《资源微生物超全》PPT课件

资源微生物学 第一章绪论 第一节微生物资源的特点 微生物资源是指那些对人类有实际或潜在用途或价值的微生物 微生物资源具有下面的特点 1代谢类型极其多样化2种类丰富细菌5000 40000 真菌70000 150万3变异性大4潜力大 开发前景广阔 第二节微生物资源开发利用的历史 一般我们把人类自觉利用微生物资源的历史作为开始 不包括无意识的或经验的历史 LourisPasteur 1856 AlexanderFleming 1929 AlbertSchatzandSelmanA Waksman 1943 主要围绕以下几方面进行开发利用 1直接利用微生物菌体2利用代谢产物3利用其特殊的代谢作用 第二章微生物资源的分类划分 第一节细菌分类 Bergey sManualofSystematicBacteriology Bergey sManualofDeterminativeBacteriology 1Gram PositiveBacteria革兰氏阳性细菌 一 Gram PositiveCocci革兰氏阳性球菌 1Micrococcus 成对或四联 不运动 严格好氧 大多数能产生类胡萝卜素因而使菌落呈黄 橙 红色 在含有5 NaCl中能生长 细胞不被溶葡萄球菌素 Lysotaphin 肽链内切酶溶解 1U ml 2Staphylococcus 直径0 5 1 5 m 葡萄串状 不运动 触酶阳性 兼性厌氧 具有呼吸和发酵两种代谢类型 有氧情况下生长得更好 发酵葡 麦 蔗等产酸不产气 致病株能分解甘露醇 大多数菌株能在15 NaCl或40 胆汁中生长 对溶葡萄球菌素肽链内切酶 1U ml 的溶菌作用敏感 抗溶菌酶 100 g ml 的溶菌作用 Staphylococcusaureus 是条件致病菌 产生肠毒素 引起食物中毒 引起化脓性炎症如毛囊炎 麦粒肿 中耳炎等 3Streptococcus 细胞在液体培养基中成链状排列 不运动 兼性厌氧 发酵葡萄糖产生右旋乳酸 同型发酵 不产气 触酶阴性 在血平板上产生溶血现象 根据溶血现象分为 甲型溶血性链球菌 溶血 草绿色 条件致病菌 乙型溶血性链球菌 溶血 完全溶血 强致病菌 丙型溶血性链球菌 不溶血 无致病性 S lactis S faecalis S thermophillus由于链球菌不受叠氮化钠抑制 可以利用0 05 NaN3的葡萄糖肉汤培养基 pH7 5 从自然材料中扩增链球菌 4Leuconostoc 链状排列 不运动 在蔗糖培养基中产生由葡聚糖构成的粘质荚膜 发酵葡萄糖产生L 乳酸 乙醇或醋酸和CO2 异型发酵 触酶阴性 L mesenteroides肠膜明串株菌利用蔗糖合成葡聚糖 葡聚糖是生产右旋糖苷的原料 二 Endospore FormingGram PositiveRods产芽孢的革兰氏阳性杆菌 1Bacillus 具周生或侧生鞭毛 严格好氧或兼性厌氧 大多数产生触酶 B thuringiensisformsparasporalbodies B anthraciscausesanthrax B cereusB amyloliquefaciens解淀粉芽孢杆菌 Bycloninganamylase encodinggenefromthisbacteriaintoLactobacillusplantarum lattercanconverttheabundantstarchincerealcropsintolacticacid B subtilis 2Clostridium 周生鞭毛或无 芽孢囊膨大成梭状 鼓槌状 球拍状等 专性厌氧 触酶阴性 不还原硫酸盐 C tetanicausestetanus 存在于人和动物肠道中 由粪便污染土壤 在对数生长期后产生外毒素 神经毒 导致肌肉痉挛 运动不协调 最后因痉挛窒息而死 C botulinumcausesbotulism 外毒素毒性比氰化钾强10000倍 对人的致死剂量为0 1 g 阻碍乙酰胆碱的释放 影响神经冲动的传递 导致肌肉弛缓型麻痹 成人及儿童食入菌体不会有事 1岁以下婴儿一旦食入容易引起中毒 C acetobutylicumisusedtomakeamixtureofacetoneandbutanol C butylicumC pasteurianum 