CN105028481A防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用

CN105028481A防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号xx10449021.6 (22)申请日xx.07.28A01N61/02(xx.01)A01P1/00(xx.01)A01P17/00(xx.01)A01P21/00(xx.01)A01N31/16(xx.01) (71)申请人河南农业大学地址450002河南省郑州市金水区农业路63号 (72)发明人叶协锋薛延丰于晓娜程昌新王勇马浩刘忠代先强董石飞李伟 (74)专利代理机构河南科技通律师事务所41123代理人樊羿 (54)发明名称防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用 (57)摘要本发明涉及防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用，旨在解决烟草花叶病毒病难以防治及防治成本高、易污染环境的技术问题。 所述生物制剂由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为10300:1；其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚145%，乳化剂225%，氮酮0.115%，酒精1060%，水185%。 本发明提供了一种集抗菌、控制、修复于一体的多功效新型环境友好制剂，防治烟草花叶病毒病效果好、无抗药性，具有十分广阔的应用前景。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书4页105028481Axx.11.11105028481A1/1页21.防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为10300:1；其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚145%，乳化剂225%，氮酮0.115%，酒精1060%，水185%。 2.如权利要求1所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，所述组分II的重量百分组成如下丁香酚525%，乳化剂225%，氮酮0.15%，酒精2060%，水2060%。 3.如权利要求2所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，所述组分II的重量百分组成如下丁香酚1020%，乳化剂1525%，氮酮23%，酒精4050%，水728%。 4.如权利要求1-3任一所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，组分I和组分II的体积比为50200:1。 5.如权利要求4所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，所述的矿物油为机油或柴油。 6.如权利要求4所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂，其特征在于，所述乳化剂为苯乙基酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基萘磺酸钙、蓖麻油环氧乙烷加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚、二烷基苯磺酸钙中的至少一种。 7.权利要求1-6任一所述防治烟草花叶病毒病的生物制剂的制备方法，其特征在于，先制备丁香酚溶于酒精的溶液A，再制备乳化剂以及氮酮溶于酒精的溶液B，A、B混合后加入水混合均匀获得组分II；按照比例混合组分I和组分II即得所述防治烟草花叶病毒病的生物制剂。 8.如权利要求7所述的防治烟草花叶病毒病的生物制剂的制备方法，其特征在于，用于制备溶液A和制备溶液B的酒精的比例为40703060。 9.权利要求1-6任一所述防治烟草花叶病毒病的生物制剂的应用。 权利要求书105028481A21/4页3防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用技术领域0001本发明属于农业生产中作物防病治病技术领域，具体涉及防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用。 背景技术0002我国烟草种植面积达2000多万亩，近年来，随着烟草种植面积的扩大，导致烟草花叶病毒病逐年扩展。 烟草花叶病毒（Tobao mosaicvirus；TMV），是一种单链RNA病毒，专门感染烟草及其他茄科植物，能使这些受感染的叶片看起来斑驳污损。 