浅谈病毒基因的检测.doc

浅谈【关键词】病毒基因检测 一乙型肝炎病毒dna(hbv-dna)测定 乙型肝炎是由乙肝病毒引起的以肝脏损害为主要临床特征的急、慢性传染病，严重者可发展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌。在我国，乙肝是危害人类健康的一种主要传染病。 【参考值】 阴性(taqman荧光定量pcr技术) 【临床意义】 1.hbv-dna是乙型肝炎病毒感染的直接证据，是hbv有活性复制能力及具传染性的确切标志。 2.可定量检测hbv-dna含量，为临床病情判断、疗效观察提供信息。 3.hbv-dna的出现先于其他血清学指标(如hbsag)，可早期诊断hbv感染。 4.正常人hbv-dna为阴性。当hbv-dna为101104拷贝/ml时，表明病毒复制水平低，传染性较弱；而当hbv-dna104拷贝/ml时，表明病毒复制水平高，传染性强。 5.hbv-dna含量测定可为临床药物选择提供依据。 【注意事项】 1.标本可用血清或血浆，避免肝素抗凝，避免反复冻融。 2.标本室温放置不超过4小时。 3.溶血、高胆红素标本影响检测结果。 二其他病毒dna测定 (一)人乳头瘤病毒dna(hpv-dna)检查 人乳头瘤病毒是一种小的双链dna病毒，根据核酸相关性分型已发现70余型。该病毒可以感染人的皮肤和黏摸上皮细胞，诱发细胞增生，产生乳头瘤样病变。 【参考值】 阴性(多重核酸荧光定量pcr技术) 【临床意义】 1.hpv难以用传统的病毒培养及血清学技术检测，目前主要采用分子生物技术检测hpv-dna，灵敏度高。 2.可对尿道、阴道、宫颈脱落细胞进行人乳头瘤病毒的检测及分型，判断体内hpv感染状况。 3.hpv6和11型与尖锐湿疣、喉头鳞状上皮乳头状瘤发生有关；hpv16、18、31、32型等与宫颈癌发生相关。因此，可用于对hpv高危亚型的诊断，对尖锐湿疣、宫颈癌等疾病的诊断与筛查具有重要意义。 4.hpv-dna检测可用于考核疗效与预后。 【注意事项】 1.用无菌拭子取尿道、阴道、宫颈分泌物于无菌试管或无菌瓶中。 2.标本采集应严格按无菌操作，避免污染。并及时送检。 (二)人类巨细胞病毒dna(hcmv-dna)检查 hcmv是疱疹病毒科成员，人类普遍易感，多为隐性或潜伏感染。在免疫功能低下、缺陷或抑制情况下，可发生成人hcmv感染，常呈弥漫性病变，严重者甚至死亡。 【参考值】 阴性(荧光探针杂交pcr技术) 【临床意义】 1.用于临床hcmv感染的快速诊断。 2.用于临床免疫抑制治疗过程中体内hcmv感染的快速诊断与疗效监测。获得性免疫缺陷综合征等患者hcmv感染的诊断与疗效监测。 3.pcr技术检测hcmv的敏感性高，且hcmv-dna的出现早于临床症状或血清学标记物的出现，可早期诊断hcmv感染。 4.妊娠早期感染hcmv可引起胎儿先天畸形，产前检测hcmv-dna有利于优生优育。 5.连续监测巨细胞病毒的含量变化可了解病毒的复制状况，从而为疾病的早期诊断与药物疗效提供直接的病原学依据。 【注意事项】 采用edta抗凝全血或脑脊液标本，采集后及时送检。 (三)单纯疱疹病毒dna(simplexherpesvirus，hsv-dna) 单纯疱疹病毒是一种有囊膜的双股dna病毒，分为i型和ii型。近年来，hsv是性传播疾病、病毒性脑炎等疾病的重要病原体。 【参考值】 阴性(荧光探针pcr技术) 【临床意义】 1.用于检测人血清样本或体液样本中的单纯疱疹病毒并可同时分型，辅助诊断hsv感染性疾病。 2.hsvi型感染主要引起口唇疱疹、疱疹性结膜炎、脑炎和皮肤性疱疹，hsvii型主要引起生殖器疱疹，hsv-dna检测可辅助诊断上述疾病，并可用于考核疗效与预后。 【注意事项】 1.血清用无菌注射针头抽取静脉血2ml于无菌肝功管中。 2.分泌物用无菌棉拭子采集标本，女性取宫颈或阴道分泌物，男性取精液或前列腺液，将取样后的棉拭子放入无菌试管或无菌瓶中。 3.脑脊液抽取脑脊液于无菌玻璃瓶中。 (四)eb病毒dna(ebvirus，ebv-dna) ebv属于丫疱疹病毒科，主要经涎液传播，pcr技术可灵敏地检测出标本中的ebv-dna，满足临床诊断、治疗需要。 【参考值】 阴性(荧光探针杂交pcr技术) 【临床意义】 1.可快速检测血液、脑脊液、组织、尿液中的eb病毒，为eb病毒感染提供直接证据。 2.eb病毒临床上与鼻咽癌传染性单核细胞增多症、霍奇金病等的发病密切相关。 【注意事项】 1.检测标本可采用edta抗凝全血、脑脊液、咽拭子、尿液、病变组织等。 2.标本采集时严格按无菌操作，并及时送检。 三rna病毒测定 丙型肝炎病毒rna(hcv-rna)检测 丙型肝炎病毒是一种单链正股rna病毒，引起丙型病毒性肝炎。丙型病毒性肝炎多因输血或血制品而引起，在输血者中还存在无症状的hcv携带者。 【参考值】 阴性(rt-pcr，荧光定量pcr技术) 【临床意义】 1.有助于hcv感染的早期诊断。 2.hcv-rna阳性提示hcv复制活跃，传染性强。 3.hcv-rna转阴提示hcv复制受抑，预后较好。 4.连续观察hcv-rna，结合抗-hcv的动态变化，可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。 【注意事项】 1.标本可用血清或血浆，用无菌注射针头抽取静脉血23ml于无菌肝功管或edta抗凝管中送检。避免肝素抗凝，避免反复冻融。 2.标本室温放置不超过