第十五章制剂分析

第十八章制剂分析 第一节药物制剂分析的特点 为了防治和诊断疾病的需要 为了保证药物用法和用量的准确 为了增强药物的稳定性 为了药物使用 贮存和运输的方便 为了延长药物的生物利用度 为了降低药物的毒性和副作用 中国药典 2010年版 二部 21种 片剂注射剂酊剂栓剂胶囊剂软膏剂眼用制剂丸剂植入剂糖浆剂气雾剂膜剂颗粒剂口服溶液剂散剂耳用制剂鼻用制剂凝胶剂洗剂搽剂贴剂 利用物理 化学或生物测定方法对不同剂型的药物进行检验分析 以确定其是否符合质量标准 一 定义 符合质量标准的原料药 赋形剂 稀释剂 附加剂 稳定剂 防腐剂 着色剂 不同制剂 2 检验项目和要求不同 1 鉴别试验不完全相同药物制剂的鉴别可以参考原料药的鉴别方法 若附加剂不干扰鉴别试验 可采用与原料药相同的方法鉴别 如果附加剂对鉴别试验有干扰 则不能使用 如 IR通常只用于原料药的鉴别 而不能用于制剂的鉴别 例 VitC 原料制剂 片 性状 熔点 比旋度外观颜色 鉴别 化学法 IR化学法 检查 溶液的澄清度与颜色溶液的颜色炽灼残渣重量差异铁 铜 重金属崩解时限 含量测定 碘量法碘量法 一般原料药项下的检查项目不需重复检查 只检查在制备和储运过程中产生的杂质及制剂相应的检查项目 如 盐酸普鲁卡因注射液 对氨基苯甲酸 阿司匹林片 水杨酸 杂质检查的项目不同 阿司匹林 水杨酸 0 1 阿司匹林片 水杨酸 0 3 杂质限量的要求不同 对于相同的杂质 对于原料药的限量要求要比制剂高 如 片剂需要检查重量差异和崩解时限等 制剂需要进行 制剂通则 的有关检查 制剂质量标准的检查项下 除对杂质进行检查外 还需检查是否符合剂型方面的有关规定 3 含量测定的方法不完全相同 1 干扰组分多 要求方法具有一定的专属性 附加成份赋形剂 稳定剂 稀释剂 抗氧剂 防腐剂 着色剂 调味剂 盐酸氯丙嗪 含量测定 原料 非水滴定法片剂 UV法 测254nm 注射剂 UV法 测306nm 2 主要成分含量低 要求方法具有一定的灵敏度 3 含量测定的方法不完全相同 制剂含量测定 强调选择性 要求灵敏度高原料含量测定 强调准确度 精密度 选择原则 3 含量表示方法及合格范围不同 标示量的 阿司匹林 99 095 0 105 0VitB1 99 0 干燥品 90 0 110 0VitC 99 093 0 107 0肌苷98 0 102 0 干 93 0 107 0红霉素 920单位 g90 0 110 0 片剂 原料 4 含量测定结果的计算方法不同 原料药 片剂 原料药含量测定结果的计算 1 容量分析法 1 直接滴定法 2 剩余滴定法 T 滴定度 每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 V 滴定时 供试品消耗滴定液的体积 ml V0 滴定时 空白消耗滴定液的体积 ml F 浓度校正因子 ms 供试品的质量 例 非那西丁含量测定 精密称取本品0 3630g加稀盐酸回流1小时后 放冷 用亚硝酸钠液 0 1010mol L 滴定 用去20 00m1 每1ml亚硝酸钠液 0 1mol L 相当于17 92mg的C10H13O2N 计算非那西丁的含量为 E A 95 55 B 96 55 C 97 55 D 98 55 E 99 72 例 精密称取青霉素钾供试品0 4021g 按药典规定用剩余碱量法测定含量 先加入氢氧化钠液 0 1mol L 25 00ml 回滴时消0 1015mol l的盐酸液14 20ml 空白试验消耗0 1015mol l的盐酸液24 68ml 求供试品的含量 每1ml氢氧化钠液 0 1mol L 相当于37 25mg的青霉素钾 2 紫外分光光度法 1 吸收系数法 2 对照法 例 对乙酰氨基酚的含量测定方法为 取本品约40mg 精密称定 