20(R)—人参皂苷Rh2抗癌细胞转移实验研究.doc

20(R)人参皂苷Rh2抗癌细胞转移实验研究 (中国医学科学院药物研究所北京100500)韩锐：中国社会科学院著名药理学家出处：人参研究 RENSHEN YANJIU 2002,VOL.14 NO.4摘要本文报道有关20(R)人参皂苷Rh2(简称“Rh2”)对抗B16BL6小鼠黑色素瘤细胞自发性转移的作用。以Taxol作为阳性对照药,以二种方式给药,一种是模型建立后给药,一种为模型建立前给药,结果表明后种给药方式的抗转移作用明显优于前者。另外,根据本项实验结果以及相关的报道来探讨人参皂苷化合物的抗转移作用的构效关系,认为,分子量小,极性小,易吸收的人参皂苷次生苷或苷元,可能是对抗癌细胞转移的有效成分。关键词20(R)人参皂苷Rh2抗癌细胞转移构效关系有效成分笔者曾报道了“Rh2”在体外的诱导再分化作用1,抗癌细胞侵袭作用2,体内的对抗移植性肿瘤3和诱发性肿瘤的作用4,本文继续报道“Rh2”的抗癌细胞转移的实验研究。1材料和方法1.1样品 阳性对照药:选择经多次重复实验证实对抗癌转移模型效果显著、临床公认的新型抗癌药Taxol,由北京协和制药一厂出品。 细胞株:B16BL6小鼠黑色素瘤细胞高转移株:由中国医科院药物所药理室传代培养。 实验动物:C57BL/6小鼠,由中国医学科学院实验动物中心提供。1.2方法 体内自发性肺转移实验,“Rh2”灌胃给药,每周5次,连续于实验全过程5周;Taxol为阳性对照组,以5mg/KG/日与“Rh2”同期腹腔注射给药;另一完全不给药组为阴性对照组。实验共进行二批,其中一批治疗给药方式,在建立模型后第2天开始给药,另一批为预防给药,即在模型建立前提前给药2周,给药时间共7周。其余与治疗给药方式完全相同。 实验过程为:将生长状态良好的B16BL6细胞用0.025%EDTA消化,PBS洗一遍,用无菌生理盐水配制成1107个/ml细胞悬液。每只小鼠后肢爪垫皮下接种50ul(含5105个瘤细胞)。接种瘤液后3周,当瘤体 10mm3时,将小鼠用乙醚麻醉,无菌条件下切除患肢。2周后处死动物,解剖取肺,称重,计算肺系数。Bouins液固定,于解剖显微镜下计数肺转移结节数。采用MannWhitheyU检验进行统计学处理。2实验结果 “Rh2”用二种给药方法完成的二批实验,结果见表1、表2。“Rh2”对小鼠B16BL6细胞自发性肺转移的抑制作用。表1“Rh2”对小鼠B16BL6细胞自发性肺转移的抑制作用组别 剂量 给药次数 转移鼠/荷瘤鼠 肺系数 肺转移结节数 抑制率 mg/Kg (-SD)对照 2/12 18.39.34 44.353.87Taxol 5 25 5/5 13.11.07 5.24.50* 88“Rh2”13 25 15/15 13.45.87 18.020.29 59 26 25 13/13 12.62.69* 16.816.44 62 52 25 9/10 11.72.64* 12.717.44 71*P0.05表2“Rh2”预防给药对小鼠B16BL6细胞自发性肺转移的抑制作用组别 剂量 给药次数 转移鼠/荷瘤鼠 肺系数 肺转移结节数 抑制率 mg/Kg (-SD)对照 10/10 13.92.62 27.224.11Taxo 5 35 6/6 9.41.18* 3.82.64* 86“Rh2”8.3 35 13/13 10.62.17* 15.210.08 44 16.6 35 14/15 11.81.73* 9.78.95* 64*P0.053讨论 实验结果表明,“Rh2”在实验所选定的剂量下对B16BL6细胞自发性肺转移具有显著的抑制作用,其中“Rh2”在26mgKg、52mg/Kg的剂量下的肺系数与对照组比较有显著性差异,“Rh2”在8.3mg/Kg,16.6mg/Kg剂量下预先给药,肺转移抑制率为44%,64%,其中,16.6mg/Kg剂量下肺转移结节数与对照比较,具有明显的差异。 有关于人参皂苷类成分抗癌细胞转移的研究已有报道,OtaT5等报道了人参皂苷Rg3有效抑制小鼠高转移性黑瘤B10Fe7细胞在肺部增殖,Wakatayashi6指明人参提取物(1mg/小鼠)和人参皂苷(0.5mg/小鼠)的对抗B16BL6 melanoma细胞肺转移,徐景达教授早在1996年就曾撰文指出,人参皂苷的抗肿癌作用其配基原人参二醇的作用更强。人参二醇组皂苷体内代谢的研究也认为人参二醇组皂苷的次级苷或苷元是抗癌的有效成分,相信经过不断深入的探索完全可以利用人参皂苷的代谢物,作为新的药源进行开发。参考文献1陶丽华,等.人参研究,1995,4:39.2陶丽华,等.人参研究,1999.4(11):19.3陶丽华,等.人参研究,1995,4:45.4OtaT等.生命科学,1997,60(2):3944.5WaKatayashi,iftsaegawa H.Murata J.saidi I. In vivq antimetastatie aetion of ginsengprvtopanaxadiol saponins is tased