肤悦康熏洗液对变应性接触性皮炎的药效及机理研究

肤悦康熏洗液对变应性接触性皮炎的药效及机理研究摘要：目的本实验通过建立豚鼠变应性接触性皮炎模型，观察肤悦康熏洗液对变应性接触性皮炎的治疗作用及探讨其作用机制。方法本实验以2,4-二硝基氯苯（DNCB）诱发建立豚鼠变应性接触性皮炎（ACD）模型，外用肤悦康熏洗液及外用泼尼松作对照，观察分组给药后豚鼠背部皮肤红肿程度及组织病理变化，同时用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测各组豚鼠血清中白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）及白介素-10（IL-10）表达水平。结果ACD模型的豚鼠不同程度地出现皮肤红肿结痂，血清中IL-2及IL-10浓度下降，而IL-6则上升，镜下观察未见正常对照组豚鼠皮肤有炎症细胞，DNCB激发后豚鼠皮肤则见不同程度的表皮细胞变性，说明实验造模成功。给药治疗后，与模型对照组比较，各浓度的肤悦康熏洗液对豚鼠变应性接触性皮炎治疗效果有显著性的的差异，主要表现在豚鼠皮肤的红肿程度减弱，不同程度地改善了表皮细胞炎性，上调了模型动物血清中IL-2及IL-10水平，而抑制了上升的IL-6水平。结论肤悦康熏洗液对变应性接触性皮炎有治疗作用，其作用机制可能与抑制IL-6及促进IL-2、IL-10等细胞因子的释放有关。关键词：肤悦康熏洗液；变应性接触性皮炎；药效研究；作用机理注：本论文题目来源于教师的中山市卫生局医学科研立项项目，项目编号为：2013J103EffectsandmechanismsofFuyuekanglotionOnguinea-pigallergiccontactdermatitisAbstract:ObjectiveToobservetheFuyuekanglotioneffectsandthemechanismofitonguinea-pigallergiccontactdermatitisbyestablishingallergiccontactdematitsmodel.MethodsTheguinea-pigmodelofACDinducedby2,4-dinithochor-benzere(DNCB)wasestablished.Guinea-pigwererandomlydividedinto5groups-blankgroup,DNCBmodelgroup,low-levelandhighdosesofFuyuekanglotionandprednisonegroup.Guinea-pigskinswellingandhistopathologieswereobserved.Theserumlevelofinterleakin-2，interleakin-6，interleakin-10andexpressionofIL-2,IL-6,IL-10weredetectedbythemethodofELISA.ResultsTheACDguinea-pigshadswellingsymptomsinvaryingdegrees.ThelevelsofIL-2andIL-6weredeclined,butthelevelofIL-10wasrose.Inflammatorycellswerenotvisibledunderamicroscopeinthenormalcontrolgroup.TheACDguinea-pigsshowedepidermalcelldegenerationindifferentdegrees.Theresultsshowedtheguinea-pigmodelofACDweresucceed.Afterdrugadministration,therewasdifferenceoftheeffcetsbetweenDNCBmodelgroup,low-levelandhighdosesofFuyuekanglotionandprednisonegroup.Fuyuekanglotionreducedtheswellingdegree、improvedtheinflammatorycellsanddeclinedthelevelofIL-6intheserumoftheACDguinea-pig,butrosethelevelsofIL-2andIL-10.ConclusionFuyuekanglotioncouldrelievetheinflammationofACD.ThemechanismofitsactionmayberelatedwithinhibitingthereleaseofIL-2,IL-6andIL-10.Keywords:Fuyuekanglotion,allergiccontactdermatitis,pharmacodynamics,mechanism目录摘要.I-II1前言.12实验材料.12.1试剂.12.2仪器.12.3动物.23实验方法.23.1豚鼠变应性接触性皮炎模型的建立.23.2实验分组及给药.23.3观察及检测指标.33.4统计方法.34结果.44.1豚鼠皮肤变化.44.2生化指标.54.3组织病理学观察.55结论.66讨论.77参考文献.9综述.10致谢.1901前言变应性接触性皮炎（ACD）是迟发型变态反应引起的炎症皮肤病，是T细胞介导的针对皮肤接触致敏原的免疫反应，属于IV型超敏反应。目前用于控制急性变应性接触性皮炎炎症的药物主要使用抗组胺药物、糖皮质激素、保湿剂外用以及控制反复感染等为主，以达到镇静、止痒和抗炎抗感染的作用。但是以上药物均有副作用，长期使用会降低皮肤的抵抗能力，而中药治疗变应性接触性皮炎有着独特的优势，能通过多种途径，达到祛风利湿、清热润燥、抗过敏的功效，注重整体平衡，副作用小，刺激性较小，从而在根本上治愈变应性接触性皮炎。本文探讨的肤悦康熏洗液为中山市中医院制剂室配制，主要由苦参、芦荟、荆芥、地肤子等中药煎煮而成。本文初步探讨了肤悦康熏洗液对于变应性接触性皮炎的治疗效果，为肤悦康熏洗液的临床应用提供依据，现将研究的实验结果报告如下。12实验材料2.1试剂肤悦康熏洗剂（批号：20140924，由中山市中医院制剂室提供）醋酸泼尼松龙注射液（生产厂家：华中药业股份有限公司，生产批号：20140510）TNF-、IL-2、IL-6、IL-10、IL-18、TXB2、PGE2ELISA试剂盒（Cloud-CloneCorp.）2,4-二硝基氯苯（2,4-dinitroehloro-benzol，DNCB）（厂家：上海远慕生物科技有限公司，实验时用丙酮配成5%和0.5%的DNCB丙酮溶液）丙酮和甲醛均为AR纯，蒸馏水由中山市中医院制剂室提供2.2仪器MultiscanFC型酶标仪（美国Thermo）Wellwash洗板机（美国Thermo）BX-50型显微镜（日本Olympus）T2000型电子天平（常熟市双杰测试仪器厂）MDF-382E（N）超低温冰箱（日本三洋）2.3动物2.3.1实验动物普通级豚鼠，白色短毛，45周龄，250300g，共60只，雌雄各半。由广东省实验动物中心提供，实验动物生产许可证：SCXK（粤）2013-0020。2.3.2饲养环境均饲养于广东省中山市中医院中药药理实验室。环境温度1822，相对湿度4060%，通风良好、环境安静，室内保持明10小时、暗14小时。动物购进后观察1周，实验分组时，每组动物体重差异不超过平均体重的20%。23实验方法3.1豚鼠变应性接触性皮炎模型的建立取豚鼠60只，参照文献1-2受试豚鼠于实验前一天腹部剃毛，面积3cm3cm，作为致敏区，实验当天以5%DNCB丙酮液50uL外涂剃毛区致敏，一天一次。2周后，除正常组外其余豚鼠在背部脊柱两侧剃毛，按需要设1块3cm3cm并作好标记作为激发区，以0.5%DNCB丙酮液100uL涂满激发区激发，正常组涂以相同体积的丙酮3-4，每周1次，连续3次。