血流恢复.3讨论:3.1本实验结果表明仙草具有如下三个方面的作用:3.1.1明显改善糖尿病大鼠”三多一少”的症状,显着降低血糖,且其疗效优于阳性药物对照组.本实验所用的阳性对照药双胍类和磺酰脲类是世界公认的口服降糖药【引.优降糖为磺酰脲类降糖药,是通过刺激胰岛B细胞分泌胰岛索产生降糖作用,它可以降低非糖尿病个体的血糖,而STZ糖尿病大鼠的胰岛已被破坏,因而优降糖无法发挥其作用.二甲双胍属于双胍类降糖药,不通过胰腺来起作用,其降糖机理主要为促进葡萄糖的利用;拮抗抗胰岛素因子;减少葡萄糖经消化道吸收等.实验证明,仙草能降低糖尿病大鼠血糖.但对正常大鼠血糖没有影响,表明它与二甲双胍的相似性及与优降糖的区别.提示其降糖机制可能与二甲双胍类似.3.1.2降低糖尿病大鼠血脂.糖尿病时常伴有血脂的升高,而高脂血症与糖犀病慢性并发症的发生发展密切相关.因而降低血脂对于阻止或延缓并发症,改善糖尿病患者的预后具有重大意义.本研究结果表明.糖尿病大鼠的TC,TG均明显高于正常对照组,经仙草治疗后TG显着降低.TC也呈现一定的下降趋势,说明仙草对糖尿病大鼠血脂紊乱起到了一定的调节作用.3,1.3对糖尿病大鼠肾脏的保护作用:肾脏病变是糖尿病的并发症之一,其早期的病理特点为肾脏肥大,肾小球基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质(ECM)进行性积聚.临床表现为血清Cr,BUN增高.有关糖尿病肾病(DN)的发病机制尚未明了,但大多数认为与血流动力学异常,氧自由基的作用及高血糖引起的系列代谢紊乱有关.有研究表明高血压和以TG,低高密度脂蛋白血症为特征的脂代谢紊乱是DN的重要高危因素.本实验中仙草可显着降低STZ糖尿病大鼠FBG,Cr,BUN,同时还具有降低TG的作用.肾脏病理切片也显示了它可促进糖尿病大鼠肾脏病变的恢复,因而其具有一定的肾保护作用