三 RegularNonsporing Gram PositiveRods不产生芽孢的 形状规则的革兰氏阳性杆菌 Lactobacillus 短杆菌或细长菌 一般形成链 通常不运动 如运动则具周生鞭毛 染色时着色不均 微好氧 发酵代谢 耐酸 最适pH是5 5 6 2分离乳酸杆菌的培养基需要以酵母提取物作为维生素来源 还需有蛋白胨 乙酸盐和刺激因子 如吐温80 等 常用的配方有MRS培养基和SL培养基 L acidophilus能发酵产生乳酸 双乙酰 乙醛等 用来生产生物活性乳制品 L bulgaricus用于酸奶生产L plantarum用于酸菜 泡菜生产L delbrueckii是工业生产乳酸的菌种 四 Irregularnonsporing Gram Positiverods不产生芽孢的 形状不规则的革兰氏阳性杆菌 1Corynebacterium 菌体一端或两端膨大呈棒状 排列不规则 呈栅栏状 八字型 菌体染色不均匀 出现节段染色或异染颗粒 好氧和兼性厌氧 触酶阳性 C pekinense是生产Glu的高产菌株 Recently ageneintheCorynebacteriumspecieswasclonedintoErwiniaherbicola enablingittomake2 KLG 2 keto L gulonicacid inasinglefermentationC diptheriaecausesdiptheria 2Arthrobacter 形态上的特点是 在培养基上的幼龄细胞为不规则杆状 G 随着菌龄的增加转变为球状 G 变为G 不运动 好氧 呼吸型代谢 是土中的优势种类 抗旱 耐饿 广食 有些种能降解除草剂 二嗪农 苯酚 咖啡因 尼古丁等 3Bifidobacterium 菌体多形 因菌体尖端成分枝状 如Y V字形 故名 厌氧 发酵代谢 最适生长温度37 41 最适pH是6 5 7 0生理作用 能在肠道内合成多种维生素 分泌磷蛋白磷酸酶促进人乳中酪朊的消化 产生乙酸和乳酸抑制病原菌 母乳喂养的婴儿肠道中含大量这种菌 因为母乳中含有双歧杆菌生长所需要的N acetylglucosamine 乙酰葡聚糖 2Gram NegativeBacteria革兰氏阴性细菌 一 Aerobic Microaerophilic Motile Helical VibrioidGram NegativeBcteria需氧的 或微需氧的 运动的 螺旋状或弧状的G 细菌 1螺菌属Spirillum 只有一个种 即迂回螺菌 1 4 1 7 14 60 螺旋状 大部分菌株体内含有PHB颗粒 具两极丛生鞭毛 不易在固态培养基中形成菌落 在蛋白胨 琥珀酸盐 无机盐 PSS 的0 7 Agar培养基中的菌落为具有丝状边缘的针尖状物 可以从不流动的池水中分离到 2固氮螺菌属Azospirillum 细胞呈弧状或直杆状 通常两端尖 具单极生鞭毛 在微好氧条件下能固氮 菌体内含PHB颗粒 是70年代以来引起广泛兴趣的一个固氮菌 主要在玉米 小麦 水稻等根际发现 可以保持热带土壤的肥力 A brasilense 二 Gram NegativeAerobicrods需氧的G 杆菌 1Pseudomonas 直或弯曲的杆菌 0 5 1 1 5 4 具极生鞭毛 单毛或丛毛 菌苔红色 呼吸代谢 有些是兼性化能自养菌 能以H2或CO为能源 可用于制造多种产品 如水杨酸 苯甲酸 生物素 酮戊二酸 味精等 在治理污染方面也有重要用途 P fluorescens Thecapacitytoproducetheinsect killingBttoxinhasbeentransferredfrombacilliintothisbacterium aspeciesofsoilbacteriathatinhabitstherhizosphere ProducingBttoxinrightattherootsurfaceprotectsplantrootsfromdestructivesoilinsects P aeruginosa氧化萘生成水杨酸 清除有机磷 P syringae 是一种常见的冰核细菌 易造成某些植物的霜冻 国外有人用遗传工程的方法去掉编码冰核蛋白的基因得到所谓的ice minusbacteria 将这种细菌喷到霜敏感植物 