记录激发后背部皮肤变化。最后一次激发后48小时内如有红斑、鳞屑、水肿、抓痕等则表示造模成功。3.2实验分组及给药末次激发后24小时，将豚鼠分为肤悦康洗剂高剂量组（2.4g生药/ml）；肤悦康洗剂低剂量组（1.2g生药/ml）；泼尼松龙注射液组（5ml:0.125g）；模型对照组；正常对照组。每组1013只。每日上午和下午分别于激发区外涂相应的药物1次，每次1分钟，直至药物吸收；模型对照组、正常对照组外涂生理盐水，连续给药5天。3.3观察及检测指标3.3.1背部皮肤肿胀度分别观察治疗前（分组后给药前），治疗5天后停药1天的皮损评分情况。评分标准：0-无可见红斑及水肿；1-勉强可见红斑及轻度水肿；2-粉红色红斑及中度水肿；3-鲜红色红斑及重度水肿；4-非常明显及带痂的红斑及强烈水肿。根据评分结果计算疗效指数。治疗前积分减治疗后的积分，再除以治疗前的积分即为疗效指数。33.3.2采血及组织病理观察治疗5天后停药1天，麻醉，腹主动脉取血6ml，1500rmin-1离心20min，取出血清置于微量离心管内，-80度冰箱保存备用。采用双抗夹心法（ABC-ELISA法）测定TNF-、IL-2、IL-6、IL-10、IL-18、TXB2、PGE2表达水平。剪下皮损皮肤，采用10%中性缓冲福尔马林固定液固定，编号备检。在光镜下观察炎症细胞浸润情况，主要指标为：真皮炎性细胞计数：取小块（15mm12mm）皮损组织，于10%福尔马林液中固定，石蜡包埋切片，苏木精-伊红（HE）染色，分别计数10个高倍视野（HPF）真皮炎性细胞数，取其平均值。镜下评分：0-无改变或有少数散在炎症细胞；1-轻度改变，在几个视野可见到少数炎症细胞；2-中度改变，所有视野都可见到少或多的炎症细胞；3-重度改变，几乎全部视野都有大量的炎症细胞；4-严重和强烈的改变，所有视野都可见密集成团的、大量的炎症细胞。3.4统计方法采用SPSS19.0forWindows软件处理，计量资料用（Error!s）表示，组间比较采用单因素方差分析，方差齐性者采用Dunnet-t检验，方差不齐者进行Dunnet-t检验。病理改变计数资料采用Ridit分析。44结果4.1豚鼠皮肤变化2,4-二硝基氯苯（DNCB）诱发建立豚鼠变应性接触性皮炎模型之后，变应性接触性皮炎模型的豚鼠均不同程度地出现皮肤红肿结痂。皮炎豚鼠皮损见图1。在给药治疗之后，变应性接触性皮炎模型的豚鼠背部皮肤的红肿程度均不同程度地减弱，说明肤悦康熏洗液能够减轻变应性接触性皮炎引起的皮肤红肿结痂症状。泼尼松组作为阳性对照组，其疗效指数高于模型对照组，且与正常对照组比较有显著性差异。与模型对照组比较，肤悦康熏洗液高、低剂量组的疗效指数较之提高，且肤悦康熏洗液高、低剂量组与模型对照组对比有显著性差异，说明肤悦康熏洗液对皮炎豚鼠皮损有修复和改善的治疗效果，既是对变应性接触性皮炎有明显治疗的作用。见表1。表1肤悦康熏洗液对皮炎豚鼠皮损的疗效指数（XS）组别N疗效指数（%）正常对照组10模型对照组1128.3315.81泼尼松组1386.5427.12*FYK低剂量组1272.9236.78*FYK高剂量组1369.8733.60*注：*表示与模型对照组对比P0.05。图1接触性皮炎豚鼠皮损情况54.2生化指标相对于正常对照组中豚鼠血液细胞因子的生化指标，模型对照组中豚鼠血液中IL-2和IL-10的浓度下降，而IL-6的浓度上升，正常对照组与模型对照组之间存在显著性差异，说明了实验造模成功。给药治疗后，与模型对照组比较，肤悦康熏洗液高、低剂量对豚鼠变应性接触性皮炎的治疗效果均有显著性差异，均上调了模型对照组豚鼠血液中的IL-2及IL-10的水平，而抑制了上升的IL-6的水平。见表2。说明了肤悦康熏洗液的作用机制可能是通过抑制IL-6及促进IL-2、IL-10等细胞因子的释放来起作用的。