置250ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液50ml溶解后 加水至刻度 摇匀 精密量取5ml 置100ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液10m1 加水至刻度 摇匀 照分光光度法 在257nm的波长处测定吸收度 按C8H9NO2的吸收系数 为715计算 即得 若样品称样量为m g 测得的吸收度为A 则含量百分率的计算式为 A A B C D E 例 利血平的含量测定方法为 对照品溶液的制备精密称取利血平对照品20mg 置100ml量瓶中 加氯仿4ml使溶解 用无水乙醇稀释至刻度 摇匀 精密量取5m1 置50ml量瓶中 加无水乙醇稀释至刻度 摇匀 即得 供试品溶液的制备精密称取本品0 0205g 照对照品溶液同法制备 测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各5ml 各加硫酸滴定液 0 25mol L 1 0ml与新制的0 3 亚硝酸钠溶液1 0ml 摇匀 置55 水浴中加热30分钟 冷却后 各加新制的5 氨基磺酸铵溶液0 5ml 用无水乙醇稀释至刻度 摇匀 另取对照品溶液与供试品溶液各5ml 除不加0 3 亚硝酸钠溶液外 分别用同一方法处理后作为各自相应的空白 照分光光度法 在390 2nm的波长处分别测定吸收度 供试品溶液的吸收度为0 604 对照品溶液的吸收度为0 594 计算利血平的百分含量 片剂含量测定结果的计算 1 容量分析法 1 直接滴定法 2 剩余滴定法 2 紫外分光光度法 1 吸收系数法 2 对照法 例 取司可巴比妥钠胶囊 标示量为0 1g 20粒 除去胶囊后测得内容物总重为3 0780g 称取0 1536g 按药典规定用溴量法测定 加入溴液 0 1mol L 25ml 剩余的溴液用硫代硫酸钠液 0 1025mol L 滴定到终点时 用去17 94ml 空白试验用去硫代硫酸钠液25 00ml 按每1ml溴液 0 1mol L 相当13 01mg的司可巴比妥钠 计算该胶囊中按标示量表示的百分含量 注射液含量测定结果的计算 1 容量分析法 1 直接滴定法 2 剩余滴定法 Vs 供试品的体积 ml 2 紫外分光光度法 1 吸收系数法 2 对照法 例 中国药典 1990年版 规定维生素B12注射液规格为0 1mg m1 含量测定如下 精密量取本品7 5m1 置25ml量瓶中 加蒸馏水稀释至刻度 混匀 置lcm石英池中 以蒸馏水为空白 在361 1nm波长处吸收度为0 593 按为207计算维生素B12按标示量计算的百分含量为 C A 90 B 92 5 C 95 5 D 97 5 E 99 5 例 用异烟肼比色法测定复方己酸孕酮注射液的含量 当己酸孕酮对照品的浓度为50 g ml 按中国药典规定显色后在380nm波长处测得吸收度为0 160 取标示量为250mg ml 己酸孕酮 的供试品2ml配成100ml溶液 再稀释100倍后 按对照品显色法同样显色 测得吸收度为0 154 求供试品中己酸孕酮的含量为标示量的多少 例 维生素C注射液 规格2ml 0 1g 的含量测定 精密量取本品2ml 加水15ml与丙酮2ml 摇匀 放置5分钟 加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml 用碘滴定液 0 1003mol L 滴定 至溶液显兰色并持续30秒钟不褪 消耗10 56ml 每1ml碘滴定液 0 1mol L 相当于8 806mg的C6H8O6 计算维生素C注射液的标示量 制剂含量测定应注意的问题 1 取样问题2 辅料对含量测定的干扰与排除3 复方制剂中各成分互相干扰其含量测定及措施4 分析方法准确度的问题5 制剂的质量控制问题 片剂检查基本步骤首先进行外观色泽 嗅 味等物理性状的检查 然后进行鉴别试验 