绞股蓝多糖的药理研究进展.doc

绞股蓝多糖的药理研究进展王国恩 简丽妍 黄菲菲 郑凯东 邓祖仁 黄榕琪 黄育生 袁宇平 钟迪淇（广州中医药大学07制药工程专业 广州 510006） 摘要 本文就国内外对绞股蓝多糖药理的研究，综述其在抗肿瘤作用、对肝损伤的保护作用、影响免疫能力、降血糖作用、对质粒DNA的保护作用、对神经细胞谷氨酸损伤的保护作用、抗氧化作用等七方面研究结果。为指导进一步深入绞股蓝多糖的药理研究和综合利用绞股蓝各种有效成分提供了依据。关键词：绞股蓝多糖 药理 综述 一、前言 绞股蓝（Gynostemma Pentaphyllum）始载于救荒本草，能清热解毒、补气生津、祛痰止咳、安神固精等。根据绞股蓝成份研究，其含有丰富的绞股蓝皂苷，糖类，黄酮类，多种维生素、氨基酸、矿物质及甜叶素等1。现代药理研究发现绞股蓝有多方面的药理作用，较多认为其主要归功于当中的皂甙成分2。因而一般工业生产在绞股蓝提取皂甙后，其含糖类等成份的残渣就被弃去，造成资源的浪费。本文就国内外对绞股蓝多糖药理的研究，综述其在抗肿瘤等七方面研究结果。二、药理作用1. 抗肿瘤作用 娄振岭等3用浓度为10 gL的绞股蓝多糖(GPS)对荷瘤小鼠每l2 h灌胃1次，连续10 d后测得对Sl80肉瘤的抑制率为85，与生理盐水对照组无显著差异；改用浓度为20L的CPS，则测得对S一180肉瘤的抑制率为31，与生理盐水对照组有显著差异(P005)。绞股蓝多糖用于体外培养的人食管癌细胞EC3-109时，随药物浓度增大和时间延长，对EC3-109细胞株的抑制率呈正相关。当GPS的浓度为lg/L时，72 h的抑制率为100；当GPS的浓度为2 gL时，48 h的抑制率为100 ，实验表明，GPS对肿瘤细胞有较强的抑制和杀伤作用。另外，沈爱宝等4对绞股蓝粗多糖抗癌作用研究发现经口服绞股蓝粗多糖，荷瘤小鼠平均存活时间较对照组延长大于50(P001)，显示绞股蓝多糖具有较明显的抗癌活性。2. 对肝损伤的保护作用 以绞股蓝多糖对小鼠连续灌胃7 d之后，腹腔注射05 的CCl4花生油溶液，建立CCl4肝损伤模型及在HepG2细胞培养液中加入不同浓度的绞股蓝多糖，作用5h后，再加入无水乙醇，建立细胞酒精性损伤模型。在适合条件下检测血清丙氨酸氨基转移酶(AIJT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量，观察肝组织病理组织学变化。实验得出绞股蓝多糖各剂量皆能明显抑制肝损伤小鼠ALT、AST活性的升高；抑制肝组织中MDA含量的升高等。说明绞股蓝多糖对小鼠四氯化碳肝损伤及酒精细胞肝损伤皆具保护作用。56 另外，Lin JM 7在对绞股蓝的保肝作用评价研究下，发现绞股蓝多糖对由CC14所致肝毒性的有保护作用。3. 影响免疫能力 在对小鼠移植性肿瘤的接种和NK细胞活性测定实验中，当绞股蓝多糖（PGP）剂量为25, 50, 100 mgkg时，对肝癌Heps小鼠，PGP的三个剂量中，高、中剂量组的NK细胞活性有显著提高(P 001) ，小剂量组与对照组相比虽无显著差别，但也有所提高，表明PGP能显著提高Hpes小鼠NK细胞活性，且与剂量有一定关系。对小鼠血清溶血素的测定中， PGP的两个剂量组中其半数溶血素值Hc50与对照组相比，小剂量组有显著差异，大剂量组未见明显差异，说明PGP对小鼠血清溶血素的含量有明显影响。在对小鼠碳粒廓清速率测定中，绞股蓝多糖(25, 50, 100 mgkg，ip)三个剂量组值与对照组相比有明显提高，说明PGP对小鼠碳粒廓清速率有明显提高作用。在对小鼠免疫器官指数的测定中，对S180小鼠的脾指数有显著提高。84. 降血糖作用 魏守蓉等9以血糖、糖耐量为指标研究GP的降血糖作用。观察绞股蓝多糖（GP）其对淀粉酶的抑制作用。采用 3，5 - 二硝基水杨酸( D N S ) 比色法进行实验，设定对照组及实验组，对照管加入02 ml pH66 02mmolL的磷酸缓冲液，另6支试管分别加入浓度为00016、0008、004 、02、1、5 msml的GP溶液，并设四组实验。实验在1820 min段GP对一淀粉酶的抑制作用达最高峰，GP四个时间段的量效曲线于最大浓度(5 mrm1)达最大抑制率，分别为161 、344 、217 、194。表明G P在体外对淀粉酶具有较强的抑制作用。并以阿卡波糖作阳性对照，其量效曲线也于其最大浓度(5 msm1)达最大抑制率709 。