表2肤悦康熏洗液对皮炎豚鼠血液生化指标的影响（S）X组别NIL-2（pg/ml）IL-6（pg/ml）IL-10（pg/ml）正常对照组10188.5061.6145.291.9930.876.49模型对照组1052.9923.8050.626.9319.243.52泼尼松组12131.8078.10*46.202.07*25.794.33*FYK低剂量组1292.7332.93*46.412.82*25.574.36*FYK高剂量组1055.0715.6646.151.91*28.665.48*注：表示与正常对照组对比P0.05；*表示与模型对照组对比P0.05。4.3组织病理学观察镜下所见，正常对照组豚鼠皮肤未见有炎症细胞，2,4-二硝基氯苯激发后豚鼠皮肤组织病理检查见不同程度的表皮细胞变性，真皮有不同程度的血管扩张、充血和水肿以及大量炎症细胞浸润，模型对照组与正常对照组之间有显著性差异，说明2,4-二硝基氯苯激发豚鼠变应性接触性皮炎模型成功。相对于模型对照组豚鼠表皮细胞变性的程度，各给药组的皮炎病理改变评分与模型对照组有显著性差异，说明肤悦康熏洗液对这种炎性变化有不同程度的改善，能够减少变应性接触性皮炎豚鼠的炎症细胞，起到对变应性接触性皮炎的治疗作用。见表3和图2。6表3肤悦康熏洗液对皮炎豚鼠病理改变的影响镜下评分组别N01234正常对照组10100000模型对照组1100290泼尼松组*13011200FYK低剂量组*1203900FYK高剂量组*13021100注：表示与正常对照组对比P0.05；*表示与模型对照组对比P0.05。A正常对照组（100）B模型对照组（100）C泼尼松组（100）D肤悦康熏洗液低剂量组（100）E肤悦康熏洗液高剂量组（100）图2肤悦康熏洗液对接触性皮炎豚鼠皮肤病理组织学改变光镜照片（HE染色）75结论肤悦康熏洗液可能通过抑制IL-6及促进IL-2、IL-10等细胞因子的释放来调节血液中的Th1/Th2的分化从而减轻皮炎皮肤的红肿程度和减少皮损炎症细胞，对变应性接触性皮炎有治疗效果。6讨论变应性接触性皮炎是以T细胞及巨噬细胞为主要效应细胞的迟发性超敏反应，是一种引起以单核细胞浸润及组织细胞的损害为主要病理特征的炎症反应5。目前临床上主要外用糖皮质激素及口服抗组胺药来治疗变应性接触性皮炎6，但由于长期使用出现的副作用大，降低皮肤的抵抗能力，给患者带来其他不良的身体反应。而在应用中医理论和采用合适的中药来治疗该疾病的确存在疗效好、副作用小、刺激性较小的优点。本实验采用经典的2,4-二硝基氯苯诱发变应性接触性皮炎模型。在变应性接触性皮炎的发病机制中，不同T细胞亚群及其分泌的细胞因子起着重要的作用。在变应性接触性皮炎的诱导致敏期，T细胞在接触抗原位点后释放的多种细胞因子起着重要的作用7，尤其是IL-6。由表皮细胞分泌的IL-6在抗原刺激后迅速增加，导致朗格汉斯细胞从表皮迁移到局部的淋巴结，并导致炎症反应中多种细胞因子的产生，上调黏附因子和协同共刺激分子的表达。IL-2和IL-10是机体免疫网络调节的重要细胞因子，在免疫调节方面发挥很重要的作用。实验模型豚鼠背部皮肤肿胀程度及血清中IL-2及IL-10浓度均明显提高，而IL-6浓度则明显下降。说明变应性接触性皮炎是由释放IL-2的Th1细胞介导的炎症反映，其发生机制是由于Th1/Th2的分化失衡8。肤悦康熏洗液以苦参、芦荟等为主要原料。其中苦参中的苦参碱可对抗急性渗出性炎症，具有非甾体抗炎的特性，苦参碱还具有免疫抑制作用，研究表明苦参碱对P物质诱导单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）具有干预作用9。芦荟含有较多的黏液素，其中多糖类物质含量高，它不仅具有免疫调节功能，还有8助于细胞分裂，对皮肤的保养修复可起重要作用10。分析实验结果可以得出肤悦康熏洗液可明显减轻豚鼠背部皮肤的肿胀程度，对豚鼠血清中细胞因子有下调或增加的作用，说明此药可能是调节T细胞的分化，进而有治疗变应性接触性皮炎的药理作用。从实验结果上看，低浓度的肤悦康熏洗液的治疗作用略优于高浓度的，其疗效差异有待进一步研究。