再进行常规检查及杂质检查 还要进行细菌数 霉菌数及活螨的检查 最后进行含量测定 第二节片剂与注射剂的分析 注射剂基本步骤首先观察注射剂的色泽和澄明度 并作裂缝一渗透压检查 再进行鉴别试验 PH值检查 常规检查和杂质检查及含量测定 片剂是指药物与适宜的辅料通过制剂技术压制而成的片状或异形片状的制剂 要求外观完整光洁 色泽均匀 并具有适度的硬度 例 取一定量片剂 铺在白色板 或纸 上 在规定光源 光线与片剂的距离下用眼睛观察 检查色泽 黑点 色斑 麻点 坑 缺角 裂缝 花斑 油污等 进行程度和数量的登记 素片 药典附录 定义每片重量与平均重量之差异 糖衣片 薄膜衣片应包衣前检查 3 规定超出限度片 2片超出限度1倍片 0片 2 方法 与标示片重比较 与平均片重比较 每片重量 药典附录 用崩解仪测定 定义固体制剂在规定的介质中崩解溶散至 2mm的碎粒 或溶化 软化 所需时间的限度 崩解仪与自动脆碎度测定仪 素片 15 薄膜衣片 30 糖衣片 60 肠溶衣片 120 完整 盐酸液 60 崩解 缓冲液 1 规定 37 泡腾片 5 15 25 2 方法 不合格时另取6片复试 同时测定 片 6 崩解仪如图 二 注射剂 液体制剂 药典附录 用干燥注射器抽取检查每支注射液的装量均不得少于其标示量 液体制剂 1 灯检法 用伞棚式装置检查 人工 2 光散射法 用仪器检查 1 直接接种法 适用于对检查无影响的供试品 2 薄膜过滤法 适用于对检查有影响的供试品 5 热原检查热原是指药品中含有的能引起体温升高的杂质 家兔法 6 细菌内毒素检查 1 凝胶法 鲎试剂 2 光度测定法7 不溶性微粒 1 显微计数法 2 光阻法 二 片剂含量均匀度和溶出度检查 一 含量均匀度检查 小剂量或单剂量的固体制剂 半固体制剂和非均相液体制剂等每片 个 含量符合标示量的程度 除另有规定外 片剂 胶囊剂或注射用无菌粉末 每片 个 标示量不大于10mg或主药含量小于每片 个 重量5 者 其他制剂 每个标示量小于2mg或主药含量小于每个重量2 者 贴剂 均应检查含量均匀度 凡检查此项的制剂不再检查重量差异 2 方法与计算 用规定的含量测定方法分别测定10片 个 药物 计算每片 个 的含量Xi 然后计算A 1 8S S 标准差 计量型方案 二次抽检法 以标示量为参照值 1 含量均匀度测定法与含量测定法相同 2 含量均匀度测定法与含量测定法不同 3 判断标准 1 A 1 80S 15 0 另取20片复试 按30片计 A 1 45S 15 0 若改变限度 则改15 0 符合规定 不符合规定 符合规定 2 A S 15 0 3 A 1 80S 15 0 且A S 15 0 二 溶出度的测定 溶出度是指药物从片剂等固体制剂在规定的溶剂中溶出的速率和程度 是一种模拟口服固体制剂在胃肠道里的崩解和溶出情况的体外试验法 主要用于难以溶解的药物 凡检查溶出度的制剂 不再进行崩解时限的检查 2 方法 3 计算 每片 个 溶出量相当于标示量的 第一法转篮法第二法搅拌桨法第三法小杯搅拌桨法 4 判断标准 1 6片的溶出量均 Q 符合规定 2 Q 仅1片 Q 10 平均溶出量 Q 3 仅1片 Q 10 另取6片复试 12片中仅2片 Q 10 平均溶出量 Q 第一法转篮法 转篮分篮体与篮轴两部分 均为不锈钢金属材料制成 转篮旋转时 摆动幅度不得超过 1 0mm 仪器装置 仪器装置 第一法转篮法 除另有规定外 量取经脱气处理的溶剂900ml 注入每个操作容器内 加温使溶剂温度保持在37 0 5 调整转速使其稳定 取供试品6片 个 分别投入6个转篮内 将转篮降入容器中 立即开始计时 除另有规定外 至45分钟时 在规定取样点吸取溶液适量 立即经不大于0 8 m微孔滤膜滤过 自取样至滤过应在30秒钟内完成 取滤液 照各药品项下规定的方法测定 算出每片 个 的溶出量 由不锈钢金属材料制成 