膀平滑肌细胞 原代培养 猪 膀胱移行上皮细胞 细胞培养 膀胱平滑肌细胞 移行上皮细胞 SIS.doc

膀平滑肌细胞论文：猪膀胱平滑肌细胞和移行上皮细胞的体外培养及支架复合物的构建【中文摘要】第一部分：猪膀胱平滑肌细胞的原代培养及鉴定通过探索猪膀胱平滑肌细胞的取材、体外分离、原代培养、扩增、及鉴定的方法,为其作为种子细胞构建组织工程膀胱提供实验依据。采用滇南小耳猪,无菌条件下外科手术切取膀胱组织,仔细机械分离膀胱平滑肌层,采用胰蛋白酶和胶原酶联合消化获取膀胱平滑肌细胞,并以含10%FBS的DMEM/F12培养基进行培养,观察细胞形态变化,生长及增殖过程,用MTT法绘制细胞生长曲线,并通过H-E染色、免疫组织化学染色、透射电镜鉴定细胞。体外培养的细胞可融合成片,倒置相差显微镜下观察细胞为长梭形,并表现出典型的“谷和峰”形态,生长曲线测定提示细胞生长状况良好、具有较强增殖能力。通过苏木素伊红染色符合平滑肌细胞形态特征,平滑肌肌动蛋白染色呈阳性,透射电镜观察符合肌细胞特征。运用该方法能够简单易行地在体外培养出大量高纯度的猪膀胱平滑肌细胞并建立了稳定的培养体系；所培养出来的膀胱平滑肌细胞纯度高、活力好可作为构建组织工程膀胱的种子细胞。第二部分：猪膀胱移行上皮细胞的原代培养及鉴定通过探索猪膀胱移行上皮细胞的体外分离、.【英文摘要】Part I Primary cultivation and identification of smooth muscle cells in the bladder of diannan pigs:To investigate the methods of extracting materials, isolation in vitro, primary cultivation, amplification and identification, and provide experimental evidence for the role of seed cells in tissue engineering.Methods:We performed the surgical operation to take bladder tissues of diannan pigs with small ears under the sterile condition. After the process of mechanical disintegration, we harve.【关键词】膀平滑肌细胞 原代培养 猪 膀胱移行上皮细胞 细胞培养 膀胱平滑肌细胞 移行上皮细胞 SIS【英文关键词】Bladder smooth muscle cells culture in vitro pig Bladder transitional epithelial cell Bladder smooth muscle cell transitional epithelial cell SIS【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848【目录】猪膀胱平滑肌细胞和移行上皮细胞的体外培养及支架复合物的构建中文摘要5-7Abstract7-9中英文缩略词表10-11第一章 猪膀肤平滑肌细胞的体外培养和鉴定11-26引言111 材料和主要试剂11-132. 实验方法13-183 结果18-224 讨论22-235 结论23-246 参考文献24-26第二章 猪膀肤移行上皮细胞的原代培养及鉴定26-41引言261 材料和主要试剂26-282 实验方法28-333 结果33-364 讨论36-385 结论38-396 参考文献39-41第三章 猪膀肤平滑肌细胞和移行上皮细胞与小肠粘膜下 层无细胞基质复合物的构建41-53引言411 材料和仪器41-422 实验方法42-44