烟草植株染病后，幼嫩叶片侧脉及支脉组织呈半透明状，即明脉，叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。 病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。 后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形、扭曲。 烟草花叶病毒病广泛分布于我国各烟区，是烟草主要病毒病害，其中黑龙江、吉林、辽宁、山东、河南、安徽、湖北、四川、重庆、贵州、云南、福建、广东、台湾等地受害较重，危害对烟草造成的损失可达50%左右。 0003为了有效地控制植物病毒病蔓延，从根本上进行预防病毒病的发生减少损失，科研工作者采用了各种措施，其中包括轮作、种子脱毒、病毒间的弱毒株系交叉保护、抗病品种的选用、传毒介体的控制等，近年来转基因植物抗病研究也有了新的进展。 但目前对病毒病的防治主要还是依靠化学农药，如菇类蛋白多糖、菌毒清、吗啉呱乙酸铜(毒可克、病毒克绝、毒尽)、三氮唑核苷铜锌、壬基酚磺酸铜、菌毒吗啉呱、混酯酸铜等；但是，使用化学农药不仅会产生农药残留，而且随着化学农药的逐年使用病毒病的抗药性也在逐渐增加，为此菜农只能加大农药的使用量，但若过度加大用量，不仅会影响作物生长，增加果实中农药残留量，抑制土壤中有益微生物生长，而且会污染环境，增加生产成本。 0004在当前大力提倡绿色食品和环境保护的前提下，加强植物病害的综合防治和减少化学农药的使用已成为植保工作者工作的重点内容之一。 而开发研制出高效、环境友好型生物药剂也成为植保工作者研究的一个热点。 发明内容0005本发明的目的是提供防治烟草花叶病毒病的生物制剂及制备方法和应用，所述生物制剂集抗菌、控制、修复于一体，是一种环境友好型的生物制剂。 0006本发明采用的技术方案如下防治烟草花叶病毒病的生物制剂，所述生物制剂由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为10300:1；其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚145%，乳化剂225%，氮酮0.115%，酒精1060%，水185%。 0007优选的，所述组分II的重量百分组成如下丁香酚525%，乳化剂225%，氮酮0.15%，酒精2060%，水2060%。 0008更为优选的，所述组分II的重量百分组成如下丁香酚1020%，乳化剂15说明书105028481A32/4页425%，氮酮23%，酒精4050%，水728%。 0009优选的，组分I和组分II的体积比为50200:1。 0010酒精可采用体积浓度为92-99%的酒精，加入的量进行相应的换算即可。 0011优选的，所述矿物油为机油或柴油。 0012优选的，所述乳化剂为苯乙基酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基萘磺酸钙、蓖麻油环氧乙烷加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚或二烷基苯磺酸钙中的至少一种。 0013本发明还进一步提供了一种上述防治烟草花叶病毒病的生物制剂的制备方法，优选但不限于如下进行先制备丁香酚溶于酒精的溶液A，再制备乳化剂以及氮酮溶于酒精的溶液B，A、B混合后加入水混合均匀获得组分II；按照比例混合组分I和组分II即得所述防治烟草花叶病毒病的生物制剂。 混合后获得的生物制剂性能稳定，组成成分不易被氧化，各组分能协同增效，且施用后药效长，储藏期时的保质期长。 0014优选的，用于制备溶液A和制备溶液B的酒精的比例为40703060。 0015本发明制备的生物制剂为水乳剂。 0016本发明生物制剂在防治烟草花叶病毒病方面有非常好的应用。 0017本发明提供了一种矿物油与丁香酚相结合防治烟草花叶病毒病的传播与蔓延的生物制剂。 制剂中的矿物油组分，区别于现有技术中多用于作为溶剂的功能，在本发明中，利用喷洒后的矿物油在植物表面所形成的油膜，来阻止害虫的幼、若虫停落，能起到驱虫及抑制病菌侵害的作用，从而减少了杀虫剂和杀菌剂的使用；另一主要成分丁香酚植物源，实验表明对多种作物的病毒病有很好的防控效果。 本发明将矿物油与丁香酚相结合，同时对两者的使用比例进行深入的研究，使得复配的生物制剂一方面有效切断害虫对病毒病的传播，另一方面可有效修复病毒病带来的损失，使得染病的植物恢复70%以上。 具体机理如下丁香酚在氮酮、乙醇等成分的协同作用下可以提高烟草体内一系列与抗病性有关的防御酶，激发植株体内产生防卫反应，并促进了植保素、醌类物质、单宁和木质素等与抗病性有关物质的合成，提高烟草植株清除活性氧的能力，减少病毒侵染造成的代谢平衡失调，提高对病毒侵染的抵抗能力。 