例如草莓 的叶片上面 能有效地防止霜冻的发生 2Azotobacter 卵圆形或短杆状 形成厚壁孢囊 对酸敏感 能利用糖 醇 有机酸为C源 利用N2 NH4盐 NO3 尿素为N源 比较Cyst和Endospore的区别 Ashby Medium 3Rhizobium 细胞杆状 以2 6根周毛或单根鞭毛运动 能利用多种碳水化合物 但不能利用纤维素或淀粉 在根瘤中为类菌体 变成类菌体时才产生豆血红蛋白和固氮酶 因而才能固氮 4Acetobacter 细胞椭圆形至杆状 单个 成对或成链 周毛或无 在中性和酸性条件下可氧化乙醇成乙酸 氧化乙酸盐和乳酸盐成CO2和H2O 用含2 CaCO3的麦芽汁琼脂 也可加入3 乙醇 分离醋酸菌 三 FacultativelyAnaerobicGram NegativeRods兼性厌氧的G 杆菌 1Escherichia 0 5 0 8 1 0 3 0 周生鞭毛或无 菌落白 灰白 发酵葡萄糖产酸产气 大多数能发酵乳酸产酸产气 IMViC 产生Colicin 可以作为饮用水的卫生指标之一 2Shigella Dysenterybacteria 无鞭毛 无荚膜 有菌毛 大多数不发酵乳糖 发酵葡萄糖产酸不产气 不产生H2S 不能利用柠檬酸盐或丙酸盐作为唯一碳源 因为具有菌毛和内毒素 所以导致痢疾 3Salmonella 周生鞭毛 无荚膜 不发酵乳糖 发酵葡萄糖 麦芽糖 甘露醇产酸产气 能利用柠檬酸盐为唯一C源 产生H2S 引起Typhoidfever 用Widal sTest来检验 用SS琼脂来分离志贺氏菌属和沙门氏菌属的致病菌 4耶尔森菌属Yersiniapestis 鼠疫杆菌Y pestis由老鼠到鼠蚤到人 再通过人蚤或呼吸道途径在人群间流行 也称黑死病 5Vibrio V cholerae蝌蚪形的G 菌 弧状或直杆状 具一根鞭毛 耐碱不耐酸 在pH8 8 9 0的碱性蛋白胨培养基上生长迅速 V choleraecausesCholera 产生外毒素激活腺苷环化酶 提高了cAMP水平 使Na K 水主动分泌 丢失 导致腹泻 呕吐 历史上曾发生8次世界性大流行 四 DissimilatorySulfate orSulfur ReducingBacteria还原硫酸盐或硫的异养细菌 是生理相似 形态各异 严格厌氧的G 菌 能将SO42 S还原为H2S 存在于淤泥 淹水土壤 淡水 海水 沉积物 人及动物肠道 参与S矿的形成 他们的作用产物在无氧条件下被光合细菌氧化成S 在有氧情况下被无色硫细菌氧化为S 累积成矿 Desulfovibriospp areresponsibleforthecolorandhencethenameoftheBlackSea theH2Sthesebacteriaproduceinitsdepthsformsblackmetalsulfidesinthewater 也能引起水污染或对钢缆 钢管腐蚀 3Archaeobacteria古细菌 古细菌即产甲烷菌和极端嗜盐菌 嗜热菌 共同特征是细胞膜含有植烷甘油醚 细胞壁内缺乏肽聚糖 其5S 16S 23SrRNA序列与细菌和真核生物相应的rRNA有很大差别 一 Methanogens产甲烷菌 是一群具有相同生理特性而形态各异的细菌 严格厌氧 生理特性 氧化H2 甲酸盐或乙酸盐来获得能量 并还原CO2为CH4 生境 水体的沉积物 沼泽 水稻田 厌氧污水处理消化池 动物肠胃系统 地热温泉 分类 甲烷杆菌属Methanobacterium甲烷短杆菌属Methanobrevibacter甲烷球菌属Methanococcus甲烷微菌属Methanomicrobium甲烷产生菌属Methanogenium甲烷螺菌属Methanospirillum甲烷八叠球菌属Methanosarcina 甲烷的形成是一个复杂的生物学过程 有多种细菌参加反应 多糖单糖醋酸盐 H2CO3 甲酸盐 CH4 CO2丙酸盐 丁酸盐 乳酸盐 二 Halophiles嗜盐菌 是指那些在2 5 5 2MNaCI中生长的菌 由于细胞内含有C50类胡萝卜素 使其菌落具有各种红色色调 Theycanalsocarryoutaprimitiveformofphotosynthesis