主管检验技师临床化学讲义年第十七章标本、实际、量器常识.doc

标本、试剂、量器常识一、标本的采集器常识（一）血液标本的采集1.采血部位（1）静脉采血法：最常从肘静脉取血，采血时，压脉带压迫时间不能过长，最好不超过半分钟，避免充血和血液中水分外渗，血中蛋白质等大分子浓度增加。见回血后，只能向外抽，不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。正在进行静脉输液时，不宜在三通管或同侧静脉采集标本。（2）毛细血管采血法：如果使用标本量很少，也可毛细血管采血，但要注意毛细血管血与静脉血参考范围有可能不同。（3）动脉采血法：采血部位多选择桡动脉、肱动脉和股动脉。在摸到明显搏动处，按常规消毒，以左手固定搏动处，右手持注射器，针头成60角或角度再大一些刺入，刺入动脉后血液自动涌入注射器。2.取血器材：现多用一次性注射器与试管，可防止院内感染和有利于废物的处理。3.防止溶血：造成溶血的因素有：注射器和容器不干燥、不清洁；淤血时间过长；穿刺不顺利损伤组织过多；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头而直接打人试管；血加入抗凝管后剧烈振荡混匀等。溶血外观的标本应在报告单上注明。4.抗凝剂：凡需用全血或血浆做检验时，要选用适当的抗凝剂，最常用的抗凝剂有枸橼酸盐、EDTA盐、草酸盐和肝素。5.标本送检：血液标本应及时送检，不能及时检验者必须适当处理方可保存，短时间保存，可放于46冰箱内，但切勿冰冻，否则会溶血。欲保存较长时间则应分离出血浆或血清。（二）尿液标本的采集（略）1.尿液标本的收集尿液生物化学检验多用24h尿。收集的方法是：第一天将尿排尽弃去，并记录排尿时间，从计时开始，以后排出的尿液均收集到洁净有盖容器内，直至第二天同一时间止。2.尿液标本的防腐防腐剂应在收集第一次尿时同时加入。常用的防腐剂见后。3.尿液标本的接收 尿液标本收集后应立即送检，检验人员接到标本后，应将尿液充分摇匀，精确量其总量（精确到毫升）并记录，不能及时检验者，应将留取的尿液保存于46冰箱中待检。（三）脑脊液和其他标本采集1.脑脊液采集：脑脊液穿刺部位有腰椎穿刺、小脑延髓池穿刺等，其中腰椎穿刺简单易行且危险性小。穿刺术通常由临床医师进行。标本抽出后，按先后顺序分别收集于3支无菌试管中，第1管做细菌学检查，第2管做生化检查，第3管做细胞计数。采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。标本采集后应立即送检。2.浆膜腔积液的采集：浆膜腔积液标本一般由临床医师用浆膜腔穿刺术（胸腔穿刺术，腹腔穿刺术，心包腔穿刺术）获得。为了解浆膜腔积液的性质，常对积液进行蛋白质、葡萄糖、酶及肿瘤标志物等检测，为防止液体凝固，可加入抗凝剂。3.羊水采集：从羊水成分的变化可了解胎儿的成熟度，某些先天性缺陷及有否宫内感染，是产前诊断的良好材料。羊水标本由临床医师采集，一般经腹壁行羊膜穿刺取得。二、标本的处理（一）抗凝剂抗凝剂应用物理或化学的方法除去或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。能够阻止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂。1.草酸钾：草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，阻止血液凝固。草酸钾抗凝剂改变血液pH。