0018所述生物制剂防效高、见效快、药效期长，通过35次使用，可以防控整个生育期的烟草花叶病毒病的发生和蔓延；同时由于产品属于微毒不会在作物残留，故具有高效无残留优点，喷施该药剂不会产生药斑（无药害），整个生育期35次使用不会产生抗药性；使用方便，经济效益和社会效益明显，具有十分广阔的应用前景。 0019所述生物制剂原材料易得，生产工艺简单，便于推广。 0020本发明与现有技术相比，具有如下优点本发明提供了一种集抗菌、控制、修复于一体的多功效新型环境友好制剂，防治病毒病效果好、无抗药性，而且药效长、耐储藏，具有十分广阔的应用前景。 具体实施方式0021根据下述实施例，可以更好地理解本发明。 然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。 说明书105028481A43/4页50022实施例1防治烟草花叶病毒病的生物制剂，由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为150:1。 0023其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚10%，乳化剂22%，氮酮2.5%，酒精50%，余量为水。 0024乳化剂为烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯。 0025所述生物制剂的制备方法如下先将丁香酚加入部分酒精中混合均匀形成溶液A，再将乳化剂和氮酮用余量的酒精溶解形成溶液B，然后将A和B进行混合，最后用纯净水进行定容，获得组分II。 将两种组分按比例混合即得所述生物制剂。 其中，用于制备溶液A和溶液B的酒精的体积比为4:6。 0026实施例2防治烟草花叶病毒病的生物制剂，由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为200:1。 0027其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚20%，乳化剂25%，氮酮3%，酒精45%，余量为水。 0028乳化剂为苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚与芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯按重量比为11的混合物。 0029所述生物制剂的制备方法同实施例1。 0030实施例3防治烟草花叶病毒病的生物制剂，由组分I矿物油和组分II组成，两者的体积比为100:1。 0031其中，组分II的重量百分组成如下丁香酚15%，乳化剂15%，氮酮2%，酒精40%，余量为水。 0032乳化剂为芳烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯与烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯按重量比11的混合物。 0033所述生物制剂的制备方法同实施例1。 0034效果例比较下列制剂在烟草花叶病毒病的防治方面的性能。 0035配方I20%吗胍?乙酸铜可湿性粉剂。 0036配方II20%丁香酚水乳剂。 0037配方III实施例2制备得到的生物制剂。 0038（一）防治实验烟草种子分别用0.3%(w/w)的H2O2消毒后，用蒸馏水洗净，然后挑选均 一、形态正常的种子置于铺3层滤纸的培养皿(直径15cm)中，进行培苗。 待出苗后5d，选取长势一致的材料将其转移至塑料盆钵中，苗龄20d后，选择生长一致的苗备用。 取适量烟草病叶，用0.01mol/L（pH7.0）PBS缓冲液研磨成浆，通过摩擦接种到烟草叶片。 处理分别是CK（对照CK为喷洒清水）、配方I、配方II和配方III，每个处理100株，每个处理重复3次。 处理液每隔5d喷施一次，连喷施2次后进行采样。 预防实验田间实验分别选取烟草实验地块3个，每个田块设置4个处理CK（清水）、配方I、配说明书105028481A54/4页6方II和配方III。 上述配方I、II及III的制剂在喷施时用水配制成药剂浓度为333mg/kg的溶液后再进行喷施。 每个处理约1000株，每个处理重复3次。 在烟草定植后约15d开始查病情指数，同时开始喷施处理液，处理液每隔5d喷施一次，连续喷3次，喷施用量依照本领域技术人员的常规操作即可。 0039测定方法病情指数和防治效果的测定参照窦瑞木方法（详见3株植物内生细菌对番茄灰霉病的防治效果，河南农业科学,xx,4:77-79.）。 0040防治实验和预防实验的测定结果分别见表 1、表2。 0041表1不同生物制剂对烟草花叶病毒病的防治效果由表1可知，在没有对病毒病进行预防的情况下，三种生物制剂防治病毒病的防效差异很大。 在烟草作物上应用时，配方I对病毒病的防效为48.21%；配方II对病毒病的防效为64.27%；配方III对病毒病的防效为78.53%。 本发明提供的生物制剂对烟草