旋转时摆动幅度A B不得超过 0 5mm 第二法搅拌桨法 仪器装置 同第一法 取供试品6片 个 分别投入6个操作容器内 立即启动旋转并开始计时 其它同第一法测定 用于胶囊剂测定时 如胶囊上浮 可用一小段耐腐蚀的金属线轻绕于胶囊外壳或装入沉降篮 呈圆柱形 内径为12mm 长25mm 由10根不锈钢丝 丝径为1mm 0 1mm 焊接而成 周围以间隔为3 5mm的不锈钢丝螺旋缠绕 上下两端以2根不锈钢丝十字形固定 一端可开关 测定法 第二法搅拌桨法 除另有规定外 量取经脱气处理的溶剂100 250ml注入每个操作容器内 以下操作同第二法 第三法小杯搅拌桨法 仪器装置 测定法 检查 溶出度取本品 照溶出度测定法 附录 C第一法 以盐酸溶液 9 1000 1000ml为溶剂 转速为每分钟100转 依法操作 经30分钟时 取溶液10ml 滤过 精密量取续滤液适量 用上述溶剂定量稀释制成每1ml中约含5 g的溶液 摇匀 照分光光度法 附录 A 在240nm的波长处测定吸收度 另精密称取经105 干燥至恒重的氯氮平对照品适量 用上述溶剂定量稀释制成每1ml中约含5 g的溶液 同法测定吸收度 计算出每片的溶出量 限度为标示量的80 应符合规定 规格 1 25mg 2 50mg 氯氮平片 一 用于缓释和控释制剂的测定在三个时间点取样测定二 用于肠溶制剂先测定酸中释放量 再测定在磷酸盐缓冲液 pH6 8 为介质中的释放量 三 用于透皮贴剂 释放度有三种测定方法 释放度 定义 释放度是指口服药物从缓释制剂 控释制剂 肠溶制剂以及透皮贴剂等在规定溶剂中释放的速率和程度 检查释放度的制剂 也不再进行崩解时限的检查 第三节片剂和注射剂的含量测定 一 常见干扰及排除方法 制剂附加剂可能会对药物的测定与检查造成影响 发生影响时应予排除 固体制剂附加剂 稀释剂 润滑剂 崩解剂等 注射剂附加剂 助溶剂 抗氧剂 等渗调节剂等 一 糖类 淀粉 糊精 蔗糖 乳糖等 是固体制剂的稀释剂 具有还原性 干扰氧化还原滴定 如 高锰酸钾法 溴酸钾法等 排除改用氧化电位稍低的氧化剂 硫酸亚铁高锰酸钾滴定法硫酸亚铁片硫酸铈滴定法 例 FeSO4原料药 采用KMnO4法 含量测定 取本品约0 5g 精密称定 加稀硫酸与新沸过的冷水各15ml溶解后 立即用高锰酸钾滴定液 0 02mol L 滴定至溶液显持续的粉红色 每1ml高锰酸钾滴定液 0 02mol L 相当于27 80mg的FeSO4 7H2O FeSO4片剂 为糖衣片 规格 0 3g采用铈量法 含量测定 取本品10片 置200ml量瓶中 加稀硫酸60ml与新沸过的冷水适量 振摇使硫酸亚铁溶解 用新沸过的冷水稀释至刻度 摇匀 用干燥滤纸迅速滤过 精密量取续滤液30ml 加邻二氮菲指示液数滴 立即用硫酸铈滴定液 0 1mol L 滴定 每1ml硫酸铈滴定液 0 1mol L 相当于27 80mg的FeSO4 7H2O 二 硬脂酸镁 固体制剂的润滑剂 以硬脂酸镁 C36H70O4Mg 和棕榈酸镁 C32H62O4Mg 为主的混合物 1 干扰配位滴定法 OH 排除 1 掩蔽法以硫酸奎宁片的含量测定为例 测定原理 掩蔽 除去Mg2 干扰 释放 Al3 5 6二甲酚橙Bi3 2 3儿茶酚紫Mg2 9 7 12络黑T 2 改变pH或指示剂 2 干扰非水溶液滴定法 排除 2 提取分离法 3 UV法 硬脂酸镁无UV吸收 4 蒸馏法 原料药片剂 盐酸吗啡非水滴定UV盐酸氯丙嗪非水滴定UV 滑石粉 淀粉 磷酸氢钙 硫酸钙等 四 抗氧剂具有还原性药物的注射剂中常加抗氧剂 抗氧剂 亚硫酸钠 亚硫酸氢钠 焦亚硫酸钠 硫代硫酸钠及维生素C等 对氧化还原滴定有干扰 碘量法溴量法铈量法亚硝酸钠法 四 抗氧剂 NaHSO3 CH3COCH3 CH3 2C OH SO3Na碘量法测定维生素C注射液 Na2S2O5 H2O 2NaHSO3NaHSO3 HCHO