并考察GP对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型的降糖作用，造糖尿病大鼠模型根据血糖，水平将高血糖大鼠随机分为造模组、G P组、阳性药对照组，每组 1 1只。 另取 1 1只同批正常大鼠作为正常对照组。灌胃给药定量，结果显示其稳定的降糖活性 ，且与一般的降糖药不同， 对正常血糖无影响，其降糖机制可能与抑制淀粉酶、延缓碳水化合物在肠道的吸收及促急性胰岛炎恢复有关。5. 对质粒DNA的保护作用 绞股蓝多糖由8种不同的单糖组成。其能保护DNA且呈浓度依赖性。观察绞股蓝多糖体外对过氧化氢(H2O2 )光解反应诱导质粒DNA损伤的保护作用。量取6L质粒DNA，置于小离心管盖中，分别加入不同浓度的绞股蓝多糖水溶液，05mg/ml维生素和芦丁各2L，迅速加入30的H2O2 2L，用水补充至20L反应体系。再置于302nm紫外投射仪上，室温下照射5min后，加入6 X Loading buffer 3L，混匀后点样于1琼脂糖凝胶，80 V电泳50 min，在凝胶成像系统下观察电泳结果。实验结果表明，绞股蓝多糖能抑制lin DNA的产生，使DNA链大多保持自然状态从而保护DNA免受损伤，且这种保护效应表现出质量浓度依赖关系。106. 对神经细胞谷氨酸损伤的保护作用 宋淑亮等人的实验表明绞股蓝多糖对神经细胞谷氨酸损伤的保护作用。将神经细胞在96孔板中培养24 h后换液,同时各实验组分别加入5 mg/mL 的绞股蓝精制多糖GPS2、GPS3溶液2、4、6、L ,培养12 h后加入谷氨酸损伤液,设正常对照组, 37 , 5%二氧化碳饱和湿度继续培养48 h。培养结束前4h,每孔加入MTT(5 mg /mL) 10L, 4 h后小心弃上清,每孔加入DMSO 100 L,待完全溶解后,用酶标仪测定各孔吸光度,测定波长570 nm,参考波长620 nm。结果显示,不同浓度绞股蓝多糖试验组神经细胞损伤有不同程度的减轻,与谷氨酸损伤组相比有显著性差异( P 0. 01) ，表明两种多糖对神经细胞谷氨酸损伤具有一定的保护作用。117. 抗氧化作用 王海元等12通过建立小鼠力竭运动模型,给小鼠灌服不同剂量的绞股蓝多糖溶液,对小鼠的部分组织的抗氧化酶活性与脂质过氧化产物(MDA)的含量测定。实验结果显示，服用绞股蓝多糖对疲劳运动小鼠的部分组织的抗氧化酶活性有增强作用,在一定程度上抑制组织发生脂质过氧化的损害。三、总结绞股蓝多糖作为绞股蓝成分之一，具有复杂而又多方面的生理活性。其较多是动物实验层面上的研究，没或较少应用在哺乳动物的药理研究和临床试验上。绞股蓝多糖有待产业化。从资源利用方面分析，一般工业生产在提取绞股蓝皂甙成分后把残渣弃去，而把残渣中绞股蓝多糖合理利用，对于资源的保护和二次开发有着重要的促进作用。长远来看，如何合理利用绞股蓝残渣中各种活性成分和建立绞股蓝的产业链是绞股蓝乃至中药现代化的发展之路。参考文献1 何显忠，邱江沁. 绞股蓝化学成分和药理作用研究进展J.中国中医药信息杂志，2008，15：8485.2 罗巅辉，王昭晶. 绞股蓝多糖的研究进展J. 生物技术通讯，2005，16(6)：703.3 娄振岭，马丽萍等.绞股蓝多糖（GPS）生物学作用的研究J.河南肿瘤学杂志,1996,3: 4 沈爱宝,邵健.绞股蓝粗多糖抗癌作用的初步观察J.南通医学院学报,1995,1： 5 肖增平，吉爱国，宋叔亮等.绞股蓝多糖对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用J中国生化药物杂志，2008，29(3)：1861886 宋淑亮 ，肖增平 ，吉爱国等.绞股蓝多糖对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用J.中国生化药物杂志，2008，29(5)：3023057 Lin JM, Lin CC, Chiu HF. Evaluation of the anti-inflammatory and liver-protective effects of anoectochilus formosanus, ganoderma lucidum and gynostemma pentaphyllum in ratsJ.Am J Chin Med. 1993;21(1):59-69.8 钱新华, 王佾先, 唐晓玲等. 绞股蓝多糖对免疫功能的影响J, 中国药科大学学报, 1998，30 (1) , 51539 魏守蓉,薛存宽,何学斌等.绞股蓝多糖降血糖作用的实验研究J.中国老年学杂志.2005,2