cd44基因表达与乳腺癌侵袭转移相关性.doc

浅谈乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一，虽然50的乳腺癌经手术治疗后可治愈，但仍有50的病人在治疗后5年内出现复发转移而导致治疗失败。在淋巴结有转移的病人中复发转移率高达7080，即使淋巴结无转移的病人中亦有2030的复发转移率，而乳腺癌转移是导致患者死亡的主要原因。近年来的研究发现，细胞粘附分子 cd44的表达与乳腺癌细胞的生长、浸润、转移和预后相关。本文就近年来对 cd44基因的研究现状及其与乳腺癌侵袭转移的关系作一简要综述。 cd44基因的结构、功能及其表达 1989年 stamenkovic等（1）使用不同的单抗分离和克隆到了编码为 cd44cdna基因片段。人类的 cd44基因位于11号染色体短臂上，由20个高度保守的外显子组成，完整基因组在染色体 dna上大约跨越50kb，每个外显子长度从70bp到210bp不等（2）。 cd44基因的外显子按表达方式分为两种类型：一种是组成型外显子，其转录片段存在于所有 cd44转录子中，主要在间质和造血源性（ haemo poietic）细胞中表达。仅含组成型外显子的 cd44转录子，称为标准型 cd44（ standardformcd44， cd44s）转录子；另一种是主要在上皮源性（ epithelial）细胞和肿瘤细胞中表达的 v区变异性拼接外显子，在基因组上位于第5和第6个组成型外显子之间，其表达片段位于 cd44肽链的细胞外区域靠近跨膜区部位， v区外显子在转录时可随机拼接，含有变异型拼接外显子的 cd44转录子称为变异型 cd44（ variantformcd44， cd44v）转录子。 cd44是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均能检测到它的表达（3）。研究表明 cd44蛋白属表面粘附分子，主要参与细胞细胞、细胞基质间的特异性粘连过程。 cd44具有以下几种功能：介导淋巴细胞与后毛细血管或小静脉中的高内皮细胞结合，使淋巴细胞穿过血管壁回到淋巴组织；参与淋巴细胞的激活过程；与细胞外基质中的透明质酸、胶原蛋白、纤维蛋白、层粘蛋白等基质结合；与细胞骨架蛋白结合，参与细胞的伪足形成，并与细胞的迁移运动有关（3，4，5，6）。正常 cd44分子在淋巴细胞归巢（ homing）、移行及与高血管内皮细胞结合过程中起重要作用；而转移性肿瘤细胞表达 cd44v，从而出现迁移和增殖，有研究表明，在大鼠胰腺癌细胞中非转移性细胞株只表达 cd44s，而转移性细胞株表达 cd44v，而且将变异型 cd44cdna转染到非转移性的细胞株亦引起转移，因而认为 cd44v与肿瘤的侵袭转移密切相关（7）。但变异型 cd44在肿瘤的转移和进展中的作用也有相反的报道（8，9）。 2 cd44基因表达与乳腺癌侵袭转移的关系 cd44基因在许多肿瘤中均有异常表达，而 cd44基因的异常表达与乳腺癌的相关性研究也是近年来的一个研究热点。 fichtner等（10）对荷人乳腺癌的裸鼠是否表达 cd44v及某种表达形式是否与某些生物学指标如肿瘤大小、激素受体、组织类型、肿瘤增殖率、肿瘤耐药性以及微环境等进行了研究。他们将人乳腺癌细胞株 mcf7、 mcf7 adr、4296、 mda mb435、4143以及4151移植至裸鼠的皮下及乳腺脂肪垫，应用免疫组化及 rt pcr技术对血循环中可溶性 cd44（ scd44）及不同时间的组织标本的 cd44s（ cd44v6和 cd44v9）表达进行了检测，发现所有的肿瘤均表达 cd44s，以 mcf7瘤株表达水平最低； cd44v6及 cd44v9的顺序和抗原决定簇明显表达在 mcf1adm、 mda mb435、4134、4151及4296，而 mcf7则缺乏这些变异型 cd44；荷瘤4269的裸鼠血清 cd44v6水平最高，并具有高度的淋巴结转移趋势；56的荷瘤鼠其血清 scd44水平与肿瘤大小相关。 mcf7与 mcf7 adm的组织、血清 cd44v，多药耐药性及转移性均有显著性差异。组织 cd44的表达与肿瘤移植的部位及激素受体状态无关。表达 cd44v水平最高的瘤株4296与淋巴结转移明显相关，而不表达的 mcf7株则与转移无关。 iida和 bourguignon（11）将 cd44vcdna转染入含内源性 cd44s的非致瘤性人乳腺上皮细胞（ hbl100），发现联合表达 cd44v和 cd44s的这些细胞改变了以下重要的生物学特性：透明质酸（ ha）介导的细胞粘附明显减少；胶原基质凝胶（ collagen matrixgel）迁移能力增加；这些细胞可产生某些血管生长因子并在无胸腺的裸鼠身上能有效地促进肿瘤发生。认为 cd44v和 cd44s的联合表达可触发乳腺癌发生的细胞转化。 