葡萄酒中铁含量测定.doc

葡萄酒中铁含量测定一、 实验目的1、 熟练掌握分光光度计的操作方法2、 掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法3、 学习吸收光谱分析法的实验条件的选择二、 实验原理葡萄酒是以新鲜葡萄为原料发酵而成的酿造酒。在酿造过程中，葡萄浆果里的糖经酵母菌的作用，分解为酒精及其副产物。葡萄浆果中的其他成分(如单宁、色素、芳香物质等)以不变化的形式转移到葡萄酒中，因而葡萄酒营养丰富。葡萄酒中含有铁，而铁又是造成葡萄酒变质的重要因素，因此铁的测定就显得格外重要。葡萄酒中的铁几乎全部处于络合状态，以铁和亚铁络合物存在，这些络合物一般是比较稳定的，但是也能电离出少量的Fe3+和Fe2+。测定含量时，首先需要还原剂盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+，与邻啡罗啉作用生成红色螯合物，其颜色的深浅与铁含量成正比，用分光光度法进行铁的测定。显色反应条件是影响测定灵敏度和准确度的主要因素。显色反应条件包括显色剂的用量、溶液酸度、显色反应时间和反应温度及干扰物质等，均需一一研究以便制定最佳分析方案。三、 实验材料分光光度计，浓硫酸，过氧化氢溶液，氨水，盐酸羟胺溶液(1OOgL)，邻啡罗啉溶液(1.2gL)，铁标准溶液(1O0mgL)，铁标准使用液(1OmgL)。四、 实验方法及数据处理1、 测定条件的研究1.1 波长的选择取10.00mL浓度为10mgL的铁标准使用液于50mL容量瓶中，加1OOgL盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置2min，然后加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，2mL1.2gL邻啡罗啉溶液，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以试剂空白作参比，于各种波长处，采用721分光光度计测定吸光度。然后在不同的波长下测定其吸光度值，绘制吸收光谱曲线（波长为横坐标，吸光度为纵坐标）。波长/nm440450460470480490500505510515520530540550560A0.2850.2990.3230.3610.3750.3810.3940.4000.4070.4000.3810.3060.2110.1220.069图一 不同波长下的吸光度1.2 显色时间的测定装入1.00吸收池的上述显色试液，在 510nm 波长下，以纯水为参比溶液，测定显色反应时间分别为 5min、10min、20min、30min，40min、1h 时显色产物的吸光度，确定显色反应时间。t/min81020304060A0.3970.3980.4100.4120.4140.419图二 不同显色时间下的吸光度1.3 显色剂用量的确定取7只50mL容量瓶，分别加入10.00mL浓度为10mgL的铁标准使用液于各容量瓶中，并加入1OOgL盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置2min后，再分别加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，然后在各容量瓶中分别准确加入1.2gL邻啡罗啉溶液0.20、0.40、0.60、1.50、2.00、3.00ml，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以试剂空白作参比，于波长510nm处，采用721分光光度计测定吸光度。以显色剂体积为横坐标，以相应吸光度为纵坐标，绘制吸光度对显色剂用量的曲线，从而确定在测定过程中应加入的显色剂体积。V邻菲罗啉/mL0.000.200.400.601.502.003.00A0.0000.1070.1920.3010.3870.3860.387图三 不同显色剂体积下的吸光度14 溶液酸度的确定取100ml容量瓶，加入铁标准溶液(1O0mgL)10.00ml，加入10ml 2mol/L HCl和 10ml 1OOgL盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入20 ml 1.2gL邻啡罗啉溶液，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。取7只50mL容量瓶，分别加入10.00mL上述溶液，再分别加入 0.4mol/L NaOH 溶液 0.00、1.00、2.00、4.00、5.00、7.00、9.00ml，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。测定个溶液pH值，在 510nm 波长下，以纯水为参比溶液，测定吸光度。以溶液pH值为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，绘制A-pH曲线，确定适宜pH范围。PH2.004.006.008.0010.0012.0014.00A0.0730.2720.3840.3930.1920.1340.071图四 不同pH下的吸光度2.试样中铁含量的测定2.1 试样的处理吸取酒样 1.00 mL于 10 mL凯氏烧瓶中，置电炉上缓缓蒸发至近干，取下稍冷后，加1 mL浓硫酸（根据含糖量增减）、1 mL过氧化氢，于通风厨内加热消化。如果消化液颜色较深，继续滴加过氧化氢溶液，直至消化液无色透明。稍冷，加10 mL水微火煮沸 （35） min，取下冷却。同时做空白试验。2.2 制作标准曲线取6只50mL容量瓶，分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 ml浓度为10mgL的铁标准使用液于各容量瓶中，并加入1OOgL盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置10 min后，再分别加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，然后在各容量瓶中分别加入1.2gL邻啡罗啉溶液 2 ml，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以纯水作参比，于波长510nm处，采用721分光光度计测定吸光度。以铁的浓度为横坐标，以相应吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。标液系列编号空白标液1标液2标液3标液4标液5标液浓度（mg/L）10标液用量（ml）0.002.004.006.008.0010.00A0.0040.0880.1540.2390.3150.395图五 不同浓度下的吸光度23 试液铁含量测定与计算将2.1中处理过的试样溶液，定量转移至 50 ml容量瓶中，加入1OOgL盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置10 min后，再分别加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，然后在各容量瓶中分别加入1.2gL邻啡罗啉溶液 2 ml，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以纯水作参比，于波长510nm处，采用721分光光度计测定吸光度。( A= 0