本文选用醋酸泼尼松龙溶液作阳性对照，探讨肤悦康熏洗液的抗炎作用及其作用机制，为该药的临床应用提供实验依据，印证了运用该药治疗变应性接触性皮炎这种疾病的可行性，同时也充分发挥了中医药的优势。9参考文献1孙明立,魏敏杰,金万宝,等.两种变应性接触性皮炎动物模型的建立及比较J.中国实验动物学报,2008,16(2):132-134.2施新猷,顾为望,主编.人类疾病动物模型M.北京：人民卫生出版,2008：428-429.3李永慧百草益肤制剂对小鼠变应性接触性皮炎的影响及机制研究D扬州：扬州大学，2012.4陈蕾，樊翌明.变应性接触性皮炎动物模型的研究进展J.中热带医学，2008，8(4):683-685.5S,SchwarzT.ImmunoregulatorymechanismsinvolvedinelicitationofallergiccontacthypersensitivityJ.ImmunolToday,1998,19:37.6QureshiAA,FischerMA.Topicalcalcineurininhibitorsforatopicdermatitis:balancingclinicalbenefitandpossiblerisksJ.ArchDermatol，2006,142:633-637.7GrovesRW,AllenMH,RossEL,etal.TumournecrosisfactoralphaisproinflammatoryinnormalhumanskinandmodulatescutanenousadhesionmoleculeexpressionJ.BrJDermatol,2002,118:94.8邢艳玲,张玉环,许建IP-10对变应性接触性皮炎小鼠Th1/Th2型细胞因子表达的影响J.天津医科大学学报,2008,14(4):492-494.9PiguetPF,GrauGE,HanserC,etal.Tumornecrosisfactorisacriticalreac-tionsJ.Exp.Med,1991,173:673.10李天东,罗英,韩文君,等.芦荟的药理作用及其应用研究进展J.中国现代医学杂志,2001,17(23):2881-2886.10综述变应性接触性皮炎的研究进展随着现代生活物质条件的改善和社会环境的改变，现如今社会服务产业的比重开始逐步加大，如化妆美容行业火速壮大，爱美人士开始加入了化妆美发、保养护肤等一系列的美容潮流。居家用品在更大程度的被应用和普及，在给我们带来高效清洁的同时，不少皮肤类疾病已严重影响了大众的生活质量。我们会发现身边的人用了某些化妆品，脸部发红发痒；有些人用了洗发水而出现掉发或鳞屑病；美发师手指长期红斑浮肿等，这些现象都是接触了致敏物质而引起的接触性皮炎。在化工行业、美容美发行业中发生接触性皮炎比例相应较大，成为当前较大的职业危害之一。为了阐明人类皮肤疾病的发病机制和药物的治疗进展，近些年来在动物体内模拟该皮肤病建立模型也取得了很大进展。尤其是鼠类模型因其体型小、占地面积少、实验周期短、子代繁多、可近亲交配和品系的可遗传性、免疫学研究方法丰富、鼠类的免疫系统和皮肤生理学机制明确等优点使得其成为最佳的病理机制研究模型。本研究对近年来豚鼠模拟人类变应性接触性皮炎模型的研究进展进行综述。1变应性接触性皮炎接触性皮炎（Contactdermatitis，CD）是皮肤黏膜由于接触外界物质发生的炎性反应，包括原发刺激性接触性皮炎和变态反应性接触性皮炎。原发刺激性接触性皮炎无个体选择性，任何人接触后均可发生，且无潜伏期，是通过非免疫机制而直接伤害皮肤，当消除刺激物时炎症反应可以很快消失，其发病的原因与原发性刺激物的性质和接触时间长短等有关，例如强酸强碱等的强刺激物质，接触后在短时内在接触部位可发生急性皮炎；再者是长时间接触弱刺激性的物质，像机油、洗衣液、洗洁精等反复接触后也可能导致原发刺激性接触性皮炎的发生。