kaufmann等（12）应用抗 cd44多抗血清及单克隆抗体对100例侵袭性乳腺癌，其中12例局部复发、18例淋巴结转移，以及8例正常对照组进行了检则，结果显示，正常乳腺导管上皮细胞和增生性病变组织不表达 cd44v，而大多数肿瘤组织均表达 cd44v3、 v5及 v6； cd44v6存在于84的原发肿瘤、100的腋淋巴结转移及局部复发病灶； cd44v6表达阳性者的总生存率明显差于 cd44v6表达阴性者；多变量分析表明， cd44v6是一独立于孕激素受体、淋巴结状态、肿瘤大小及分级的较好的预后指标。 guriec等（13）应用 rt pcr技术对25例正常乳腺标本、10例乳腺纤维瘤、8例囊性病变及52例乳腺癌的 cd4v6表达进行了研究，发现 cd44v6的表达阳性与否与无转移患者的总生存率显著相关（ p0.0032）， cd44v6表达阴性者，其生存期显著高于 cd44v6表达阳性者。但也有研究发现，在 t1期乳腺侵润性导管癌（ idc）中， cd44v6表达与淋巴结是否有转移均无显著性差异，因而认为 cd44v6的表达与 t1期 idc的淋巴结是否转移无相关性（14）。 tokue等（15）应用免疫组化和 rt pcr两种方法检测了95例乳腺癌标本中 cd44的表达。 rt pcr检测发现， cd44v2mrna高表达者总生存率明显高于 cd44v2低表达者（ p0.05），但 cd44vmrna表达与总生存率无显著相关性（ p0.06）；应用免疫组化法结果也证实， cd44v2表达与总生存率显著相关（ p0.02），而 cd44v6表达与生存率无显著相关（ p0.67），因而他们认为检测 cd44v2的表达可能比 cd44v6更具有临床价值。 然而，也有一些研究不支持上述的观点， friedrichs等（16）利用免疫组化技术检测了119例淋巴结阳性和108例淋巴结阴性的乳腺癌 cd44表达情况，并对其中43例高危病人应用 rt pcr进行了检测。经对 cd44的表达与患者生存期及临床危险因素的相关性进行了统计分析，认为乳腺癌 cd44s、 cd44v6及 cd44v9与肿瘤细胞分化程度相关，与患者的预后无关。 delatorre等（17）应用单克隆抗体 a3d8对52例未经治疗的乳腺癌及10例正常乳腺组织 cd44的表达进行了检测，结果亦不支持 cd44的表达与预后或淋巴结转移具有相关性。 regidor等（18）对81例侵袭性乳腺癌是否表达粘附分子 cd44v6及 cd44v45，应用免疫组化方法进行了检测。结果显示68例乳腺癌的 cd44v6及 cd44v45阳性； t3及 t4癌的&nbs p;cd44阳性率显著高于 t1和 t2癌（ p0.05；同时发现 cd44的表达与雌激素受体及组织蛋白酶 d（ cathepsin d）明显相关，但与淋巴结状态、有否远处转移、肿瘤分级、孕激素受体及月经情况无关。 heffer等（19）利用 elisa方法检测了90例乳腺癌，9例纤维腺瘤以及22例正常对照组，发现 cd44含量与临床危险因素无明显相关，单因素和多因素分析结果表明， cd44v5和 cd44v6含量与预后生存不相关（ p0.16和 p0.08）。 jansen等（20）应用免疫组化方法对338例乳腺癌 cd44v6的表达进行了检测，结果发现，219例乳癌（64.8） cd44v6阳性。但 cd44v6表达与临床危险因素，总生存率无关。因此认为 cd44v6不是乳腺癌预后的指标。 3结语 虽然目前对 cd44基因的研究仍很粗浅，确切的功能及影响转移的机理尚未被认识，对其进一步研究无疑将有助于阐明恶性肿瘤转移和侵袭的机制，从而为临床对恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断、治疗选择以及预后预测提供更充分的理论依据。 参考文献 1 stamenkovici， amiotm， ppesandojm etal.aiymphocytemoleculeimplicatedinlymphnodehomingisamemberofthecartilagelinkproteinfamily.cell 1989；56：1057 2 screatongr， bellmv， jacksondg， c natl acad sci usa 1992；89：12160 3 haynesbf， liaohx， pattonkl.thetrans-memberanehyaluronatereceptor（ cd44）： mul-tiplefunctionsmultipleforms.cancercells1991；3：347 4 arch r， wirthk， hofmannm， 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