HO CH2 SO3Na碘量法测定安乃静注射液 但是 甲醛也具有还原性 氧化电位高时不宜 亚硫酸钠 亚硫酸氢钠 焦亚硫酸钠加入丙酮 或甲醛消除 1 加掩蔽剂 四 抗氧剂 1 加掩蔽剂 四 抗氧剂 1 加掩蔽剂 注甲醛亦是还原剂 其作掩蔽剂时 宜选氧化电位低的氧化剂测定药物 规格 1 1ml 0 25g 2 2ml 0 5g 含量测定 精密量取本品10ml 置100ml量瓶中 加乙醇80ml 再加水稀释至刻度 摇匀 立即精密量取10ml 置锥形瓶中 加乙醇2ml 水6 5ml与甲醛溶液0 5ml 放置1分钟 加盐酸溶液 9 1000 1 0ml 摇匀 用碘滴定液 0 1mol L 滴定 控制滴定速度为每分钟3 5ml 至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪 每1ml碘滴定液 0 1mol L 相当于17 57mg的C13H16N3NaO4S H2O 安乃近注射液MetamizoleSodiumInjection 2 加酸分解消除 亚硫酸钠 亚硫酸氢钠 焦亚硫酸钠均可被酸分解 加热逸出SO2 Na2S2O3 2HCl 2NaCl H2S2O3 加热 NaHSO3 HCl NaCl H2SO3 加热 SO2 H2O SO2 H2O 本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液 规格 1 1ml 0 1g 2 2ml 0 2g 3 5ml 0 5g 4 10ml 1g 含量测定 精密量取本品5ml 加水40ml与盐酸溶液 1 2 10ml 迅速煮沸 立即冷却至室温 照永停滴定法 附录 A 用亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 每1ml亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 相当于27 18mg的C13H21N3O HCl 盐酸普鲁卡因胺注射液ProcainamideHydrochlorideInjection 过氧化氢和硝酸 将抗氧剂 亚硫酸盐等 氧化 而不氧化的被测药物 不消耗滴定液 Na2SO3 H2O2 Na2SO4 H2O Na2SO3 2HNO3 Na2SO4 2NO2 H2O 3 加弱氧化剂氧化消除 4 UV吸收谱差消除干扰 例 VitC 4 UV吸收谱差消除干扰 盐酸异丙嗪注射液 规格 2ml 50mg本品为盐酸异丙嗪的灭菌水溶液 本品可加有适量的维生素C 0 01mol LHCl中UV最大吸收243nm 吸收系数 为545 585 含量测定 精密量取本品2ml 置100ml量瓶中 用盐酸溶液 9 1000 稀释至刻度 摇匀 精密量取10ml 置另一100ml量瓶中 用水稀释至刻度 摇匀 照分光光度法 附录 A 在299nm的波长处测定吸收度 按C17H20N2S HCl的吸收系数 为108计算 即得 4 UV吸收谱差消除干扰 盐酸氯丙嗪ChlorpromazineHydrochlorideUV取本品 加盐酸溶液 9 1000 制成每1ml中含5 g的溶液 照分光光度法 附录 A 测定 在254nm与306nm的波长处有最大吸收 在254nm的波长处吸收度约为0 46 盐酸氯丙嗪注射液本品为盐酸氯丙嗪的灭菌水溶液 含量测定 避光操作 精密量取本品适量 约相当于盐酸氯丙嗪50mg 置250ml量瓶中 加盐酸溶液 9 1000 至刻度 摇匀 精密量取10ml 置50ml量瓶中 加盐酸溶液 9 1000 至刻度 摇匀 照分光光度法 附录 A 在306nm的波长处测定吸收度 按C17H19ClN2S HCl的吸收系数 为115计算 即得 规格 1 1ml 10mg 2 1ml 25mg 3 2ml 50mg 盐酸氯丙嗪片 性状 