变应性接触性皮炎(Allergiccontactdematitis，ACD）为典型的接触性迟发型超敏反应，属于IV型超敏反应，皮肤或粘膜首次接触致敏物质不11会立刻发病，当再次接触该致敏物质时在12-24小时内少数人会引发过敏反应，这与个体差异有关，它与性别、年龄和皮肤的生理状态等有关。致敏物质多半是小分子半抗原物质，基本无大的刺激性，且小分子半抗原本身并不会表现出免疫原性，需与机体内的蛋白质结合成完全抗原才会引发超敏反应，形成的完全抗原被朗格汉斯细胞摄取、提呈而为T细胞识别，致敏淋巴细胞转化为淋巴目细胞，促使其增殖、分化产生效应T细胞和记忆T细胞，通过血液循环达到全身各处，此时为致敏期；当机体再次接触相同的半抗原即可发生强烈的免疫反应，使效应T细胞释放多种淋巴因子，激发局部炎症反应，即发生变应性接触性皮炎疾病。临床特征为多形皮疹、剧烈瘙痒且易反复发作。能引起变应性接触性皮炎的致敏物主要有动物性、植物性和化学性三种。可以为动物性的动物羽毛、皮屑、毒素等；还可以为金属制品及化工原料，如镍、甲醛、化妆品等。2临床表现变应性接触性皮炎可以分为急性变应性接触性皮炎和慢性变应性接触性皮炎。急性变应性接触性皮炎发病较急，在接触了致敏物质的部位可以清楚的看到红斑、丘疹，严重时皮肤明显出现红肿或出现水疱，疱破了之后形成结痂糜烂，甚至发生坏死。患者患部常有灼热感和瘙痒感，严重者可由局部皮炎发展到全身皮炎。但只要在此急性期期间积极治疗，一般几周内可以痊愈。慢性变应性接触性皮炎为轻度红斑和小丘疹，常见于手部和面部。3发病机制变应性接触性皮炎（ACD）是由T细胞介导的IV型变态反应，其发病机制相当复杂，细胞因子及其受体在ACD发病中发生了怎样的变化和所起到的作用成为众多学者研究其发病机制的焦点。在ACD的发病大致可分为致敏阶段和激发阶段。在致敏阶段，致敏物与表皮细胞的载体蛋白以及表皮内的朗格汉斯细胞（LC）表面的免疫反应性抗原12结合，形成完全抗原复合物。表皮内的朗格汉斯细胞携带完全抗原向表皮真皮交接处移动，使T淋巴细胞致敏，致敏的细胞移向局部淋巴结副皮质区转化为淋巴母细胞，在增殖分化成记忆细胞和效应T细胞，在经血液流遍全身。实验研究表明大约需要4天完成这一致敏阶段。在激发阶段，当机体再次接触同类的致敏原后12-24小时内，致敏物与表皮细胞蛋白结合成完全抗原后与已经致敏的T淋巴细胞发生作用，使致敏的淋巴细胞释放出多种淋巴因子，一系列的皮肤炎症由此激发。ACD发病的主要因素是由于Th1Th2失衡。在ACD发病中，CD8+细胞占多数，对疾病的发生起主要作用；CD4+细胞在发病的晚期阶段数量增加明显，有利于炎症的转归。IP-10可诱导IFN-生成增多，促使细胞向Th1细胞趋化，使Th1Th2分化失衡，促进了变应性接触性皮炎的发生发展1。根据CD4+辅助性细胞（Th）分泌的细胞因子的类型不同，可以将Th细胞分为两个亚群，Th1和Th2。Th1型细胞因子主要包括IL-2和IFN-；Th2型细胞因子主要包括IL-4、IL-5、IL-6和IL-102-3。ACD主要由Th1细胞介导，不同的T细胞亚群及其分泌的细胞因子在其发病机制中起着很大的作用。具体表现在分泌的I型细胞因子增多，T细胞向Th1型分化偏移，其分泌的细胞因子IFN-可调节抗原的呈递和淋巴细胞增殖与分化，增强抗原提呈细胞的抗原呈递效率，调节多种免疫活性介质的合成和分泌，是最有效的激活巨噬细胞的因子，初次抗原提呈导致了原始T细胞的活化和ACD效应细胞的增殖，T淋巴细胞聚集并介导炎症反应，其中主要是CD8+T淋巴细胞亚群，分泌的细胞因子主要是IL-2和干扰素（IFN-）4。同时IFN-在ACD早期也发挥其免疫调节作用5。对IP-10与IFN-关系的研究表明，IP-10在体外可以诱导外周血单核细胞表达IFN-，而在体外可以募集分泌IFN-的细胞到炎症反应部位，从而导致IP-10的分泌是一个不断增强的过程,IP-10主要介导Th1型炎症反应6。同时TNF-为朗格汉斯细胞移行至淋巴结提供重要的信号7，而IL-4则可抑制TNF-诱导的朗格汉斯细胞移行8。