细菌对药物的敏感试验.doc

近年来，由于抗生素、磺胺等抗菌药物广泛应用，导致了耐药菌株不断出现。测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，避免滥用药、及时有效地控制感染以及细菌鉴定，具有重要意义。细菌敏感度的测定方法很多，世界卫生组织推荐的方法为Kirby-Bauer纸片法，该方法具有操作简便、易于掌握、且重视性好的优点，本法是将含药纸片贴敷在接种细菌的琼脂平板上，利用含药纸片在琼脂上的扩散作用来测定细菌对药物的敏感性。K-B纸片法的原理是建立在抗菌药物抑菌环直径大小与细菌的最小抑菌浓度（MIC）之间呈负相关的基础上，即抑菌环直径越大，则MIC越小。结果判定：按抑菌环直径大小报告敏感、中度敏感或耐药。敏感：是指被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的某种抗菌药物治疗。中度敏感：是指通过提高种抗菌药物的剂量或在该药浓集的部位，细菌生长可被抑制，感染可被治愈。这类药物毒性较小，剂量可以加大。-内酰胺类药物可出现中度敏感。耐药：是指被测菌株所引起的感染不能用常规剂量的抗菌药物所治愈。中介度：这一范围是“缓冲域”是由试验的误差造成的不作为报告形式。如确需明确的敏感度，应重复实验或做稀释法，抑菌环为中介度的药物不可提高剂量。最低抑菌浓度（MID）：抗菌药物能够抑制细菌生长所需要的最低浓度。以针形接种器沾取菌液加至药盒各孔，35培养过夜，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MIC。最低杀菌浓度（MBC）：抗菌药物杀灭细菌所需要的最低浓度。经48小时35培养后，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MBC。由于纸片法影响因素多，很难控制精度，现大多数医院采用MIC测定盒。MIC由经典二倍肉汤稀释演化而来，具有终点判断精确，重复性好，操作简便等优点。此方法采用病美国DYNATECH接种器，更具科学性。使用国产“华士达微生物自动分析仪”所做的定量药敏（MIC）试验，报告自动由打印机印出，附印出抗菌素对受试菌的MIC外，还可提供各种药物的用量，给药途径（口服、肌注、静滴）及血和尿中可能达到的药物浓度一览表，供临床医师参考。纸片法抑菌环直径及其相当的MIC（表16-4）。表16-4 抑菌环直径标准及其相当的MIC（不包括嗜血杆菌和淋球菌） 1990.4.NCCLS抗菌药物纸片含药量抑菌环直径（mm）相当的MIC耐药中介度中度敏感敏感耐药敏感丁胺卡那霉素30g1415-16-173216羟氨苄青霉素/棒酸葡萄球菌20/10g19-208/44/2其他细菌20/10g13-14-1716/816/88/4氨苄青霉素革兰性阴性肠道菌10g13-14-1617328葡萄球菌10g28-29-lactamase0.25肠球菌10g16-17-16-非肠链球菌10g21-22-193040.12单核增多李斯特菌10g19-2042氨苄青霉素/青霉烷砜 革兰氏阴性肠道菌和葡萄球菌10/10g13-14-161732/168/4苯咪唑青霉素对假单胞菌75%17-1812864噻肟单酰胺菌素30g15-16-2122328羧苄青霉素假单胞菌100g13-14-1617512128其他革兰氏阴性菌100g19-20-22233216氯头孢菌素30g14-15-1718328头孢羟唑30g14-15-1718328头孢唑啉30g14-15-1718328头孢克肟5g15-16-181941头孢羟苄磺唑30g14-15-1718328头孢呱酮75g15-16-20216416头孢氨噻肟30g14-15-2223648头孢双硫唑甲氰30g12-13-15166416头孢甲氧噻吩30g14-15-1718328头孢噻甲羧肟30g14-15-1718328头孢去甲噻肟30g14-15-1920328头孢三嗪噻肟30g13-14-2021648头孢呋肟30g14-15-2223324头孢氨呋肟钠30g14-15-1718328头孢噻吩30g14-15-1718328氯霉素30g1213-17-1848环丙氟呱酸5g15-16-202141氯林可霉素2g1415-20-2140.5强力霉素30g1213-15-16164氟啶酸10g14-15-171882红霉素15g1314-22-2380.5庆大霉素10g1213-14-1584亚胺硫霉素10g13-14-1516164卡那霉素30g1314-17-18256甲氧苯青霉素对葡萄球菌5g910-13-14168硫苯咪唑青霉素假单胞菌75g17-1812864其他革兰氏阴性菌75g17-18-202112816二甲胺四环素30g1415-18-19164羟羧氧酰胺菌素30g14-15-2223