不能用于酸碱平衡观察；也不能用于钾、钙测定；同时对乳酸脱氢酶，酸性磷酸酶，碱性磷酸酶及淀粉酶均有抑制作用，可使其活性下降。2.氟化钠：氟离子能结合钙而抗凝，但抗凝效果较弱，数小时后又可出现凝固，故常与草酸钾混合组成抗凝剂，同时氟离子可防止糖酵解。氟化钠对许多酶活性有抑制作用，故不适合酶的测定；对酶法测定胆固醇和脲酶法测定尿素也有干扰。3.肝素：是一种含有硫酸根基团的黏多糖，可对抗凝血活酶和凝血酶的形成和活性，阻止血小板的聚集。肝素具有抗凝力强，不影响血细胞体积，不易溶血等优点，常用于血气分析和多种生化常规项目的测定，是生化检验中最常用的一种抗凝剂。（二）防腐剂尿液容易生长细菌，如不能及时检验或需留取大量标本时（如24h尿），应置冰箱保存或加入防腐剂。防腐剂应在收集的第一次尿液中加入。防腐剂有多种，应根据检验项目选择适当的防腐剂。1.甲苯（或二甲苯）：甲苯可在尿液表面形成薄膜，防止细菌繁殖，但不能消除已存在的细菌，防腐能力不太强。检测时吸取混匀后的下层尿液。此防腐剂对尿液生化检测，如总氮、尿素、肌酸、肌酐、尿酸、氯化物、钾、钠测定较适宜。加入量一般为10ml。2.盐酸：盐酸使尿液保持高度酸性，阻止细菌繁殖，同时防止一些化学物质因尿液碱化而造成的分解。常用于测定尿17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇、肾上腺素、去甲肾上腺素、儿茶酚胺、钙等。由于会产生尿酸盐沉淀，因此不适于尿酸测定。加入量一般为10m1。3.麝香草酚：可抑制尿内细菌生长。常用于尿液浓缩结核菌检查和尿沉渣记数，也适用于一般化学检查，但可引起蛋白假阳性，故不适合尿蛋白测定。（三）标本的分离和保存1.血液标本：应及时分离血清（血浆），最迟不超过2h。血标本分离前可置于室温或37水浴箱内，不能直接放入4冰箱，以免发生溶血。离心要求一般4000rpm，5min。总之，在分离血浆或血清时，一要及时，二要严防溶血。2.尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心后取上清液进行生化分析，离心要求一般4000rpm，5min。3.标本不能及时检验或需保留以备复查时，一般应存放于46冰箱。盛放标本的容器要加塞，以免水分挥发而致标本浓缩。个别标本需存放20冷柜或更低温度。冰冻标本在室温下解冻后应混匀，一次测定，反复冻溶将影响结果。三、影响体液成分的因素除病理性因素影响体液成分外，还有许多非病理性因素能影响体液成分或干扰测定。如采血体位、时间、运动、年龄、性别、体形、情绪、食物和药物等。因此，在标本收集前应尽可能排除这些因素的干扰。了解这些因素的影响，有助于获取准确的检验结果及对结果的合理解释。四、试剂的配制与保管（一）化学试剂的等级标准国产化学试剂一般分为四级如下表级别名称符号色标说明一级优级纯GR绿色纯度高，适用科研和配置标准液二级分析纯AR红色纯度较高，适用于定量分析三级化学纯CP蓝色纯度略低于二级，用途同二级四级实验试剂LR黄色质量较粗，用于一般定性试验（二）化学试剂的保管1.一般试剂的保管试剂必须按固体、液体分类并归类按序排列，做好登记，贮存于阴凉、避光、通风、干燥处。2.化学试剂危险品的保管（1）易燃、易爆试剂：易燃（常用的如丙酮、乙醚、乙醇、异丙醇等）。易爆（如苦味酸、叠氮钠等）试剂。贮存时应放在远离火源、阴凉、通风良好处。并应严密封固，不能和强氧化剂混放在一起，对易爆试剂可将瓶子存放于冰箱中，贮藏室温度应在30以下。（2）腐蚀性试剂：有硫酸、冰醋酸、醋酐、硝酸、溴、氨水等。可灼伤皮肤，甚至造成组织坏死。