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(最新)2016年CLSI药敏试验标准Carba NP试验更新2016-01-12CLSI微生物之家美国临床与实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）于2015年引入Carba NP试验，用于检测肠杆菌科、铜绿假单胞菌和不动菌属细菌中碳青霉烯酶的表型确证试验。该试验采用比色法，目前主要用于流行病学研究或感染控制。研究表明，Carba NP试验在检测KPC、NDM、VIM、IMP、SPM和SME型碳青霉烯酶方面具有较好的敏感性（90%）和特异性（90%）。2016年最新发布的CLSI文件中，对此试验做了部分更新，具体内容如下：1. Carba NP试验试剂配制说明（表3C）。表3C. Carba NP试验试剂的配制名称配制过程储存10 mM七水硫酸锌溶液1)称量1.4g ZnSO47H2O1年或不超过各成分保质期2)加入500ml实验室试剂级纯水3)混合，室温保存0.5%酚红溶液1)称量1.25g粉红粉末1年或不超过各成分保质期2)加入250ml实验室试剂级纯水3) 混合，室温保存4)使用前混匀0.1 N氢氧化钠溶液1)将20ml 1N NaOH加入180ml实验室试剂级纯水中1年或不超过各成分保质期2) 室温保存Carba NP试剂A溶液1)取25-50ml烧杯，将2ml 0.5%酚红溶液加入到16.6ml实验室试剂级纯水中2周或不超过各成分保质期（溶液应为红色或橙色，其他颜色均不可使用）2)加入180ml 10mM硫酸锌溶液3)以0.1N NaOH溶液（若pH值太高以10% HCl溶液）调整pH值为7.80.14)4-8小瓶保存，避免长时间光照Carba NP试剂B溶液（A液+6mg/ml亚胺培南）1)计算B液的需要量，需考虑每株待测菌100ml/管、质控菌株和未接种细菌的试剂质控。如检测两株待测菌，阳性和阴性对照、未接种细菌的试剂质控，共需500 ml B液。最多3天（4-8）2)称量约10-20mg亚胺培南粉末。注意：建议至少称量10mg粉末。将实际称重量除以6，以计算所需加入的A液量。如：亚胺培南18mg/6=3 mL溶液A，足够30管测试。2. 结果解释：管“a”：溶液A（作为内质控）管“b”：溶液B结果解释红色或红-橙色红色或红-橙色阴性，非碳青霉烯酶产生株红色或红-橙色浅橙色、深黄色或黄
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