MM_FS_CNJ_0013 出口粮谷中毒虫畏残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0013出口 粮谷 毒虫畏 残留量 气相色谱 气相色谱-质谱法 外标法定量MM_FS_CNJ_0013 出口粮谷中毒虫畏残留量检验方法1.适用范围 本方法适用于出口糙米中毒虫畏残留量的检验。2.原理概要 试样中的毒虫畏用正己烷-异丙醇提取，经弗罗里硅土柱净化，浓缩，定容后，用气相色谱仪-电子俘获检测器法测定，外标法定量。如有必要可用质谱法确证。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂 异丙醇； 正已烷：重蒸馏； 乙腈：色谱纯； 无水乙醚； 无水硫酸钠：经650灼烧4h，置干燥器内备用； 弗罗里硅土：PR，60100目，Flukachemie AG或相当者，使用前于130烘约3h。于干燥器中冷却备用，于两周内可使用； 硅藻土：Celite545； 毒虫畏标准品：纯度98%，含有Z-异构体与E-异构体； 毒虫畏标准溶液：准确称取适量的毒虫畏标准品，用正己烷配成浓度为100g/mL的标准储备溶液，根据需要再用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。3.2.仪器 气相色谱仪：带有电子俘获检测器； 弗罗里硅土净化柱：300mm10mm(id)玻璃柱，装入弗罗里硅土Celite)按(41)混合的混合物1g，上端装入1g无水硫酸钠。使用前用正己烷10mL淋洗； 植物粉碎器； 高速均质器：800024000r/min； 旋转蒸发器：配有250mL心形蒸发瓶； 微量注射器：10L。4.试样的抽取与制备4.1.检验批 以不超过4000袋(200t)为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量 按一批总袋数的平方根式(1)抽取：a(1)式中：N全批袋数； a抽样袋数。注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。4.3.抽样工具 单管取样器：不锈钢管，全长55cm(包括手柄)，直径1.5cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的一半了； 取样铲； 分样板； 样品筒(袋)：可密封； 分样布或适用铺垫物。4.4.抽样方法4.4.1.倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取规定的应抽样件数的10%(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约45倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出，查看袋内和袋间品质是否均匀。确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品，立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品量应基本一致。4.4.2.袋内抽样：按规定的应抽样袋数的90%，在堆垛四周上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。将取样器管槽朝下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后将管槽旋转朝上，抽出取样器，立即将样品倒入盛样容器内。每袋抽取样品数量应与基本一致。 每批样品所抽取总量应不少于4kg。4.4.3.大样缩分 集中袋内和倒包抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分出样品不少于2kg，盛于样品筒内，加封后标明标记并及时送交实验室。4.5.试样制备 将样品按四分法缩分至1kg，全部磨碎并通过20目筛，混匀，均分成两份，装入洁净的容器内作为试样，密封并标明标记。4.6.试样保存 将试样于5以下避光保存。注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.测定步骤5.1.提取 称取试样约20g(精确到0.1g)于250mL锥形瓶中，加入正己烷-异丙醇(31)80mL于高速均质器上均质3min。然后抽滤于500mL分液漏斗中。用20mL异丙醇分几次洗残渣，再过滤于上述分液漏斗中。用680mL2%硫酸钠水溶液洗涤提取液，每次弃去水洗液，直洗至在水中无异丙醇气味时为止。将提取液过无水硫酸钠柱，用正己烷洗无水硫酸钠柱，均收集在100mL刻度量筒中，定容至60mL。该提取液为1g试样/3mL。5.2.净化 取一份相当于2g试样的正己烷提取液，置于50mL分液漏斗，加10mL正己烷饱和的乙腈，用力振摇1min，静置分层。弃去己烷层。再用10mL正己烷洗涤乙腈层，弃去正己烷。将乙腈用干燥空气流蒸发至干，用2mL正己烷溶解残渣，转移至净化柱中。用无水乙醚-正己烷(14)混合液以12滴/s的流速洗脱，弃去前10mL洗脱液后，接收40mL洗脱液于250mL心形瓶中。在旋转蒸发器上于40浓缩至近干。用5.0mL正己烷溶解残留物，供气相色谱和色谱/质谱测定。5.3.测定5.3.1.色谱条件色谱柱：玻璃柱，2m3.0mm(id)，用2.5%OV173.3%QF-1涂于Chromosorb W AW-DM-CS(80100目)填充；载气：氮气，纯度99.99%；流量：60mL/min；进样口温度：290；检测器温度：290；柱温：220。5.3.2.色谱测定 根据样液中毒虫畏含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中毒虫畏响应值均应在仪器的检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定，在上述色谱条件下，毒虫畏两种异构体的保留时间分别约为9min(E-异构体)和10min(Z-异构体)。毒虫畏标准品气相色谱图，见附录A中图A1。5.4.气相色谱-质谱确证试验5.4.1.气相色谱-质谱条件：色谱柱：石英毛细管柱，DB-5，30m0.25mm(id)0.25m(膜厚)，或者相当的；载气：氦气，纯度99.99%,1mL/min；色谱柱温度：程序升温：60不保持，以40/min速度升至150，不保持，以20 /min速度升至250，保持15min；进样口温度：250；色谱-质谱接口温度：250；离子源温度：200；进样量：1L；进样方式：无分流，1min后开阀；电离方式：EI；测定方式：全扫描方式；扫描范围：30450amu；溶剂延迟：3min。5.4.2.质谱确证：分别取标准工作溶液和样液(5.2)1 L按5.4.1规定的条件进行测定。如果样液中出现与标准溶液中毒虫畏相同保留时间的峰，则用谱库对其检索，进行确证。5.5.空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。6.结果计算 用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中毒虫畏残留量：X(h1h2)cV(2)(hs1hs2)m式中：X试样中毒虫畏残留量，mg/kg；h1样液中Z-体毒虫畏的峰高，mm；h2样液中E-体毒虫畏的峰高，mm；hs1标准工作溶液中Z-体毒虫畏的峰高，mm；hs2标准工作溶液中E-体毒虫畏的峰高，mm；c标准工作溶液中毒虫畏的浓度，g/mL；V最终样液的体积，mL；m最终样液所相当的试样量，g。注：计算结果需扣除空白值。7.低限，回收率的测定7.1.测定低