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動物疫苗品質管制技術 林家修1020716高生製藥股份有限公司施懷哲維克生物科技 股 公司 生物體的免疫系統 初級淋巴器官骨髓 BoneMarrow 胸腺 Thymus 法氏囊 BursaofFabricius 次級淋巴器官淋巴結 LymphNodes 脾臟 Spleen 黏膜層淋巴組織 Mucosa AssociatedLymphoidTissue MALT 表皮免疫組織 3 99 M細胞 M細胞表面只有稀疏的絨毛狀結構內凹結構內有B和T淋巴細胞 樹突狀細胞以及巨噬細胞 黏膜免疫 並非所有的疫苗都可以 病毒 HIV 1 SIVandOtherRetroviruses 減毒活疫苗Sal PRgI TK 載體疫苗PR GH 次單位疫苗 Toxin 致病基因 抗原基因 E coli 剪除 轉入他源基因 TideCell BelloCell TideCell Antigen抗原 Adjuvant佐劑 Vehicle載體 Immunestimulant免疫促進劑 VaccineSystem 影響疫苗篩選的因子 抗原 辨認 呈現 抗體細胞免疫記憶 1O免疫反應 病原 2O免疫反應 生病 無症狀耐過 驚險過關 生物 免疫系統 保護力 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo 台灣農業產值概況 102年 產值 COA畜禽統計調查結果 102年1季 動物用藥品 國際地位 2010年全球動物用藥品總產值6000億元 動物用藥品產業現況 1500億元 工研院IEK2010 動物用藥品產業現況 化學工業億美元 2010年製藥業總產值600億元 國內地位 農業生物科技 產業地位 國內潛在產值 億元資料來源 91 11 21 COA農業生物技術中長期發展目標 屏科園區 瑞寶基因德羅曼 高生 施懷哲維克縣農會 大豐全亞洲台生 家衛所 產業國際化趨勢國內現況 8家疫苗廠 外資建廠1羅曼 卜蜂 國際合作 自有品牌2台生 瑞寶 國資自建 策略聯盟2拜耳 大豐 產銷合作 高生 施懷哲 維克 合併 必要之地域性產業與企業化養殖息息相關關鍵技術密集基因重組 組織培養 發酵 純化工技高附加價值 高法規風險 動物疫苗產業 特性 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo 疫苗產業是特許行業 經濟部 財政部 公司執照 工廠登記證 營利事業登記證技術法規農委會GMP查廠產品製造許可證產品逐批檢驗實驗動物管理驗證 新藥產品 新藥要做委託試驗 不可以發生 排毒 同居感染及毒力回歸 任何生物製劑 取得製造許可證前 需要通過官方核准之驗證產品特性檢驗方法確認實驗室安全效力 毒力回歸 排毒田間安全效力 群體保護 育成 增重其他特別要求 Virus污染 動物用生物藥品檢驗標準活 菌毒 成品品管規範 一 特性試驗 二 無菌試驗 Bact Fungi Myco三 真空 含濕度試驗 Live四 抗原含有量試驗 Directorindirect五 認定試驗 UniqueIDtest六 病毒迷入試驗 Ag AbtestorPCR七 安全效力試驗 Targetanimalorother Challenge EfficacyorPI PD50八 抗體力價 發痘九 福馬林殘留量 貼合格證 制定動物用藥品法規及標準 藥品審議委員會 行政院農業委員會動植物防疫檢驗局 專家長官 行政院農業委員會家畜衛生試驗所藥品檢定分所 疫苗品質管制 源自法規要求 動物用藥品管理法動物用藥品管理施行細則動物用藥品製造場所設廠標準優良藥品製造標準 GMP 動物用生物藥品查驗辦法動物用生物藥品檢驗標準 動物用藥品管理法目的 改進藥品品質 維護動物健康 促進畜牧事業 內容 共48條 第1條至第11條解釋藥品 偽 禁 劣藥及製造 販賣之定義 第12條至第20條規定製造或輸入藥品登記 