4治疗进展4.1西药应用13患者一经得到变应性接触性皮炎疾病，应该主动求医，积极配合医生寻找病因，进行对症治疗，在日常生活中应该尽量远离致敏物质，减少得病的几率。目前用于控制急性变应性接触性皮炎炎症的药物主要使用抗组胺药物、糖皮质激素、保湿剂外用以及控制反复感染等为主9，以达到镇静、止痒和抗炎抗感染的作用。4.1.1糖皮质激素应用局部患位可以选用外用药物进行搽拭。激素可减少中性粒细胞的趋化作用，降低朗格汉斯细胞的功能等，从而使皮肤局部免疫功能下降10。但长期使用糖皮质激素会造成肾上腺皮质功能低下、激发感染等全身副作用，还会引起皮肤萎缩、毛细血管扩张、激素性白内障、青光眼、颜面红斑等，从而影响儿童的生长发育和成人的内分泌系统，停药后容易反复发作，久用会产生治疗抵抗的现象，可见其副作用很大。4.1.2抗组胺药物应用抗组胺药物主要是阻断H1受体而起到止痒的作用11。第二代抗组胺药咪唑斯汀、氯雷他定及西替利嗪临床上主要用于治疗I型变态反应性疾病，也广泛用于属IV型变态反应的湿疹、接触性皮炎等治疗，但其作用机制的研究尚少有报道12。4.1.3其他药物应用保湿剂，例如有凡士林、含肝素类似物的软膏、尿素软膏等，可以通过增加湿度改善过敏性皮肤的一些物理参数。由于大部分ACD患者得变应性接触性皮炎的同时都会被细菌或真菌感染，因此在治疗ACD的同时配合使用抗感染药物有利于抑制病情。国内外尝试通过脱敏治疗来去除内源性物质，但由于患者的发病机制及病因复杂和个体差异等诸多原因，该治疗手段暂未得到评价。4.2中药应用14变应性接触性皮炎病名首见于明代外科启玄，病因为禀赋不耐，内蕴湿热，腠理不密，玄府失固，复因外涂胭脂油彩，以至染毒化热，侵袭肌肤，邪壅肌肤，则发本病，治疗以清热利湿解毒为主。中医将接触性皮炎称之为“漆疮”、“膏药风”、“马桶癣”等。分为风热、湿热、血虚等型。在中医临床上治疗变应性接触性皮炎如急性湿疹上有着独特的优势，通过对近几年的医学报刊上对中药的甄选，多选用清热药作为治疗该疾病的君药。中医方剂中多采用苦参、芦荟以解热解毒。就如肤悦康熏洗液处方就是由苦参、蛇床子、芦荟、白矾、地肤子等组成。4.2.1苦参其中以苦参为代表药，苦参味苦性寒，具有清热燥湿、杀虫、利尿之功效。用于治疗湿疹、湿疮、皮肤瘙痒等病症。苦参含有多种生物碱，以苦参碱、氧化苦参碱、脱氢苦参碱为主要有效成分。有解热抗炎的作用，其作用机制与抑制TNF及IL-6有关。同时也有抗过敏作用，其成分氧化苦参碱对IIV型过敏反应均有抑制作用，其抗过敏机制与稳定细胞膜，抑制肥大细胞脱颗粒释放过敏性物质有关。现代多应用于皮肤病上的各种湿疹、脂溢性皮炎及银屑病、疥疮、足癣、体癣等。苦参中的苦参碱可对抗急性渗出性炎症，具有非甾体抗炎的特性，苦参碱还具有免疫抑制作用。研究发现氧化苦参碱（OMT）对小鼠脾脏T、B细胞的分化、增殖和细胞因子的产生有明细的调节作用，可明显抑制IIV型变态反应13。OMT具有抗炎、抗病毒、抗肝纤维化和保肝降酶、抗癌、升高白细胞、抗心率失常等多种药理作用，且不良反应较少，但作用机制不明。目前广泛用于治疗湿疹、皮炎、乙型肝炎、心率失常和恶性肿瘤等。实验研究结果显示OMT具有强烈抑制DNFB诱发的小鼠耳部ACD作用，且可增加OMT各剂量组小鼠外周血中CD4+、CD25+T细胞数，呈剂量依赖性。推测其抑制作用与CD4+、CD25+T中绝大多数为调节T细胞，对过强或异常的免疫应答具有强烈的抑制作用有关。因此有学者认为与其免疫调节有关，以免疫抑制为主。分子机制研究表明苦参碱对P物质诱导单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）具有干预作用14。MCP-1可能是苦参碱其抗皮肤炎症作用的一个新的靶点。在对苦参的药理研究中发现，苦参总碱能抑制环核苷酸磷二酯酶，提高细胞内15cMAP，抑制肥大细胞脱颗粒分泌组胺及TNF-，对被动或主动皮肤过敏反应均匀明显抑制作用15。现代药理学表明，苦参水煎液及苦参碱均有显著的抗炎作用，很多资料证明了苦参碱的抗炎机制和其抑制磷脂酶A2活性的作用16。OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制，而且抑制小鼠淋巴细胞增殖：OMT是一种免疫抑制剂17。4.2.2芦荟芦荟味苦，性寒。有清热通便之功效。芦荟现在用于食疗、美容、药用的颇多，其独特的功效成为现代研究的热门，现代外用药用于治疗湿癣病症。芦荟浸出液对皮肤真菌、铜绿假单胞菌有一定抑制作用。芦荟能促进免疫功能，提高腹腔巨噬细胞的增殖率及其吞噬功能，能增加小鼠胸腺和脾脏器官重量，提高大鼠IL-1、IL-6、TNF-的水平，提高免疫功能和促进组织再生，加速愈合。芦荟含有较多黏液素，其中多糖类物质含量高，它不仅具有免疫调节功能，还有助于细胞分裂，对皮肤的保养修复起重要作用18。4.2.3蛇床子蛇床子味辛、苦，性温，有小毒。有祛风燥湿、杀虫之功。有抗菌抗炎止痒的作用，其有效成分蛇床子素通过抗组胺和抑制肥大细胞脱颗粒而具有明显的抗瘙痒作用，且通过抗变态反应发挥抗炎作用，抑制小鼠被动皮肤过敏反应，能明显抑制小鼠迟发型超敏反应。蛇床子有效成分R2可显著提高磷酸组织胺对豚鼠的致氧阈，显著抑制由4-氨基吡啶所引起的小鼠皮肤瘙痒反应，抑制皮肤组织中的肥大细胞释放组胺，显著对抗二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，显著抑制小鼠同种被动皮肤过敏反应，显著抑制由DNCB所诱发的小鼠迟发型超敏反应19-20。5展望变应性接触性皮炎的发病机制正逐步在被完善阐释，在变态反应性皮炎的免疫学、遗传学、病理生理学上更加深度的研究，即将为该疾病的治疗带来更好的治疗方案。16目前发现以往常用的药物副作用大、刺激性大及易于反复发作的不足，而中药治疗变应性接触性皮炎有上千年历史，对皮炎湿疹的治疗独具优势，能通过多种途径，达到祛风利湿、清热润燥、抗过敏的功效，注重整体平衡，副作用小，刺激性较小，从而在根本上治愈变应性接触性皮炎。但由于中医药讲究配伍及单味中药就含有多种有效化学成分，对于其药理作用和治疗机制尚未完全明确。我们将从其发病机制的根源挖掘，运用中医医学基础，结合中药优势，寻找有利于疾病治疗且副作用小的治疗方案，并最终控制本病明确必要的思路方向。17参考文献1邢艳玲,张玉环,许建.IP-10对变应性接触性皮炎小鼠Th1/Th2型细胞因子表达的影响J.天津医科大学学报,2008,14(4):492-494.2OkazakiF，KanzakiH，FujiiK,etal.Initialreeruitmentofinterferongammapro-dueingCD8+effeetoreells,followedbyinfiltrationofCD4+cellsin2,4,6-trinitrochloro-benzene(TNCB)inducedmurinecontacthypersensitivityreactionsJ.JDernatol,2002,29:699.3WestphalGA,SchnuchA,MoessnerR,elal.CytokinegenepolymorphismsinallergiccontactdermartitisJ.ContactDermatitis,2003,48:85-93.4DearmanRJ,CumberbatchM,HiltonJ.etal.Areappraisaloftheskinsensitizi-ngactivityof2,4-dinitrothiocyanobenzeneJ.FoodChemToxicol,1997,35:261-269.5蒲江,孙小萌,杨帝顺,等.苦参碱对P物质诱导角质形成细胞和真皮成纤维细胞趋化蛋白-1表达的影响J.中国中西医结合皮肤性病学杂志,2010,9(4):201-2056WileR,PalmerK,CajewskaB,etal.ExpressionoftheTh1chemokineIFN-gamma-