ThecytoplasmicmembraneofHalobacteriumisdifferentiatedintopatchescalledpurplemembranesthatcontainthepigmentbacteriorhodopsin Bacteriorhodopsinissimilartorhodopsin thelight sensitivepigmentintheeyesofvertebrates Bacterirhodopsinconverts lightintochemicalenergy Ituseslightenergytoexpelaprotonfromthecell thuscreatingaprotongradientthatcanbeusedtogenerateATP Halobacterium杆状细胞 有些为多形态 G 含两种DNA成分 较大组分的G Cmol 为66 68 较小的部分G Cmol 为57 60 生长需要Mg2 最适温度35 50 pH范围5 5 8 5 三 Thermoacidophiles嗜热菌 细胞呈杆状 丝状或球状 G 最适温度70 105 嗜酸和嗜中性 大多数代谢硫 如Pyrococcus火球菌属 存在于热的海水中 4Anoxygenicphototrophicbacteria光合细菌 一 共同特征含有细菌叶绿素和类胡萝卜素 使菌液呈红 橙 黄 绿 紫 棕等色 进行不放氧的光合作用 大多数能固氮 二 分类PurplebacteriaGreenbacteriaGeneraIncertaeSedis 1Purplebacteria 细胞含细菌叶绿素a或b和1 4族类胡萝卜素 生境 各种水生环境中含硫化物的厌氧区 池 沟 湖 河 温泉 盐湖等 A 大多数种不能以硫化物作为唯一光合电子供体而生长 没有一个种能利用S作为电子供体 红螺菌科RhodospirillaceaeB 能以硫化物作为光合电子供体而生长 有硫化物时 在细胞内或外都能形成元素S球 并进一步氧化成SO42 着色菌科Chromatiaceae 外硫红螺菌科Ectothiorhodospiraceae 2Greenbacteria 细胞含细菌叶绿素c d e和5族类胡萝卜素 绿硫细菌 球形 杆状 严格厌氧 电子供体为硫化物或硫或有机物 绿色非硫细菌 细胞呈链状排列 兼性好氧 优先以有机物为电子供体 5AerobicChemolithotrophicBacteria好氧的化能无机营养细菌 化能自养菌 通过氧化无机物获得能量 并以CO2为唯一或主要碳源 一 Nitrifyingbacteria硝化细菌 能消耗还原态的无机氮化合物进行化能无机营养生长的细菌 不能在有机培养基上生长 在无机培养基上生长缓慢 平均代时10h以上 7 10d培养以后才能见到微小的菌落 分离纯化困难 又分2个生理群 1亚硝化细菌 将氨氧化成亚硝基亚硝化单胞菌属Nitrosomonas亚硝化螺菌属Nitrospira亚硝化球菌属Nitrosococcus亚硝化叶菌属Nitrosolobus 2硝化细菌 将亚硝基氧化成硝基硝化杆菌属Nitrobacter硝化球菌属Nitrococcus硝化刺菌属Nitrospina 二 Sulfurbacteria无色硫细菌 能氧化还原态或部分还原态的无机硫化物的非光能营养型细菌 Thiobacillus硫杆菌属细胞杆状 G 专性好氧 能氧化硫化物 S2O32 S2O62 SCN2 最终的氧化物是硫酸盐 在细胞内或外可沉积S 耐酸性极强 主要分布于各种酸性矿井水 污水 含硫矿泉水 易造成金属构件腐蚀 可用于细菌冶金 6放线菌Actinomycetes Actinomyces 生长早期产生分支的菌丝体 基内菌丝体 48h以后断裂成杆状或球状细胞 V形 Y形排列 厌氧或兼性厌氧 菌落污白色 表面粗糙 干燥 易碎 主要存在于人和动物的各种粘膜表面 Actinomyces Nocardia 产生大量的基内菌丝 一般5d后开始断裂成杆状 叉状 链状 菌落颜色呈红橙 粉红 黄 紫等 好氧 少数厌氧 主要分布于土壤中 能产生Rifamycin 也可用于石油脱蜡 烃类发酵以及污水处理 分解氰类化合物 Frankia 绝对共生菌 和非豆科植物 杨梅 沙棘 胡颓子等 共生固氮 形成根瘤 有较发达的基内菌丝 无气丝 菌丝中间或顶端可形成孢囊 Cyst 