第21條至第24條規定販賣業者之業務範圍及輸出藥品規定 第25條至第29條規定製造廠所檢查及藥品抽驗 第30條至第45條規定製造或販賣偽藥 禁藥或劣藥之罰責 動物用藥品管理法 第十八條動物用生物藥品 於製成或輸入報關完稅後 製造業者或輸入業者應逐批向直轄市或縣 市 主管機關申請抽樣檢驗 經該管主管機關派員抽取樣品 查驗合格並封緘後 始得出售 前項查驗辦法 由中央主管機關定之 動物用藥品管理法施行細則目的 規定動物用藥品管理法執行方法內容 本細則共57條 第1 15條解釋動物用藥品管理法之有關條文 藥品檢驗登記及工廠登記應辦事項第16 21條規定生物藥品之查驗申請及抽樣與覆驗事項 第22 40條規定藥品販賣業者及營業場所 推銷員 申請輸出藥品應辦事項 第41 53條規定抽查業者 藥品與取締偽 禁 劣藥 規定收費標準之訂定等 疫苗品質管制 源自法規要求 動物用藥品管理法動物用藥品管理施行細則動物用藥品製造場所設廠標準優良藥品製造標準 GMP 動物用生物藥品查驗辦法動物用生物藥品檢驗標準 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo Ex 空氣清淨管理 Ex 空氣清淨管理 GoodManufacturingPractice優良藥品製造標準 事先制定標準作業程序SOP standardoperationprocedureSOI standardoperationinstruction依標準作業程序執行 及確認作業完整資料記錄 可逐步回查錯誤發生點 cGMPCurrentGoodManufacturingPractices藥品優良製造標準 確效Validation 係指有文件證明的行動 能證實任何程序 製程 機械設備 原料 物料或系統確實持續穩定的導致預期之效果 藥品優良製造確效作業 一 總則二 設施 設備 一 設施與設備之確效 二 設備清潔方法之確效 三 純化水系統之確效 四 空氣調節系統之確效三 人員確效四 製程確效五 分析確效 設備清潔方法之確效 設備均有清潔 保養 維護SOP及記錄經核准的確效計畫書 載有負責人員 判定標準及再確效日期標的物 清潔劑 微生物取樣方法 直接表面取樣法 洗滌取樣法分析方法 專一性 靈敏性確效後長期監控 On line導電度計 設施與設備之確效設計驗證 DQ DesignQualification安裝驗證 IQ InstallationQualification操作驗證 OQ OperationQualification性能驗證 PQ PerformanceQualification QC GMP QA TheProductionFlow 46 QA QA QA QA Processes PIC SGoalPharmaceuticalinspectionco operationscheme GMP標準 致化 稽查品質 致化 稽查品質 致化 稽查品質要求稽查員教育訓練 Intra andinter tough easy GMP標準 致化 PIC SGMPGuide PE009 7 Sep 2007 內容PartI formedicinalproductsPartII forAPIsAnnexes1to19 annex16不採用 公告之PIC SGMP指導手冊 PE009 6 Apr 2007 Recommendation Guidancedocuments VirtuallyidenticaltoECGMPGuide GMP標準 致化 PIC SGMPGuide PE009 7 Sep 2007 Recommendation Guidancedocuments 25篇 Validation masterplan IQ OQ process cleaning ValidationofAsepticProcessesSterilityTestingComputerisedSystemsinRegulatingGXPEnvironmentsSMFAide