648乙氧萘青霉素对葡萄球菌1g1011-12-13-1乙基西梭霉素30g1213-14-153212氟嗪酸5g12-13-151682苯唑青霉素葡萄球菌1g1011-12-1342肺炎球菌（由此可知对青霉素G的敏感性）1g19-20-0.06青霉素G葡萄球菌10units2811-12-29-lactmase0.1肠球菌10units14-15-16-单核增多李斯特菌10units19-2042非肠链球菌10units19-20-272840.12氧呱嗪青霉素假单胞菌100g17-1812864其它革兰氏阴性菌100g17-18-202112816利福平5g1617-19-2041链霉素10g1112-14-15-四环素30g1415-18-19164羧噻吩青霉素假单胞菌75g14-1512864其他革兰氏阴性菌75g14-15-192012816羟噻吩青霉素/棒酸假单胞单胞菌75/10g14-15128/264/2其他革兰氏阴性菌75/10g14-15-1920128/216/2托巴霉素10g1213-14-1584TMP/SMZ1.25/23.75g10-11-15168/1522/38万古霉素30g910-11-12324尿路感染专用抗菌药物噁噌酸100g1415-18-196416萘啶酸30g1314-18-19328呋喃妥因300g1415-16-1712832氟呱酸10g1213-16-17164磺胺类250or300g12-13-1617350100TMP5g10-11-1516164中介度：含意为模棱两可或不定。表16-5 嗜血杆菌抑菌环解释标准及相应MIC分界点抗菌药物纸片含药量抑菌环直径（mm）相应MIC（g/ml)a耐药中介度b敏感耐药敏感羟氨苄青霉素/棒酸20/10g19-208.0/4.04.0/2氨苄青霉素10g2122-24254.01.0氨苄青霉素/青霉烷砜10/10g19-204.0/22.0/1噻肟单酰胺菌素30g262.0氯头孢菌素30g1819-2324328.0头孢羟唑30g2021-2324164.0头孢克肟5g-30-1.0头孢羟苄磺唑30g2021-2324164.0头孢氨噻肟30g-262.0头孢噻甲羧肟30g-262.0头孢三嗪噻肟30g-262.0头孢去甲噻肟30g-262.0头孢呋肟30g2021-2324164.0氯霉素30g2526-28298.02.0环丙氟呱酸5g-211.0亚胺硫霉素10g-164.0氟嗪酸5g-16-利福平5g1617-19204.01.0四环素30g2526-28298.02.0TMP/SMZ1.25/23.75g1011-15164.0/760.5/9.5a.此值为与抑菌环相应的MIC近似值。b.“中介度”如予报告，其含意为模棱两可，不定或接近轻敏，如药物能在感染部位浓集可用于治疗。表16-6 淋球菌抑菌环解释标准及相应的MIC 1990.4.NCCLS抗菌药物纸片含药量抑菌环直径（mm）相应的MIC（g/ml）耐药中介度中度敏感敏感耐药敏感头孢三嗪噻肟30g-35-0.25青霉素10U26-27-464720.06放线壮观霉素100g1415-17-1812832四环素30g30-31-373820.25 近年来，由于抗生素、磺胺等抗菌药物广泛应用，导致了耐药菌株不断出现。测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，避免滥用药、及时有效地控制感染以及细菌鉴定，具有重要意义。细菌敏感度的测定方法很多，世界卫生组织推荐的方法为Kirby-Bauer纸片法，该方法具有操作简便、易于掌握、且重视性好的优点，本法是将含药纸片贴敷在接种细菌的琼脂平板上，利用含药纸片在琼脂上的扩散作用来测定细菌对药物的敏感性。K-B纸片法的原理是建立在抗菌药物抑菌环直径大小与细菌的最小抑菌浓度（MIC）之间呈负相关的基础上，即抑菌环直径越大，则MIC越小。结果判定：按抑菌环直径大小报告敏感、中度敏感或耐药。敏感：是指被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的某种抗菌药物治疗。中度敏感：是指通过提高种抗菌药物的剂量或在该药浓集的部位，细菌生长可被抑制，感染可被治愈。这类药物毒性较小，剂量可以加大。-内酰胺类药物可出现中度敏感。耐药：是指被测菌株所引起的感染不能用常规剂量的抗菌药物所治愈。中介度：这一范围是“缓冲域”是由试验的误差造成的不作为报告形式。如确需明确的敏感度，应重复实验或做稀释法，抑菌环为中介度的药物不可提高剂量。最低抑菌浓度（MID）：抗菌药物能够抑制细菌生长所需要的最低浓度。以针形接种器沾取菌液加至药盒各孔，35培养过夜，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MIC。