孢囊呈不规则的圆形 椭圆形 大小约10 100 孢囊内形成大量孢子 固氮酶存在于泡囊 Vesicle 内 泡囊直径1 5 5 能以N2为唯一氮源 在培养时提供铵盐更好 细胞中含有两种谷氨酰胺合成酶GS1 GS2 当利用铵盐时GS1起主要作用 当利用N2时则是GS2起作用 Actinoplanes 孢囊着生于基内菌丝上 球形 棒形或不规则形 基丝有分支 在蛋白胨察氏或其他培养基上菌落颜色鲜艳 有橙 红 黄 紫等 主要分布于土壤和腐烂植物材料上 可产生多种抗生素如创新霉素 Creatmycin 台东霉素 Taitomycin 等 Streptomyces 基丝纤细 0 5 0 8 气丝是基丝的2倍 在气丝上形成各种形状的孢子丝 有直形 波曲 螺旋等 菌落质地紧密 分离挑起困难 表面呈粉状 绒状或茸毛状 基丝 气丝 基质可呈各种颜色 腐生 好氧 25 35 土壤是大本营 Micromonospora 基丝很发达 有分枝 孢子单生 无柄或着生在短的孢子梗上 孢子梗单轴分枝或合轴分枝 菌落与基质紧密结合 呈橙黄色 紫红色 老龄菌落表面覆盖一层黑褐色的油层 是孢子堆积所致 大多数种强烈分解蛋白质 纤维素和淀粉 能合成多种抗生素如庆大霉素 Gentamycin 有的种能产生VB12 Thermoactinomyces 气丝和基丝上都能形成单个孢子 能在45 60 生长 其孢子耐热 有多层壁 含DPA 吡啶二羧酸 气丝白色 菌落全缘或边缘呈丝状 生长极快 牛肉膏培养基最适于培养该菌 分布在堆肥 厩肥 自热草堆等 第二节丝状真菌分类 采用Ainsworth分类系统 将真菌列为一界 界下分粘菌门和真菌门 真菌门下分为5个亚门 一 鞭毛菌亚门 产生无性的游动孢子 Zoospore 和 或配子 有性的休眠孢子囊 Restingspotangium 或卵孢子 Oospore 根据鞭毛的数目和位置分为4纲 壶菌纲 丝壶菌纲 根肿菌纲 卵菌纲 1Saprolegnia水霉属 菌丝体形成棒状的游动孢子囊 孢子囊内形成梨形 前端着生两等长鞭毛 一尾 一茸 的初生游动孢子 休止孢囊 萌发形成肾形 凹陷处侧生两根方向相反的次生游动孢子 又休止 后萌发出芽管发育为新的菌丝体 当条件适于有性生殖时 长出藏卵器和雄器 减数分裂发生在雄器和藏卵器内 受精 受精的卵球发育成卵孢子 卵孢子萌发一个芽管 形成芽孢子囊 释放游动孢子 寄生水霉S parasitica引起鱼和鱼卵的疾病 招致商业的重大损失 Pythium腐霉属 在培养基上或瓜果上菌丝体是雪白的绒毛状 很像棉花 条件适合时 孢子囊内的内容物流入泡囊 并在泡囊内形成游孢 次生游孢 游孢成熟时泡囊破裂 孢子散出 引起多种经济植物的猝倒 茎腐和果腐等疾病 能产生果胶酶 纤维素酶 转化甾族化合物 Phytophthora疫霉属 疫霉不形成泡囊 或者即使形成泡囊 游动孢子先在孢子囊内形成 寄生性较强 致病疫霉P infestans 马铃薯晚疫病菌 也能危害番茄 茄子等茄科植物 二 接合菌亚门 Rhizopus 突出特征是形成匍匐菌丝和假根 假根产生在匍匐菌丝与基质接触的地方 在假根相对处向上长出孢囊梗 顶端形成孢子囊 具囊轴 囊托 异宗配合形成接合孢子 Zygospore Mucor 无匍匐菌丝和假根 孢囊梗直接由菌丝体长出 一般单生或分枝 分枝有单轴式或假单轴式 具囊轴 无囊托 Absidia犁头霉属 形成匍匐菌丝和假根 孢囊梗散生在匍匐菌丝中间 假根不太发达 能转化多种甾族化合物 Blakeslea布拉霉属 大孢子囊着生在不分枝的孢囊梗顶端 小孢子囊着生在孢囊梗分枝末端的泡囊上的小梗上 大小孢子囊内形成的孢囊孢子大小有差别 均为具条纹 2端具成束的附属丝 B trispora Choanephora笄霉属 大孢子囊着生在不分枝的孢囊梗顶端 小孢子囊为单孢孢子囊 或分生孢子 着生在泡囊的表面小突起上 孢囊孢子暗色 大多有线状条纹 2端具成束的附属丝 分生孢子暗色 无线状条纹 也无附属丝 C cucurbitarum Phycomyces须霉属 不产生匍匐菌丝 孢囊梗不分枝 配子囊弯曲形似钳状 配囊柄上的附属丝顶端呈双叉分支 异宗配合 P blakesleeanus 可用来生产柠檬酸 五倍子酸和类胡萝卜素 三 子囊菌亚门 形成子囊孢子Ascospore 子囊Ascus 子囊果Ascocarp