Survivin和环氧合酶2在卵巢肿瘤中的表达及意义.doc

Survivin和环氧合酶2在卵巢肿瘤中的表达及意义作者：王运端,张海娟,刘风军,李惠敏,吴凤鹏单位：河北省石家庄市第四医院妇产科；河北医科大学第四医院肿瘤科【摘要】 目的 检测Survivin和环氧合酶2（COX2）在卵巢肿瘤及正常卵巢组织中的表达情况，分析两种基因的表达与肿瘤的发病及病理特征的关系，进而为卵巢癌的靶向治疗提供理论依据。方法 应用免疫组化SP法检测22例正常卵巢组织、48例良性上皮性卵巢肿瘤、52例上皮性卵巢癌组织中Survivin基因和COX2基因的表达水平，并对两基因在不同组织中的表达水平及其与肿瘤的病理分级、临床预后等因素进行分析。结果 Survivin和COX2在正常卵巢组织中的阳性表达率均为0%，在良性上皮性卵巢肿瘤中的阳性表达率分别为 0%（0/52）和27.08%（13/48），卵巢癌组织中的阳性表达率分别为71.15%（37/52）和57.69%（30/52），两基因在不同组织中的表达均差异有统计学意义（P0.01）；在不同病理类型的卵巢癌组织之间Survivin和COX2的表达率和表达水平均未见差异（P0.05）；随着卵巢癌FIGO分期和病理分级的增加，Survivin的阳性表达率逐渐增加（P0.05），而COX2的阳性表达率无明显差异（P0.05）；对卵巢癌患者进一步随访证实Survivin基因阳性表达组患者的5年预后明显较阴性表达组患者差（P0.05），而在单纯阳性表达COX2的患者与两基因均阴性表达组中无此差异（P0.05）。结论 Survivin基因和COX2基因为卵巢癌组织中的两种高表达基因， Survivin基因在卵巢癌组织中表达水平高预示着患者存在预后不良的可能，认为Survivin基因可能成为卵巢癌生物治疗的新靶点。 【关键词】 卵巢肿瘤；Survivin；环氧合酶2 目前关于卵巢癌靶向治疗的基础研究，国内外文献尚少见报道，本文拟通过对调亡抑制基因Survivin和环氧合酶2基因（COX2）在卵巢癌、良性肿瘤以及正常卵巢组织中的表达状况进行分析，并对两基因的表 达状况与卵巢癌患者的5年生存状况进行分析，为探索卵巢癌的靶向治疗提供理论依据。 报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料 回顾分析我院2002年1月至2004年1月收治的卵巢癌患者52例，年龄1865岁，平均年龄45岁。根据卵巢癌FIGO分期标准52例患者中期17例，期35例；其中浆液性癌32例，粘液性癌9例，透明细胞癌6例，子宫内膜样癌5例；病理分级为：G1级10例，G2级11例，G3级31例。所有患者均手术治疗，术后行PC方案（顺铂+环磷酰胺）化疗6个以上疗程，对所有卵巢癌患者进行5年随访。1.2 材料与方法 对52例卵巢癌标本、48例良性上皮性卵巢肿瘤标本、25例正常卵巢组织标本进行免疫组化检测。兔抗人Survivin多克隆抗体和鼠抗人COX2单克隆抗体和SP试剂盒由Neowmarker生物技术有限公司提供，DAB显色剂为北京中山生物有限公司产品。所有标本严格按照免疫组化SP法试剂盒说明进行检测。用已知Survivin阳性大肠癌组织和COX2阳性乳腺癌组织作阳性对照，PBS代替抗作为阴性对照。每张切片由2名病理学医师双盲观测10个视野（200倍），COX2阳性表达位于细胞浆，Survivin 阳性表达位于细胞核。评分标准：每张切片阳性细胞的阳性强度按无着色、淡黄色、棕黄色和黄褐色分别记03分，着色面积按无着色、着色1/3、着色1/32/3、着色2/3分别记03分；两项之和03分为阴性（），34分为弱阳性（+），45分为阳性（+），56分为强阳性（+）。1.3 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，统计学方法采用χ2检验评价近期疗效，KaplanMeier方法进行生存分析并用Logrank检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果2.1 两基因在在不同卵巢组织中的表达及与卵巢癌临床病理特征的关系见表1、2。表1 Survivin和COX2在不同卵巢组织中的表达（略）表2 Survivin和COX2的表达与卵巢癌临床病理特征的关系（略）2.2 卵巢癌患者中两基因表达与生存状况关系 患者5年随访率为92.30%（48/52），失访4例，平均生存时间为27个月；截止2008年7月存活16例。见表3。表3 Survivin和COX2的表达与患者生存状况的关系（略）2.3 Survivin基因在卵巢癌组织中表达水平高低与预后的关系。