2341 农药残留量测定法

2341 农药残留量测定法 本方法系用气相色谱法（通则0521）和质谱法（通则 0431）测定药材、饮片及制剂中部分农药残留量。除另有规定外，按下列方法测定。 第一法 有机氯类农药残留量测定法-色谱法 1.9种有机氯类农药残留量测定法 色谱条件与系统适用性试验 以（14%-氰丙基-苯基）甲基聚硅氧烷或（5%苯基）甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.32mm0.25m） ，63Ni-ECD 电子捕获检测器。进样口温度230，检测器温度300，不分流进样。程序升温：初始100，每分钟10升至220，每分钟8升至250，保持10分钟。理论板数按-BHC峰计算应不低于1106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品贮备溶液的制备 精密称取六六六（BHC）（-BHC，-BHC，-BHC，-BHC）、滴滴涕（DDT） （p，p-DDE，p，p-DDD，o，p-DDT，p，p-DDT）及五氯硝基苯 （PCNB）农药对照品适量，用石油醚（6090）分别制成每1ml约含45g的溶液，即得。 混合对照品贮备溶液的制备 精密量取上述各对照品贮备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（6090）稀释至刻度，摇匀，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品贮备液，用石油醚（6090）制成每1L分别含0g、1g、5g、 10g、50g、100g、250g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 药材或饮片 取供试品，粉碎成粉末（过三号筛），取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，精密加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g，精密加二氯甲烷30ml，称定重量，超声15分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时。精密量取35ml，于40水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（6090）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（6090）溶解 并转移至10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（6090）精密稀释至5ml，小心加入硫酸1ml，振摇1分钟，离心（3000 转/分钟）10分钟，精密量取上清液2ml，置具刻度的浓缩瓶 （见图）中，连接旋转蒸发器，40下（或用氮气）将溶液浓缩至适量，精密稀释至1ml，即得。 制剂 取供试品，研成细粉（蜜丸切碎，液体直接量取），精密称取适量（相当于药材2g），以下按上述供试品溶液制备法制备，即得供试品溶液。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。 2.22种有机氯类农药残留量测定法 色谱条件及系统适用性试验 分析柱：以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.25mm0.25m），验证柱：以100%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.25mm0.25m），63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度240，检测器温度300，不分流进样，流速为恒压模式（初始流速为1.3ml/min）。程序升温：初始70，保持1分钟，每分钟10升至180，保持5分钟，再以每分钟5升至220，最后以每分钟100升至280，保持8分钟。理论板数按-BHC计算应不低于1106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品贮备溶液的制备 精密称取表1中农药对照品适量，用异辛烷分别制成如表1中浓度，即得。 混合对照品贮备溶液的制备 精密量取上述对照品贮备溶液各1ml，置100ml量瓶中，用异辛烷稀释至刻度，摇匀，即得。 混合对照品溶液的制备 分别精密量取上述混合对照品贮备溶液，用异辛烷制成每1L分别含10g、20g、50g、100g、200g、500g的溶液，即得（其中-六六六、异狄氏剂、p，p-滴滴滴、o，p-滴滴涕每1L分别含20g、40g、100g、200g、400g、1000g）。 供试品溶液的制备 取供试品，粉碎成粉末（过三号筛），取约1.5g，精密称定，置于50ml聚苯乙烯具塞离心管中，加入水10ml，混匀，放置2小时，精密加入乙腈15ml，剧烈振摇提取1分钟，再加入预先称好的无水硫酸镁4g与氯化钠1g的混合粉末，再次剧烈振摇1分钟后，离心（4000转/分钟）1分钟。精密吸取上清液10ml，40减压浓缩至近干，用环己烷-乙酸乙酯（1：1）混合溶液分次转移至10ml量瓶中，加环己烷-乙酸乙酯（1：1）混合溶液至刻度，摇匀，转移至预先加入1g无水硫酸钠的离心管中，振摇，放置1小时，离心（必要时滤过），取上清液5ml过凝胶渗透色谱柱（400mm25mm，内装BIO-Beads S-X3填料；以环己烷-乙酸乙酯（1：1）混合溶液为流动相；流速为每分钟5.0ml）净化，收集1830分钟的洗脱液，于40水浴减压浓缩至近干，加少量正己烷替换两次，加正己烷1ml使溶解，转移至弗罗里硅土固相萃取小柱1000mg/6ml，用正己烷-丙酮（95：5）混合溶液10ml和正己烷10ml预洗上，残渣用正己烷洗涤3次，每次1ml，洗液转移至同一弗罗里硅土固相萃取小柱上，再用正己烷-丙酮（95：5）混合溶液10ml洗脱，收集全部洗脱液，置氮吹仪上吹至近干，加异辛烷定容至1ml，涡旋使溶解，即得。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1l，注入气相色谱仪，按外标标准曲线法计算供试品中22种有机氯农药残留量。 