Monascus红曲霉属 闭囊壳具由一两层扁平细胞构成的包被 产生串状排列的分生孢子 无明显分化的分生孢子梗 能在培养基中分泌可溶性红色素 Monascoflavin C22H24O5 Monascnflavin C17H22O4 制造红曲 图4N2的闭囊壳 10 10 Fig 4CleistotheciumofN2 10 10 图1N1的分生孢子 10 40 Fig 1ConidiaofN1 10 40 图5N1的闭囊壳 10 40 Fig 5CleistoteciumofN1 10 40 Neurospora脉孢菌属 分生孢子梗2叉分支 分生孢子成串 异宗配合 子囊壳圆形 短颈 褐色 子囊孢子成熟后具纵的花纹 黑色或黑褐色 培养特征 培养基上具网状的长菌丝 最初为白色 待形成分生孢子后 呈粉红色或黄色 Claviceps麦角 在禾本科植物的子房内寄生 后期形成圆拄形或香蕉形褐色或白色菌核 菌核休眠后产生子座 子囊壳埋生在头部的表层内 麦角 麦角硷 色氨酸 Cordyceps虫草 冬虫夏草C sinensis 侵害鳞翅目尺蠖科昆虫幼虫 Cordycepssp Cordycepssp Morchella羊肚菌 子囊果为变态的子囊盘 圆拄形子囊埋生在头部 黑脉羊肚菌 Morchellaangusticeps 圆锥羊肚菌 Morchellaesculenta 羊肚菌 Morchellasemilibera Tuber块菌 子囊果为变态的子囊盘 外有包被 子囊果内有腔 T melanosporum 黑孢块菌 Tubermelanosporum 黑孢块菌 Tubermelanosporum 鲜色肉盘菌 Cookeinasp 棒形肉座菌 Podostromaconu damae 鹿角菌 Xylariahypoxilon 四 担子菌亚门 形成担孢子Basidiospore 担子Basidium 担子果Basidiocarps 分为冬孢子纲 层菌纲 腹菌纲 Uredinales锈菌目 无担子果 担子从冬孢子上产生 不形成子实层 冬孢子 双胞 单核2倍体 有柄 生活史中产生5种孢子 性 锈 夏 冬 担 有4000多种 寄生菌 引起植物的锈病 禾柄锈菌 Pucciniagraminis Ustilago黑粉菌属 在寄主内为发达的菌丝体 在人工培养基上为酵母状细胞 形成厚壁的冬孢子 Teliospore 冬孢子担孢子初生菌丝次生菌丝引起黑粉病 在植物体上产生菌瘿 可以用来发酵生产氨基酸 衣康酸 吲哚乙酸 黑粉酸 玉米黑粉菌 Ustilagomaydis Tremellafuciformis 白色 半透明 胶质 花朵状 食用 药用 担子具纵隔 主治肺热咳嗽 胃炎 痢疾 雀斑 产生在栎 柳 杨 桃 桑 龙眼等树的朽木上 胶勺耳 Phlogiotishelvelloides Auriculariaauricula 褐黑色 胶质 耳状 杯状 腹面光滑 背面有毛 粗糙 担子具横隔 主治毒蕈中毒 血脉不通 麻木不仁 产生在栎 榆 柳 杨 桃 槐 枣等树的朽木上 伞菌 Agaricales 有明显的菌盖 菌柄 子实层着生在菌褶 或菌管 上 肉质 食用 药用 部分有毒 裸果式 半被果式发育 重要伞菌毒蘑菇 鹅膏菌 Amanitamuscaria 鹅膏菌 Amanitahemibapha 鹅膏菌 Amanitamuscarial 鹅膏菌 Amanitamuscarial 鹅膏菌 Amanitasp 毛头鬼伞 Coprinuscomatus 食 丝膜菌 Cortinariussp 丝膜菌 Cortinariusvanduzerensis 疣柄牛肝菌 Leccinumsp 红菇 Russulasp 裂褶菌 Schizophyllumcommune 食 双孢蘑菇 Agaricusbisporus 短柄乳牛肝菌 Suillusbrevipes 食 香菇 Lentinulaedodes 香菇 Lentinulaedodes 糙皮侧耳 Pleurotusostreatus 假松茸 Trichlomabakamatsutake 食 翘鳞环锈伞菌 Pholiotasquarrosa 蜡伞 Hygrocybesp 蜡伞 Hygrocybesp 蜡伞 Hygrocybepakelo 牛肝菌 Boletusxylophilus 牛肝菌 Boletuszelleri