2.4 Survivin基因表达不同水平的卵巢癌患者生存时间的分析，见表4。表4 Survivin表达不同水平的卵巢癌患者生存时间比较（略）3 讨论 Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新成员，主要分布于胚胎及未分化成熟的组织中，而大多数常见肿瘤组织内，如肝癌、结直肠癌、高分化淋巴瘤、宫颈癌、卵巢癌中表达异常升高1，2，表明Survivin可能是肿瘤发病机制中的一个重要因素。目前认为Survivin是一个双功能酶，既可以在Bcl2的下游阻断半胱氨酸蛋白酶Caspase3和Caspase7凋亡调节通路，又可以对细胞周期进行调控，因此，Survivin基因过度表达可以抑制细胞凋亡，从而有利于细胞的异常增殖和恶性转化。Sui等3用免疫组化和Western印迹方法研究了103例卵巢上皮肿瘤中Survivin的表达，结果显示Survivin在恶性和交界性肿瘤中的阳性表达率分别为51.1%和47.8%，显著高于良性肿瘤中的表达（21.2%），并且Survivin的过度表达与肿瘤大小有显著关联性。Takai等4用荧光免疫组化技术分析了26例卵巢上皮性癌和10例良性卵巢肿瘤中Survivin的表达，亦得出相同结果。本研究结果显示，Survivin在卵巢癌中的阳性表达率为71.15%，与良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织相比，差异显著。另外，本研究结果也表明，随着卵巢癌临床分期和病理分级的增加，Survivin的阳性表达率也逐渐增加，各组间差异有统计学意义，与Cohen等5的研究结果一致。同时，本研究也表明，Survivin阳性患者的五年生存率明显低于Survivin阴性的患者，且随着Survivin表达水平的增加，患者的生存期明显缩短，Byun等6在肾癌组织研究中也得出相同结论。由于临床分期、组织分化程度和五年生存率是卵巢癌预后的重要参数，因而说明Survivin基因的表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。本研究表明，Survivin蛋白的的表达与卵巢癌的组织类型无关，而Yoshida等7研究发现卵巢透明细胞癌组织中Survivin的表达显著高于浆液性卵巢癌，故Survivin蛋白的表达在不同组织类型间究竟有无差异，有待大样本进行比较。 COX2是花生四烯酸转化为前列腺素过程中重要的限速酶，编码两个独立的基因型，即COX1和COX2。COX2在炎症和肿瘤中起重要作用，COX2的活性增加和过度表达与肿瘤的发生发展密切相关。本研究结果显示，COX2蛋白在正常卵巢组织中的阳性表达率为0%，在良性卵巢肿瘤中的阳性表达率为27.08%，在卵巢癌中的阳性表达率为57.69%，显著高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤。Li等8在9例正常卵巢、137例卵巢上皮癌和7种卵巢癌细胞系中研究了COX1和COX2蛋白的表达，结果发现正常卵巢上皮中无COX2的表达，而卵巢癌中COX2的表达率为70.8%，与本研究结果一致，提示COX2对于卵巢癌的恶性转化及肿瘤的生长有促进作用。COX2与卵巢癌临床病理学特征的关系结论不一，有资料显示，COX2表达同血管生成相关，同进展期、高病理分级的卵巢浆液性癌患者生存显著相关，通过多变量分析显示COX2表达在不同的预后因素中是最强的预测指标9。本研究发现COX2蛋白的阳性表达率在期为58.82%，期为57.14%，差异无显著性；G1+G2级和G3级的阳性表达率分别为57.14%和56.25%，无明显差异；并且COX2蛋白的表达与卵巢癌的组织学类型亦无明显相关性，与Ferrandina等10的研究究结果一致。本研究通过COX2基因表达与患者生存状况关系的分析表明，COX2的阳性表达与患者的五年生存率无相关性（P=0.41）。提示COX2的表达可能与癌早期形成有关，而不足以作为卵巢癌独立的不良预后指标。而Denkert等11通过单变量分析显示卵巢癌侵袭性肿瘤中COX2的表达与中位生存期显著下降相关，而对于小于60岁的患者这种关联更为显著，在多变量分析中COX2表达可被认为是一种独立的卵巢癌预后因素，其结论的差异有待日后进一步研究。【参考文献】 1 Hay BA.Understanding IAP function and regulation: a view from Drosophila . 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