memoire InspectionofUtilitiesAide memoireontheinspectionofQClaboratories Aide memoireontheinspectionofmanufacturersofclinicaltrialproducts Aide memoireontheinspectionofbiotechnologymanufacturers 動物用藥廠優良藥品製造標準追蹤檢查作業要點目的 動物用製劑藥廠 定期或不定期的追蹤檢查其執行優良藥品製造標準情形 日期 民國85年4月30日由農業委員會訂定 內容 本要點共6條 第1條檢查依據 第2條檢查頻率 定期及不定期第3條檢查方式及要領 第4條檢查重點 第5條檢查評級 P及F第6條檢查報告及處置 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo 生物藥品檢驗 1 藥品的常規檢驗 成品檢驗 QC 生產過程中品質控制 QA 儲藏過程中的品質控制 藥品檢驗目的 2 提供品質管控及分析3 藥品品質標準化 國際化 藥品品質標準 為確保藥品的安全和有效 在藥品的研究 生產 及使用過程中均應進行品質監督和檢驗 這就需要有法定的的依據 藥品品質標準 藥品品質標準 EP USP CP 相關品質管理規範 藥品實驗室研究管理 GLP確保實驗數據的準確可靠 藥品臨床試驗管理 GCP受試者的安全和權利試驗资料的科學性 可靠性 再現性 藥品生產管理 GMP cGMP PICS依GMP規定生產符合藥品標準的藥物 藥品經營品質管理 ISSO 生物藥品品質管理 第十四節家禽霍亂菌苗檢驗標準第四十九條本標準適用於家禽霍亂菌 Pastueleamultocida 培養菌液 加適當防腐劑後製成製劑之檢定 第五十條被檢家禽霍亂菌苗須符合下列條件 一 特性試驗 須具固有理學的性狀 pH六 六至七 雖含有小量灰白色菌體沈澱 但不得含有異物及異常氣味 二 無菌試驗 不得含有任何可能檢出之活菌 且本劑之塗抹檢查 不得含有家禽霍亂菌以外之細菌 三 防腐劑含有量試驗 石碳酸及蟻醛之含有量各須為 二 以下 四 安全試驗 選體重一三至一五公克健康小白鼠五隻 各注射本劑 五公撮於皮下 經二週觀察 須無任何不良反應而增重健存 五 效力試驗 選體重一三至一五公克健康小白鼠一二隻 任取二隻為對照 其餘一 隻試驗小白鼠各注射本劑 二公撮於皮下 經二週 以家禽霍亂菌一 MLD皮下注射攻擊 觀察二週 試驗組白鼠須六 以上耐過而健存 對照小白鼠須全部發病斃死 前項試驗確定困難時 應予複檢 生物藥物與化學藥物的區别 生物藥物在結構上 是大分子藥物化學結構不明確分子量不是定值 b 生物藥物在檢查項目上 重視安全性的檢查熱源檢查 過敏實驗異常毒性實驗生物活性的檢查 內容摘要養殖 動物藥品 動物疫苗產業現況疫苗品質管制許可制 法律規範 GMP QA QC 公告標準 藥品逐批檢驗安全 效力 invitro invivo 1取樣 當n 3時 每件取樣 當n 300時 按 1當n 300時 按 2 1當n 300時 取5件每增加200 增1件 2鑑别 1 外觀檢查 製品外觀異常會涉及製品的安全和效力2 真空度及溶解時間凍乾製品真空封口 可保持製品的生物活性和穩定性 有真空度瓶内放電現象會出現藍紫色光3 防腐劑含量測定4 凍乾製劑水分含量測定5 鋁膠含量測定 物理性狀檢查 真空試驗 2鑑别 1 採用生物化學法及生物學方法進行特定反應 判斷製劑內抗原的真偽 是否為核准規範之物 活菌 活病毒 不活化細菌或病毒 次單位抗原2 生物法 免疫法 電泳法 生物性狀檢查 Masterseedbacteriasatisfiedthetestfor Morphology shortrod Gram sstaining negativeAbsenceofgrowthonMacConeyagarBiochemicalcharacteristicsIndole SIM