GanodermaandHericium 灵芝 G lucidum 菌盖肾形或半圆形 木栓质 红褐色 有漆状光泽 子实层着生在菌管内壁 菌柄侧生有光泽 猴头菌 H erinaceus 子实体上密生肉质 针状的刺 子实层着生在菌刺上 枝瑚菌 Ramariaaraiospora 灵芝 Ganodermalucidum 灵芝 Ganodermalucidum 灵芝 Ganodermasp 猴头菌 Hericiumerinaceus Fistulina 子实体肉质 表面粘 粉红色或血红色 圆球形 舌状 匙形或肝脏形 无柄或短柄 发酵液中含牛舌菌素可人工栽培 牛舌菌 Fistulinasp 腹菌 鬼笔 竹荪 马勃 灰包 被果式发育 由包被和产孢组织构成 产孢组织一般是多腔的 担子就着生在腔室的内壁上 Phallus 幼时球形 后伸长使包被 外菌幕 破裂 留下菌托 菌盖钟状 有深网格 生有暗绿色的粘而臭的孢子液 柄白色 海绵状 中空 白鬼笔 Phallusimpudicus 食 鬼笔 Phallushadriani 蛇头菌 Mutinusbambusinus 蛇头菌 Mutinussp 散尾笼头菌 Lysurusmokusin 丛角锤端笼头菌 Kalchbrenneracorallocephala Dictyophora竹荪 发育方式与鬼笔同 菌盖 菌柄亦同 另外有网状菌裙 长裙竹荪 短裙竹荪 黄裙竹荪 长裙竹荪 Dictyophoraindusiata 食 短裙竹荪 Dictyophoraduplicata 食 短裙竹荪 Dictyophoraduplicata 黄裙竹荪 Dictyophoramulticolor Lycoperdon灰包 Calvatia马勃 生于地上 球形 大小不等 包被2层 产孢组织成熟后粉末状 大马勃 Calvatiagigantea 食 大马勃 Calvatiagigantea 网纹灰包 Lycoperdonperlatum 食 地星 Geastrumsp 五 半知菌亚门 Penicillium 帚状枝 单轮型 对称二轮型 不对称型 多轮型种下分系 Czapekmedium为标准培养基 Aspergillus 足细胞分生孢子梗顶囊小梗 Trichoderma 菌落生长迅速 棉絮状或致密丛束状 菌落表面为不同程度的绿色 白色 分生孢子梗上对生或互生分枝 分枝的末端为瓶梗 瓶梗与着生它们的分枝之间大致成直角 Cephalosporium 分生孢子梗从气丝上生出 很短 分生孢子靠粘液粘成头状 产黄头孢 顶头孢可以产生头孢菌素 Alternaria 链格孢霉分生孢子倒棒状 顶端延长成喙状 有壁砖状分格 链状排列 暗褐色绒状菌落 Fusarium 镰孢属分生孢子有大小两种 大的呈镰刀形 多胞 基部常有 脚胞 小的各种各样 单胞或多胞 F moniliforme能产生赤霉素 F graminea产生玉米赤霉烯酮 第三节酵母菌分类 Lodder1970年建立的针对酵母菌的分类系统 形成子囊孢子的归入子囊菌亚门 半子囊菌纲 内孢霉目 形成冬孢子与担孢子的归入担子菌亚门 冬孢子纲 黑粉菌目 形成掷孢子的归入担子菌亚门 冬孢子纲 掷孢酵母科 未发现有性过程的归入半知菌亚门 芽孢纲 隐球酵母目 扣囊拟内孢霉Endomycosisfibuligera 子囊孢子 菌丝体 芽生孢子 假菌丝子囊孢子帽形 能产生淀粉酶 以淀粉质原料及其废液生产饲料蛋白 裂殖酵母菌属Schizosacharomyces 以裂殖进行无性繁殖 营养细胞接合形成子囊 子囊孢子4 8个 球形或卵形 发酵葡萄糖 不发酵半乳糖 乳糖 粟酒裂殖酵母 在用洋姜制成的未水解的糖液中发酵能得到高产量的酒精 酵母菌属Saccharomyces 营养细胞球形 卵形 腊肠形 多边芽殖 单倍体 双倍体营养体并存 子囊内含1 4个子囊孢子 液体培养时无菌膜 酿酒酵母S cerevisiae 毕赤酵母属Pichia 子囊孢子球形 帽形 土星形 子囊成熟时易破裂放出孢子 发酵糖的能力弱 不产生酒精 麦芽汁中易形成膜 常使酒类 酱油变质形成白色干燥浮膜 掷孢酵母属Sporobolomyces 能产生掷孢子 ballistospore 因能形成镜像 也叫 镜酵 产生类胡萝卜素 假丝酵母属Candida 可以形成假菌丝 不产生子囊孢子 不产生色素 