本品为糖衣片 除去糖衣后显白色 含量测定 避光操作 取本品10片 除去糖衣后 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于盐酸氯丙嗪10mg 置100ml量瓶中 加盐酸溶液 9 1000 70ml 振摇使盐酸氯丙嗪溶解 用同一溶剂稀释至刻度 摇匀 滤过 精密量取续滤液5ml 置另一100ml量瓶中 加同一溶剂稀释至刻度 摇匀 照分光光度法 附录 A 在254nm的波长处测定吸收度 按C17H19ClN2S HCl的吸收系数 为915计算 即得 ChlorpromazineHydrochlorideTablets 规格 1 25mg 2 50mg 甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液 USP MenadiolSodiumInjection本品为灭菌水溶液 含苯甲酸 或苯酚抑菌剂 及焦亚硫酸钠 5 萃取分离后UV测定 含量测定 精密移取本品适量 用0 1mol L盐酸稀释配制为每1ml含甲萘氢醌二磷酸酯钠50 g的溶液 取上述溶液10ml置于60ml分液漏斗中 用15ml三氯甲烷提取三次 弃去有机层 取水层离心分离后作为供试液 于290nm处测定其吸收值A290nm 另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定 按计算含量 即得 四 溶剂油脂溶解性药物 甾体激素等 常配制成油溶液 溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响 溶液浑浊 影响UV测定 容量滴定 HPLC测定 1 有机溶剂稀释法药物标示量高 稀释倍数大或测定溶剂对油溶解性好 溶剂油对测定无干扰 维生素E注射液VitaminEInjection本品为维生素E的灭菌油溶液 含量测定 精密量取本品2ml 置棕色具塞锥形瓶中 照维生素E项下的方法 精密加入内标溶液50ml 密塞 摇匀 取1 3 l注入气相色谱仪 并依法测定校正因子 计算 即得 规格 1ml 50mg维生素E 含量测定 照气相色谱法 附录 E 测定 取正三十二烷适量 加正己烷溶解并稀释成每1ml中含1 0mg的溶液 摇匀 作为内标溶液 测定法取本品约20mg 精密称定 置棕色具塞锥形瓶中 精密加入内标溶液10ml 密塞 振摇使溶解 取1 3 l注入气相色谱仪 测定 计算 即得 复方己酸羟孕酮注射液CompoundHydroxyprogesteroneCaproateInjection本品为己酸羟孕酮和戊酸雌二醇的灭菌油溶液 含量测定 照高效液相色谱法 附录 D 测定 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 甲醇 水 85 15 为流动相 流速每分钟0 7ml 检测波长为225nm 测定法用内容量移液管精密量取本品1 0ml 置25ml量瓶中 加甲醇溶解并稀释至刻度 摇匀 精密量取1 0ml 置10ml量瓶中 加甲醇稀释至刻度 摇匀 作为戊酸雌二醇供试品溶液 精密量取1 0ml 置50ml量瓶中 加甲醇稀释至刻度 摇匀 作为己酸羟孕酮供试品溶液 取此两种供试品溶液各10 l 分别注入高效液相色谱仪 记录色谱图 量取峰面积 依法测定 计算 即得 规格 1ml 己酸羟孕酮250mg与戊酸雌二醇5mg 2 溶剂提取 HPLC法用适当溶剂提取 部分分离后测定 如 苯丙酸诺龙 黄体酮 丙酸睾酮等注射液丙酸睾酮注射液TestosteronePropionateInjection本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液 含量测定 HPLC测定 ODS柱 甲醇 水 70 30 流动相 检测波长254nm 柱效和分离度应符合要求 