限度 除另有规定外，每1kg中药材或饮片中含总六六六（-BHC，-BHC，-BHC，-BHC之和）不得过0.2mg；总滴滴涕（p，p-DDE，p，p-DDD，o，p-DDT，p，p-DDT之和）不得过0.2mg；五氯硝基苯（Quintozene）不得过0.1mg；六氯苯（Hexachlorobenzene）不得过 0.1mg；七氯（Heptachlor）、顺式环氧七氯（Heptachlor-exo-epoxide）和反式环氧七氯（Heptachlor-endo-epoxide）之和不得过0.05mg；艾氏剂（Aldrin）和狄氏剂（Dieldrin）之和不得过0.05mg；异狄氏剂（Endrin）不得过0.05mg；顺式氯丹（cis-Chlordane）、反式氯丹（trans-Chlordane）和氧化氯丹（oxy-Chlordane）之和不得过0.05mg； -硫丹（-Endosulfan）、-硫丹（-Endosulfan）和硫丹硫酸盐（Endosulfan sulfate）之和不得过3mg。 【附注】 （1）当供试品中有农药检出时，可在验证柱中确认检出的结果，再进行定量。必要时，可用气相色谱-质谱法进行确证。（2）加样回收率应在70%120%之间。 第二法 有机磷类农药残留量测定法-色谱法 色谱条件与系统适用性试验 以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷或（5%苯基）甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.25mm0.25m），氮磷检测器（NPD）或火焰光度检测器（FPD）。进样口温度220，检测器温度300，不分流进样。程序升温：初始120，每分钟10升至200，每分钟5升至240，保持2分钟，每分钟20升至270，保持0.5分钟。理论板数按敌敢畏峰计算应不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品贮备溶液的制备 精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪磷、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100g的溶液，即得。 混合对照品贮备溶液的制备 分别精密量取上述各对照品贮备溶液1ml，置20ml棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品贮备溶液，用乙酸乙酯制成每1ml含0.1g、0.5g、1g、2g、 5g的浓度系列，即得。 供试品溶液的制备 药材或饮片 取供试品，粉碎成粉末（过三号筛），取约5g，精密称定，加无水硫酸钠5g，加入乙酸乙酯50100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过，药渣加入乙酸乙酯3050ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液于40以下减压浓缩至近干，用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度；精密吸取上述溶液1ml，置石墨化炭小柱（250mg/3ml用乙酸乙酯5ml预洗）上，用正己烷-乙酸乙酯（1：1）混合溶液5ml洗脱，收集洗脱液，置氮吹仪上浓缩至近干，加乙酸乙酯定容至1ml，涡旋使溶解，即得。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。 第三法 拟除虫菊酯类农药残留量测定法-色谱法 色谱条件与系统适用性试验 以（5%苯基）甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.32mm0.25m），63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度270， 检测器温度330。不分流进样（或根据仪器设置最佳的分流比）。程序升温：初始160，保持1分钟，每分钟10升至278，保持0.5分钟，每分钟1升至290，保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于105，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品贮备溶液的制备 精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量，用石油醚（6090）分别制成每1ml约含2025g的溶液，即得。 混合对照品贮备溶液的制备 精密量取上述各对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用石油醚（6090）稀释至刻度，摇匀，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品贮备液，用石油醚（6090）制成每1L分别含0g、2g、8g、40g、200g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 药材或饮片 取供试品，粉碎成粉末（过三号筛），取约12g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚（6090）-丙酮（4：1）混合溶液30ml，超声处理15分钟，滤过，药渣再重复上述操作2次后，合并滤液，滤液用适量无水硫酸钠脱水后，于4045减压浓缩至近干，用少量石油醚（6090）反复操作至丙酮除净，残渣用适量石油醚（6090）溶解，置混合小柱从上至下依次为无水硫酸钠2g、弗罗里硅土4g、微晶纤维素1g、氧化铝1g、无水硫酸钠2g，用石油 醚（6090）-乙醚（4：1）混合溶液20ml预洗上，用石油醚（6090）-乙醚（4：1）混合溶液90ml洗脱，收集洗脱液，于4045减压浓缩至近干，再用石油醚 （6090）34ml重复操作至乙醚除净，用石油醚（6090）溶解并转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀， 即得。测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯农药残留量。第四法 农药多残留量测定法-质谱法 1.气相色谱-串联质谱法 色谱条件 以5%苯基甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m0.25mm0.25m色谱柱）。进样口温度240 ，不分流进样。载气为高纯氦气（He）