Nitratereduction KCN Ornithinedecarboxylase Catalase Gelatinhydrolysis VP MR Argininedecarboxylase Lysinedecarboxylase Citrate Malonate Urease Hemolysis goat 檢驗標準 認定試驗 HCV 豬瘟弱病毒 兔出血熱抗體陰性兔4隻 3隻為試驗組 分別靜脈注射1劑量 另1隻為對照組 靜脈注射稀釋液2ml 注射後 觀察1週 試驗組須有2隻呈特殊熱型反應 照組須無任何不良反應而健存 病毒含有量試驗 間接方法 將痘病毒以特定引子作PCR分析 M為100bpDNA標記 S為高生穿刺用雞痘疫苗病毒株 a b c則為受篩選之鴿痘病毒株 PCR結果皆出現一段578bp大小的DNA片段 確認為禽類痘病毒 箭號所指DNA標記為500bp 使用8 洋菜凝膠電泳分析 500bp 3雜質檢查 藥物在不影響效力及安全的原則下 可以允許生產過程引入的微量雜質存在 經由檢查判斷藥品純度是否符合限量規定的要求 臟器疫苗 同樣是政府檢驗合格組織培養疫苗沒有以下的風險 1 過敏的風險2 病毒迷入的風險3 10無害菌 劑的風險4 抗生素的風險5 保存性的風險6 品質穩定的風險7 效力的風險cn cn econ 4安全性檢查 生物藥物安全性要求 1 毒性試驗 高劑量的藥物依指定方法 給予規定體重的試驗動物 觀察其毒性反應 以試驗動物的死亡與否為指標 2 無菌檢查 確認沒有本菌或雜菌 3 熱源檢查 將一定劑量的樣品 静脈注入家兔體内 以其體温升高的程度 判定樣品中所含熱源是否符合規定 SDATSATGCMycoplasma 無菌試驗 豬瘟活毒疫苗豬隻安全試驗 選18 25公斤8週齡SPF豬5頭 1隻為對照 試驗豬4頭 皮下注射100及1 100劑量各2頭 14日觀察均須無任何不良反應而健存 1 藥品通過鑑别 安全合格後進行效力測定 2 生物製品是具有生物活性的製劑 它的效力一般是利用生物體來測定樣品的效價3 效力以生物體對樣品的反應為基礎4 以生物統計為工具5 特定的實驗設計6 比較樣品和對照品在一定條件下所產生的差異來測定樣品的效價 5效力檢查 1 動物保護力試驗疫苗免疫動物后 再用同種的活菌 活毒攻擊 從而判定製品的保護力 1 定量免疫定量攻擊法 2 變量免疫定量攻擊法 50 有效免疫劑量PD50的測定 3 定量免疫變量攻擊法 保護指数測定PIindex 5效力檢查 方法1 5效力檢查 方法2 2 活疫苗的效力測定 1 活菌數測定 2 活病毒滴度測定3 血清內抗體測定主要測定抗體水平用於推斷抗原活性 常用包括凝集法 間接血凝抑制法 中和法等 4 電泳法 0 1ml 99ml 99ml C 重點 30colonies 300colonies是最適當的計算菌斑 1 2 3 original 1ml 1ml 1ml 9ml A B C 9ml 99ml 99ml 9ml 1 2 1ml 1ml E F 1ml 1ml 9ml 9ml 9ml D 病毒力價 32HAunits ml Hemagglutination 紅血球凝集 測定 方法 1 8 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 8 16 32 64 128 256 virus 系列稀釋 與紅血球混合 側視 頂視 NDV NDV HAtest 病毒含有量試驗 間接方法 病毒含有量試驗 直接方法 gE TK gE TNL 豬瘟活毒疫苗豬隻效力試驗 將前項安全試驗豬4頭 於疫苗接種後第14日 皮下注射豬瘟強毒ALD株10 000MLD攻擊 觀察2週 均須無不良反應而耐過健存 但對照豬須於2週內呈典型急性豬瘟病症而斃死 檢驗標準 病毒迷入試驗 1劑量與具有1000倍以上血清等量混合 37度感作1小時 分別接種豬腎 兔腎等株化細胞及兔出血熱抗體陰性之兔5隻 細胞培養者經培養5日 須無細胞變性效應 並經次代同源