生化实验试题.doc

改良Lowry氏法测定蛋白质含量，醋纤膜电泳及凝胶层析分离蛋白质和SDS-PAGE三个实验属于蛋白质的内容，琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制和检测谷丙转氨酶活性属于酶的部分，观察激素对家兔血糖浓度的影响涉及信号转导和糖代谢章节的知识，质粒抽提、核酸电泳及PCR属于分子生物学的范畴。一、 选择题1本学期所做的聚丙烯酰胺凝胶电泳实验主要用来分离（ ）A核酸 B甘油三酯 C糖 D蛋白质2有关琥珀酸脱氢酶竞争性抑制实验的论述，错误的是（ ）A抑制剂结构与底物相似 B抑制剂与酶的活性中心相结合 C抑制剂与酶的结合是可逆的 D抑制程度只与抑制剂的浓度有关 3某学生用100ul可调微量移液器吸取68ul溶液，应该将此微量移液器刻度调为（ ）A. 068.0 B. 032.0 C. 680.0 D. 006.84用Sephadex G-50分离血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶的层析方法称( )A离子交换层析 B凝胶层析 C亲和层析 D高效液相层析5在琼脂糖凝胶电泳中，使核酸在紫外透射仪下显色的是（ ）A氨基黑 B溴酚蓝 C溴化乙锭 D考马斯亮蓝6醋酸纤维素薄膜分离血清蛋白质时，各血清蛋白的泳动速率从小到大依次是（ ）A 1， 2，albumin， globin Balbumin， 1， 2， globinC globin ， 2， 1，albumin D globin， 1， 2，albumin7有关标准曲线法的描述，错误的是 （ ）A需要配制较多的标准管B待测管吸光度范围0.05-1.0 为宜C标准管与待测管的测定应在相同条件D所作标准曲线可供长期使用8一个基本的PCR反应体系应该包括（）A模板，DNA-pol II，PCR Buffer，Mg2+，primase，dNTPS，水B模板，Taq酶，PCR Buffer，Ca2+，primers，dNTPS，去离子水C模板，DNA-pol II，PCR Buffer，Ca2+，primase，dNTPS，去离子水D模板，Taq酶，PCR Buffer，Mg2+，primers，dNTPS，去离子水9对蛋白质定量的方法不包括（ ）A凯氏定氮法 B改良Lowry氏法 C抽提法 D紫外吸收10用分光光度法进行定量分析时，基本计算公式是（ ）A待测液浓度=（标准液吸光度/待测液吸光度）标准液浓度B待测液浓度=（待测液吸光度/标准液吸光度）标准液浓度二、填空题1制备聚丙烯酰胺凝胶时催化剂是 TEMED 、引发剂是 过硫酸铵（AP） 。2PCR可在体外对目的基因进行高效、快速、特异的扩增，它的每个循环包括三个步骤，分别是变性_、_退火_、_延伸_。3琥珀酸脱氢酶竞争性抑制过程中，加入液体石蜡的作用是 防止还原型甲烯蓝氧化 ，实验中使用的抑制剂是 丙二酸 。4ALT或GPT缩写代表 谷丙转氨酶 酶，催化的反应是 。血清中ALT（GPT）活性单位的定义是：每毫升血清在pH7.4，37保温条件下与底物作用30min后，每生成_2.5_g的丙酮酸为1个谷-丙转氨酶活性单位。5 分光光度计使用完毕时，为了延长仪器的使用寿命，滑杆应该放在光源对准_1档和2档交界处_休息态_的位置。6PCR总反应体系的体积是50l，其中10buffer加量应为_5_l。7酵母核酸定量中，总磷管需要进行 反应，将有机磷转变为 ，反应需要用的重要试剂是 ，试剂酒精灯加热反应过程经历颜色变化为 。8用离心机离心前，必须将装有样品的离心管_配平_，并_对称_放置于离心机的离心平台上，然后盖好上盖，才能开启电源。9激素对家兔血糖浓度的影响实验中，升高血糖的激素是 肾上腺素 ，降低血糖的激素是 胰岛素 。三、判断题1. 蛋白质在小于等电点的pH溶液中，带负电，电泳时向正极移动。（ F ）2. Lambert-Beer定律公式为A=KcL，其中K为消光系数，表示物质对光线吸收的能力。（T）3. 酵母核酸提取实验中，甲苯的作用是使蛋白质变性。（ ）4. 聚合酶链式反应（PCR）必需明确待扩增基因片段的全部序列。（ ）5. 琼脂糖电泳分离核酸时（pH7.4），核酸样品应点在负极端。（ T ）6. 血糖测定实验中，兔血经加抗凝剂离心后所得到的上清液是血清。（ F ）四、简答题1简要叙述分光光度计使用方法。开机，调至要使用的波长，预热20min将待比溶液倒至比色杯中，高度为2/3-4/5，手拿毛面，朝向自己，放入样品室调至T档，拉杆拉至0档（空白管），调节T=100%拉杆拉至1档，调节T=0调至A档，拉杆拉至2,3。档，读取标准液、待测液的吸光度取出后关机2. 简述改良Mohum法测定谷丙转氨酶GPT活性实验中对照管的作用？五、实验计算题1. 采用邻甲苯胺法测定血糖浓度。葡萄糖标准液（0.4 mg/ml）取0.5ml，待测血浆取0.1ml。邻甲苯胺显色（反应总体积均为7ml）后，620nm波长比色，以空