内标溶液的制备取苯丙酸诺龙约40mg 精密称定 置25ml量瓶中 甲醇溶解并稀释至刻度 摇匀 即得 测定法用内容量移液管精密量取本品适量 约相当于丙酸睾酮50mg 置50ml量瓶中 用乙醚分数次洗涤移液管内壁 洗液并入量瓶中 加乙醚稀释至刻度 摇匀 精密量取5ml置具塞离心管中 在温水浴内使乙醚挥散 用甲醇振摇提取4次 第1 3次各5ml 第4次3ml 每次振摇10分钟后离心15分钟 并用滴管将甲醇液移置25ml量瓶中 合并提取液 精密加入内标溶液5ml 用甲醇稀释至刻度 摇匀 取5 10 l注入液相色谱仪 测定 即得 规格 1 1ml 10mg 2 1ml 25mg 3 1ml 50mg 本品为罂粟科植物罂粟PapaversomniferumL 的未成熟蒴果被划破后渗出的乳状液经干燥制成 含吗啡按无水吗啡 C17H19NO3 计算 不得少于9 5 由于样品组成复杂 用固相萃取法 SPE 对供试品进行预处理后 离子对 HPLC分析 含量测定 照高效液相色谱法 附录 D 测定 色谱条件与系统适用性试验用辛基硅烷键合硅胶为填充剂 0 05mol L磷酸二氢钾溶液 0 005mol L庚烷磺酸钠溶液 乙腈 5 5 2 为流动相 检测波长为220nm 理论板数按吗啡峰计算应不低于1000 2 阿片Opium中吗啡的含量测定 3 柱分配色谱法 测定法 SPE柱准备 取以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的固相小柱一支 加甲醇 水 3 1 混合溶液浸泡约20分钟后 依次加混合溶液10ml和水5ml各冲洗一次 用pH 9的氨试液冲洗至流出液pH 9 碱性 待用 供试品溶液的制备 取本品约5g 研细 过五号筛 精密称取约1g 置200ml量瓶中 加5 醋酸溶液适量 超声处理30分钟 取出 放冷 用5 醋酸溶液稀释至刻度 摇匀 滤过 精密量取续滤液0 5ml 置上述固相柱上 加氨溶液 1 2 2滴 调pH 9 摇匀 碱化供试液上SPE柱 待溶剂滴尽后 用水20ml冲洗 加含20 甲醇的5 醋酸溶液洗脱 收集洗脱液5 0ml 摇匀 精密吸取洗脱液10 l 注入液相色谱仪 记录色谱图 另精密称取在105 干燥2小时的吗啡对照品 用含10 甲醇的5 醋酸溶液配制成每1ml约含吗啡0 15mg的溶液 取10 l注入液相色谱仪 记录色谱图 按外标法以峰面积计算 即得 第四节复方制剂分析Assayofcompoundpreparations 复方制剂 含有2个或2个以上药物成分的制剂 分析特点 不仅要考虑制剂附加剂对测定的影响 同时要考虑药物成分之间的相互影响 选定测定方法后 各成分的测定相互不干扰 则不须分离 直接测定 各成分的测定相互干扰 须分离后分别测定 测定方法选择原则 在确保专属 准确 灵敏的情况下 尽量选择简便 易行 经典的方法 一 不经分离直接测定法 一 在不同条件下采用同一种测定法例 复方氢氧化铝片的含量测定处方 氧化铝245g三硅酸镁105g颠茄流浸膏2 6ml制成1000片 氧化铝取本品10片 精密称定 研细 精密称取适量 加盐酸2ml与水50ml 煮沸 放冷 滤过 残渣用水洗涤 合并滤液与洗液 滴加氨试液至恰析出沉淀 再滴加盐酸 使沉淀恰溶解 加醋酸 醋酸铵缓冲液 pH6 0 10ml 精密加EDTA 2Na滴定液25ml 煮沸10min 放冷 加二甲酚橙指示液 用锌滴定液滴定 氧化镁精密称取上述细粉适量 加盐酸2ml与水50ml 加热煮沸 加甲基红指示液1滴 滴加氨试液至黄色 再继续煮沸5min 趁热过滤 残渣用2 氯化铵30ml洗涤 合并滤液与洗液 放冷 加氨试液10ml与三乙醇胺5ml 加络黑T指示液 用EDTA 2Na滴定液滴定 M YMY KMY Al3 KMY16 11 Mg2 KMY8 64 pH4 5时 EDTA 2Na只滴定