子痫前期患者胎盘组织中MMP-2及TIMP-2的表达.doc

子痫前期患者胎盘组织中MMP-2及TIMP-2的表达【摘要】目的检测子痫前期（preeclampsia，PE）患者胎盘组织中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases-2，MMP-2）及其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）的表达，探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法用免疫组化法对20例正常晚妊妇女和20例子痫前期晚妊妇女 (其中子痫前期轻度10例、重度10例)胎盘中MMP-2及TIMP-2进行检测。结果PE患者胎盘中MMP-2的表达明显低于正常妊娠组(P0.05）;而TIMP-2的阳性表达无显著性差异(P0.05)；MMP2/TIMP2明显下降。结论胎盘组织中MMP-2的低表达及与TIMP-2的比例失衡与妊娠期高血压疾病的发病密切相关。 【关键词】 子痫前期胎盘MMP-2TIMP-2Expression of MMP-2 and TIMP-2 in the placenta of patients with preeclampsia pregnanciesYANG Ya-bin, et al.(The Fifth Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Daqing, Heilongjiang 163316 China) 【Abstract】 Objective To detect MMP-2 and TIMP-2 in the placenta in order to evaluate the relation of MMP-2 and TIMP-2 with hypertensive disorder complicating pregnancy. Methods MMP-2 and TIMP-2 expression in twenty nomal and twenty preeclamptic pregnant women placenta （10 cases of mild and 10 cases of severe preeclampsia）was detected by immunohistochemistry. Results The MMP-2 expression levels in PE group were all significantly lower than those of normal pregnancy group(P0.05). While that of TIMP-2 had not significant difference(P0.05). positive expression of MMP-2/TIMP-2 obviously decline. Conclusions The decreased expression of MMP-2 in the placenta and the unbalanced proportion of MMP-2 and TIMP-2 are nearly connected with hypertensive disorder complicating pregnancy. 【Key words】 PE Placenta MMP-2 TIMP-2 妊娠期高血压疾病的病因目前尚不明确，许多学者在细胞滋养层细胞的入侵机制方面进行了大量研究，阐明其发病机制主要与滋养细胞功能异常有关1。细胞滋养层细胞有穿过基底膜（BM）的能力以及降解 ECM 的酶，MMPs 是降解 BM和 ECM 的蛋白水解酶中较重要的一类。大量研究证实， MMP-2及TIMP-2 在细胞滋养层细胞的侵入中发挥重要的作用，是滋养层细胞侵入的非常重要的介导因素。本研究通过免疫组化法检测PE胎盘组织中MMP-2及TIMP-2表达的特点，探讨二者在妊娠期高血压疾病发病机制中的作用。1 资料与方法11 研究对象 选择2006年412月在我院住院分娩的子痫前期患者20例，其中子痫前期轻度10例，重度10例。平均年龄（29.31.9）岁，平均孕周为（37.61.6）周。妊娠期高血压疾病的诊断及分类标准参照乐杰主编妇产科学第六版2。随机选取同期住院分娩的健康足月孕妇20例为对照组，平均年龄（28.81.7）岁，平均孕周为（38.21.4）周。各组均无其他产科并发症及妊娠合并症。两组孕妇年龄及孕周比较，差异无统计学意义（P0.05）。1.2 方法 胎盘娩出后，立即取胎盘母体面中央绒毛组织约1.0cm×1.0cm×1.0cm大小、无钙化、无机化的胎盘组织。用生理盐水冲掉血液，然后置于10的甲醛中固定612h,常规脱水，石蜡包埋，4保存。1.3 试剂 MMP-2、TIMP-2免疫组化试剂盒、DAB染色试剂盒由北京中山生物技术有限公司提供。阳性结果判断标准：标本组织细胞中有(棕)黄色颗粒沉着。1.4 统计学分析 分别将各组病例的MMP-2、TIMP-2的阳性率用χ2和P检验。2 结果21 MMP-2在胎盘组织中的表达强度比较 PE组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有显著性意义（χ2=9.33，P0.05）。子痫前期轻度组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有显著性意义（χ2=9.17，P0.05）；子痫前期重度组与正常妊娠组相比MMP-2表达强度差异有非常显著性意义（χ2=18.10，P0.01），见表1。随着妊娠期高血压疾病病情的加重，MMP-2的阳性表达率呈逐渐降低趋势。22 TIMP-2在胎盘组织中的表达 在正常妊娠及PE胎盘组织的滋养细胞及蜕膜细胞均可见TIMP-2的阳性表达。PE组与对照组比较，TIMP-2的表达略有下降，但不明显，故无统计学意义（P0.05），见表2。23 正常妊娠组（对照组）和PE组中 MMP-2/TIMP-2 阳性表达比特点：PE组MMP-2/TIMP-2阳性表达比低于正常妊娠组,而且随着病情的加重,二者阳性表达比逐渐变小，见表3。表1 两组孕妇MMP-2在胎盘组织中的表达（略）表2 两组孕妇TIMP-2在胎盘组织中的表达（略）表3 对照组和PE组中MMP-2/TIMP-2的阳性表达比（略）3 讨论 妊娠期高血压疾病是引起母儿死亡的主要原因之一，其病因至今不明。近年来许多研究表明，滋养细胞功能异常在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用。胎盘-滋养细胞缺血学说是当今研究的一个热点，即在妊娠期高血压疾病发生子宫螺旋小动脉生理重铸过程障碍，此病理现象也称为胎盘浅着床，导致胎盘灌注不足，即胎盘缺陷。研究发现其与胚胎着床过程中滋养细胞浸润能力受累有关。多数研究表明，MMPs造成的妊娠早期滋养细胞的不完全侵入在妊娠期高血压疾病的发病中起重要作用。 MMPs是一族具有降解细胞外基质（ECM）成分特性的锌、钙依赖性的内肽酶，在人体内分布很广，参与血管形成等组织重建和许多病理过程如肿瘤浸润、炎症反应等。MMPs对ECM的降解是滋养细胞侵袭的限速步骤，其分泌的多少将影响滋养细胞对子宫肌层的浸润程度和血管重铸。TIMPs是MMPs的天然抑制因子，是一组能抑制MMPs活性的多功能因子家族，是体内细胞分泌的一类蛋白酶抑制剂，多随MMPs的表达而表达，也可在细胞因子等的诱导下表达。胎盘植入过程受到MMPs和TIMPs的严格时空限制，从而控制着滋养细胞浸润的深度。MMP-2，又称明胶酶A(gelatinase A)，是人体内分布最广泛的MMP。MMP-2能够特异性地降解基底膜的主要成分IV型胶原，而基底膜是滋养细胞侵入的第一道细胞屏障。TIMP-2是MMP-2的选择性抑制剂，TIMP-2随MMP-2的表达而表达。本研究结果显示，子痫前期患者胎盘滋养细胞MMP-2表达与正常妊娠胎盘相比显著下降（P0.05），TIMP-2的表达与正常妊娠胎盘相比差别无显著性，PE时MMP-2/TIMP-2的比例（0.85）低于正常妊娠(1.12)。这也就体现了妊娠期高血压疾病患者滋养细胞浸润能力的下降，提示我们妊娠期高血压疾病患者可能是由于滋养细胞合成和分泌MMP-2降低，MMP-2/TIMP-2的比例降低、动态平衡被打破，使得滋养细胞的浸润性受到了限制，从而导致了绒毛的发育不良和螺旋小动脉的血管重铸