可以用来利用正烷烃进行石油发酵脱蜡 也可作为食用酵母和饲料酵母 有些种能引起念珠菌病 脑膜炎等 红酵母属Rhodotorula 多数不形成假菌丝 菌落因产生荚膜而成粘质样 能产生类胡萝卜素 有积累大量脂肪的能力 可达菌体干重的60 故又称脂肪酵母 常见的食品污染菌 球拟酵母属Torulopsis 菌落因产生荚膜而成粘质样 但无色素 有些种能耐受高浓度糖和盐 某些种能产生不同比例的甘油 赤藓醇 甘露醇 在适宜的条件下能将40 的葡萄糖转化成多元醇 第三章资源微生物的分离 第一节分离资源微生物的基本原则 一 选择样品的原则 1 环境因素不同菌生长所需的温度 湿度 酸碱条件都不同 目的菌的这些条件如果已经确定 那就应该根据这些条件来选择样品 2 营养类型和营养基质 二 样品采集与处理 1 注意无菌操作2 根据菌的分布特点和部位采集样品3 采样前要尽量减少喷施农药 菌肥 化肥等活动 以确保分离到自然分布的菌群 4 以分离放线菌为目的的土样要经过风干处理 以减少细菌的干扰 5 采取相应的增菌处理措施 三 培养基成分的设计原则 开发意图放在分离过程中 例如要开发低温碱性脂肪酶 培养基里应该以脂肪为唯一碳源 pH在10以上 低温培养 大剂量加入同类化合物 一般来说 产生某种物质的菌 必然对这种物质有抗性 可以在分离培养基中大剂量加入该类物质 使抗这种物质的菌长起来 而不抗这种物质的菌无法生长 加入特殊的营养成分 有时候有些菌需在培养基中加入一些特殊成分 才能满足生长的需要 例如为了分离硅酸盐细菌 需在培养基中加入长石或硅藻土 而不必加入氮源 抑制剂 放线菌酮 制霉菌素抑制真菌 重铬酸钾抑制细菌和真菌 链霉素 青霉素抑制细菌 第二节各类微生物的分离程序 一 细菌二 放线菌1 样品的预处理自然风干5 30天 120 干热处理1小时 2 选择性试剂 如果细菌和霉菌太多 可在培养基中加入呋喃西林 50ppm ml 以抑制细菌 加入制霉菌素 50U ml 抑制霉菌 3 具体分离方法 在营养琼脂上铺一张孔径为0 22 0 45 的纤维酯滤膜 在膜表面接种 培养 适当时候去掉膜 让放线菌继续生长 三 真菌1 小型丝状真菌的分离 用Martin PDA Czepek Sabauraud培养基 稀释分离或划线分离 2 大型丝状真菌的分离 组织分离法 孢子分离法 3 酵母菌的分离 用麦芽汁培养基 划线法分离 第四章发酵与筛选模型的设计 第一节生物活性物质 一 抗生素的活性测定 1 固体 琼脂块 测定法将放线菌涂布于平板上 28 培养4 7天 用接种环切成块 然后接种于分别接有细菌 酵母菌 丝状真菌的平板上 培养观察 如果块周围有透明圈 就说明有抗菌素产生 也确定了抗菌谱 2 发酵液测定法摇瓶培养 如果为水溶性抗生素 可以离心沉淀 然后取用打孔器切下的圆片蘸取发酵液 置于接有不同菌的平板上 观察抑菌圈的大小 如果为脂溶性抗生素 可将离心后的菌丝体用丙酮提取 再用纸片浸取提取液 测定抑菌圈 3 效价测定抗生素的剂量单位常用效价单位 如一个青霉素效价单位为能在50ml肉汤培养基中完全抑制金黄色葡萄球菌标准菌株发育的最小青霉素剂量 一个链霉素效价单位为能在1ml肉汤培养基中完全抑制大肠杆菌标准菌株所需的最小链霉素剂量 1mgNa盐相当于1667个单位 1mg链霉素碱相当于1000个单位 二 FDA法筛选抗菌物质 反应体系 样品 标准实验菌 FDA 二乙酸荧光素 如果样品中有抑制脂肪酶的物质存在 那么脂肪酶 由实验菌产生 水解FDA的强度就减弱 生成的荧光素相应减少 因而在498nm的光吸收也不同 实验需设阳性对照 空白对照 阳性 加青霉素G 空白 不加样品 三 筛选细菌旋转酶抑制剂 如果样品中产生DNA旋转酶抑制剂 那么旋转酶就不能使松弛DNA转变为负超螺旋DNA 程序 旋转酶 从E coli中提取 松弛DNA 底物 样品保温 再用琼脂糖凝胶电泳检测是否有超螺旋DNA存在 如有则说明样品中无抑制剂产生 四 筛选和鉴别氨基糖苷 AMG 初筛 测定样品对粘质沙雷氏菌的抗菌活性 野生型对AMG敏感 突变株不敏感 耐药 排除链丝菌素 如果在加有样品液的平板上淡紫灰链霉菌能够生长 说明样品中含有链丝菌素 复筛 测样品的抗菌谱 对18株菌株的抗菌谱 如果样品的抗菌谱与已知的AMG的抗菌谱不同 就说明是新AMG 五 内酰胺酶抑制剂的筛选 一种G 菌可以