故在贮存或搬运时应避免撞击或强烈震动造成容器破裂。贮存时应选择耐腐蚀材料作架子。（3）剧毒试剂：如氰化物、三氧化二砷、氯化汞、硫酸二甲酯等。应指定专人专柜加锁保管，并严格登记请领制度。（三）溶液浓度的表示法及其计算1.百分浓度：指所有溶质的质量或体积占溶液总质量或总体积的百分比来表示该溶液的浓度。（1）质量-质量百分浓度：指100g溶液中，所含溶质的克数，符号%（gg）。（2）体积-体积百分浓度：指100ml溶液中所含溶质的毫升数，符号%（mlml）。2.质量-体积浓度：通常指1L溶液中所含溶质的克数，符号mV（gL）。3.物质的量浓度：是指1L溶液中所含溶质的量。溶质的量可用mol、mmol、mol等表示。五、常用玻璃仪器的清洗和容量校正（一）常用玻璃仪器的清洗1.几种洗涤液的配制及应用（1）合成洗涤液：是最常用的洗涤剂。使用时配制成1%2%的水溶液，用毛刷蘸取刷洗。洗过的器皿必须用清水冲洗干净，绝不可残留有洗涤剂，以免严重影响实验结果。（2）铬酸洗液：由重铬酸钾和浓硫酸配制而成，通常称为清洁液。具有强酸性及强氧化性。凡能溶于酸和可被氧化的物质，都可用这种洗液去除。（3）乙二胺四乙酸二钠洗液：用0.2molL的乙二胺四乙酸二钠溶液，加热煮沸可洗脱附着在玻璃仪器内壁之白色沉淀物（钙、镁盐类）和不易溶解的重金属盐类。（4）7.5molL尿素洗液：尿素洗液对蛋白质有较好的清洗能力，用此液浸泡，可除去黏附在仪器上的血液或血清蛋白质。2.洗涤方法（略）（1）新购置的玻璃器皿都有游离碱存在，可先用合成洗涤剂刷洗，再用0.2molL的盐酸浸泡26h，除去游离碱质再用自来水冲洗，最后用蒸馏水清洗23次。（2）日常使用的玻璃器皿，用后立即清洗干净，久置干涸后，会增加洗涤困难。一般先用水冲洗，再用合成洗涤剂刷洗，然后用流水冲洗，最后用蒸馏水清洗23次。（3）凡不能用毛刷刷洗的玻璃器皿，如容量瓶、刻度吸管等，应用自来水冲洗，沥干，再用铬酸洗液浸泡过夜，倾去洗液后再用自来水冲洗，最后用蒸馏水清洗23次。（4）凡被石蜡、凡士林或油脂类玷污的器皿，要单独洗涤，洗涤时可置合成洗涤剂中煮沸，趁热刷洗，即可除去油脂，然后用流水冲洗和蒸馏水清洗。3.干燥方法（略）（1）自然干燥：这是一种常用而简单的方法，适用于不急于要用的和各种计量玻璃仪器。如量杯、量筒、容量瓶、滴定管等皆可在洗净后倒挂在专用架上，任其在室温中自然干燥。（2）烘烤干燥：除容量仪器外，都可置120烤箱中烘烤干燥，如烧杯、烧瓶、三角瓶、试剂瓶、试管等都可采用烘烤干燥。定量吸管按定量分析的要求一般不宜烘烤干燥。（二）常用容量玻璃仪器的规格和使用规则玻璃计量容器都以毫升为计量单位，在量器上用“ml”标出。计量的检定条件以20为标准，故量器上都标有“20”字样。玻璃量器分为量入式和量出式两种。量入式是用于测定注入量器中的液体，量器上标有“TC”或“E”的字样，其定量标记方式一般是由下往上递增；量出式是用于测定从量器中倾出的液体，量器上标有“TD”或“A”的字样，其定量标记方式一般自上而下递增。1.量杯、量筒2.容量瓶：3.刻度吸管4.定量可调加液器【习题】关于血液标本的采集下列说法错误的是A.生物化学检验的血液标本，最常从桡动脉取血B.采血时压脉带压迫时间不能过长，最好不超过半分钟C.见回血后，只能向外抽，不能向静脉内推D.正在进行静脉输液时，不宜在三通管或同侧静脉采集标本E.动脉采血部位多选择桡动脉、肱动脉和股动脉正确答案A【习题】下列说法错误的是A.血液标本最常用的抗凝剂有枸橼酸盐、EDTA盐、草酸盐和肝素B.血液注入容器时未取下针头而直