最低杀菌浓度（MBC）：抗菌药物杀灭细菌所需要的最低浓度。经48小时35培养后，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MBC。由于纸片法影响因素多，很难控制精度，现大多数医院采用MIC测定盒。MIC由经典二倍肉汤稀释演化而来，具有终点判断精确，重复性好，操作简便等优点。此方法采用病美国DYNATECH接种器，更具科学性。使用国产“华士达微生物自动分析仪”所做的定量药敏（MIC）试验，报告自动由打印机印出，附印出抗菌素对受试菌的MIC外，还可提供各种药物的用量，给药途径（口服、肌注、静滴）及血和尿中可能达到的药物浓度一览表，供临床医师参考。纸片法抑菌环直径及其相当的MIC（表16-4）。表16-4 抑菌环直径标准及其相当的MIC（不包括嗜血杆菌和淋球菌） 1990.4.NCCLS抗菌药物纸片含药量抑菌环直径（mm）相当的MIC耐药中介度中度敏感敏感耐药敏感丁胺卡那霉素30g1415-16-173216羟氨苄青霉素/棒酸葡萄球菌20/10g19-208/44/2其他细菌20/10g13-14-1716/816/88/4氨苄青霉素革兰性阴性肠道菌10g13-14-1617328葡萄球菌10g28-29-lactamase0.25肠球菌10g16-17-16-非肠链球菌10g21-22-193040.12单核增多李斯特菌10g19-2042氨苄青霉素/青霉烷砜 革兰氏阴性肠道菌和葡萄球菌10/10g13-14-161732/168/4苯咪唑青霉素对假单胞菌75%17-1812864噻肟单酰胺菌素30g15-16-2122328羧苄青霉素假单胞菌100g13-14-1617512128其他革兰氏阴性菌100g19-20-22233216氯头孢菌素30g14-15-1718328头孢羟唑30g14-15-1718328头孢唑啉30g14-15-1718328头孢克肟5g15-16-181941头孢羟苄磺唑30g14-15-1718328头孢呱酮75g15-16-20216416头孢氨噻肟30g14-15-2223648头孢双硫唑甲氰30g12-13-15166416头孢甲氧噻吩30g14-15-1718328头孢噻甲羧肟30g14-15-1718328头孢去甲噻肟30g14-15-1920328头孢三嗪噻肟30g13-14-2021648头孢呋肟30g14-15-2223324头孢氨呋肟钠30g14-15-1718328头孢噻吩30g14-15-1718328氯霉素30g1213-17-1848环丙氟呱酸5g15-16-202141氯林可霉素2g1415-20-2140.5强力霉素30g1213-15-16164氟啶酸10g14-15-171882红霉素15g1314-22-2380.5庆大霉素10g1213-14-1584亚胺硫霉素10g13-14-1516164卡那霉素30g1314-17-18256甲氧苯青霉素对葡萄球菌5g910-13-14168硫苯咪唑青霉素假单胞菌75g17-1812864其他革兰氏阴性菌75g17-18-202112816二甲胺四环素30g1415-18-19164羟羧氧酰胺菌素30g14-15-2223648乙氧萘青霉素对葡萄球菌1g1011-12-13-1乙基西梭霉素30g1213-14-153212氟嗪酸5g12-13-151682苯唑青霉素葡萄球菌1g1011-12-1342肺炎球菌（由此可知对青霉素G的敏感性）1g19-20-0.06青霉素G葡萄球菌10units2811-12-29-lactmase0.1肠球菌10units14-15-16-单核增多李斯特菌10units19-2042非肠链球菌10units19-20-272840.12氧呱嗪青霉素假单胞菌100g17-1812864其它革兰氏阴性菌100g17-18-202112816利福平5g1617-19-2041链霉素10g1112-14-15-四环素30g1415-18-19164羧噻吩青霉素假单胞菌75g14-1512864其他革兰氏阴性菌75g14-15-192012816羟噻吩青霉素/棒酸假单胞单胞菌75/10g14-15128/264/2其他革兰氏阴性菌75/10g14-15-1920128/216/2托巴霉素10g1213-14-1584TMP/SMZ1.25/23.75g10-11-15168/1522/38万古霉素30g910-11-12324尿路感染专用抗菌药物噁噌酸100g1415-18-196416萘啶酸30g1314-18-19328呋喃妥因300g1415-16-1712832氟呱酸10g1213-16-17164磺胺类250or300g12-13-1617350100TMP5g10-11-1516164中介度：含意为模棱两可或不定。表16-5 嗜血杆菌抑菌环解释标准及相应MIC分界点抗菌药物纸片含药量抑菌