液相色谱仪检定装置建标技术报告.doc

ORC1901-2005-A*计量标准技术报告计 量 标 准 名 称 建立计量标准单位计量标准负责人筹 建 起 止 日 期液相色谱仪检定装置盐城市计量测试所张学军 2004年04月 说 明1、请建立计量标准应填写计量标准技术报告。计量标准考核合格后由申请单位存档。 2、计量标准技术报告由计量标准负责人填写。3、计量标准技术报告用计算机打印或墨水笔填写，要求字迹工整清晰。目 录一、计量标准的工作原理及其组成( 1 )二、选用的计量标准器及主要配套设备( 2 )三、计量标准的主要技术指标( 3 )四、环境条件( 3 )五、计量标准的量值溯源和传递框图( 4 )六、计量标准的测量重复性考核( 5 )七、计量标准的稳定性考核( 6 )八、测量不确定度评定(79)九、计量标准的测量不确定度验证( 10 )十、结论( 11 )十一、附加说明( 11 )一、计量标准的工作原理及其组成液相色谱仪检定装置根据JJG705-2002液相色谱仪检定规程提供的方法, 该计量标准由分析天平、秒表、检定液相色谱仪用标准物质、（紫外波长标准溶液）组成。主要检定项目如下：1、 用天平和秒表检定输液系统的性能收集一定时间内流动相，用天平称重，根据流动相的密度、收集时间和流动相的质量计算出实测流量，3次测量的平均值与设定值之差为流量的设定误差。3次测量结果中最大和最小值之差为流量稳定性误差。2、 用数字温度计检定柱温箱温度将温度计固定在柱温箱内，测量柱温箱内温度，7次测量结果的平均值与设定值之差为温度设定值误差。最大和最小值之差为控温误差。3、 用液相色谱检定用标准溶液检定仪器的定性、定量重复性按规程要求设置色谱条件，在相同条件下连续进样6次做色谱分析，计算色谱峰的保留时间和峰面积的相对标准偏差，进行定性、定量重复性的检定4、用紫外波长标准溶液检定仪器的波长准确度和重复性 将紫外波长标准溶液注射到检测器样品池中，改变波长找出最大吸收波长，与标准波长比较，得出波长示值误差，3次重复测量结果的最大和最小值之差为波长重复性误差。5、用低浓度的液相色谱检定用标准物质（如110-7g/ml的萘/甲醇溶液）进行最小检测浓度的检定紫外波长标准溶液检定液相色谱仪用标准物质 液相色谱仪分析天平秒表 按规程要求设置色谱条件，注入110-7g/ml的萘/甲醇溶液，记录色谱图，根据色谱峰高和基线噪音计算最小检测浓度。二、选用的计量标准器及主要配套设备计 量 标 准 器名 称型 号测量范围不确定度或准确度等级或最大允许误差制造厂及出厂编 号检定证书 号液相色谱检定用标准物质GBW（E）-（110-3110-9）g/ml3%国家标物中心电子天平200g0.1mg秒表24h0.01s上海手表五厂数字温度计01000.1微量注射器玻璃10 l5%上海50 l主要配套设备容量瓶玻璃50mlA级上海三、计量标准的主要技术指标1、 液相色谱检定用标准物质：国家二级（110-310-9）g/ml，不确定度3%4%a、（110-4、110-7）g/ml的萘/甲醇溶液，不确定度4%b、（110-6、110-9）g/ml的硫酸奎宁/高氯酸水溶液，不确定度4%c、（110-3、110-9）g/ml的丙三醇/水溶液，不确定度5%2、波长标准溶液：（235、257、313、350nm），不确定度 0.1 nm3、电子天平：*型，200g，最小分度0.1mg4、秒表：*型，24h，最小分度0.01s5、数字温度计：*型，0100，最小分度0.16、微量注射器：50l，最小分度0.5l。四、环境条件项 目要 求实 际 情 况结 论温 度（30）205合格湿 度（2085）%60%15%合格干扰因素与实验无关的易爆、易燃和强腐蚀的物品、无强机械振动和电磁干扰无合格五、计量标准的量值溯源和传递框图上级计量标准国家标物中心液相色谱仪标准物质江苏省计量技术研究所时间频率标准盐城计量测试所质量标准二等温度计标准装置本所计量标准液相色谱仪检定装置 液相色谱检定用标准溶液秒表电子天平数字温度计直接测量法工作计量器具液相色谱仪六、计量标准的测量重复性考核选一台性能稳定可靠、美国water仪器公司生产的液相色谱仪（型号： 、编号: ）,测量国家标准物质中心研制的不同批次的110-4g/ml的萘/甲醇溶液，连续测量6次,由峰面积（v）的测量结果，检验计量标准的重复性，结果如下：测量序号第1批第2批第3批11247.1241250.9241251.46121249.0511254.8771250.99031251.0011250.4061246.95741250.0731250.3191247.12551249.8761250.6831250.31461250.2331250.8531250.247平均值1249.5601251.3441249.5160.11%0.10%0.16%在同一台仪器上测量国家标准物质中心研制的不同批次的110-4g/ml的萘/甲醇溶液，每一批测量6次,测量结果平均值的相对标准偏差 0.2%， 3批的峰面积最大和最小值之差与平均值之比为0.15%（1.828 / 1250.140 = 0.15%），以上数据说明该标准物质重复性良好。故本装置的测量重复性符合计量标准考核规范要求。七、计量标准的稳定性考核选一台性能稳定可靠、美国water仪器公司生产的液相色谱仪（型号： 、编号: ）,测量国家标准物质中心研制的不同批次的110-4g/ml的萘/甲醇溶液， 3次测量结果峰面积相对标准偏差 1.0%，证明该标准物质是稳定的。 峰面积： 批号123平均值No.11250.111248.701249.321249.38No.21255.011253.741253.921254.22No.31245.171249.651239.851244.89平均值1249.50差值9.33相对差0.8%测量结果 ：0.8% 1.0%故本装置的稳定性符合计量标准考核规范要求。八、测量不确定度评定评定的对象: 选一台性能稳定可靠、美国water仪器公司生产的液相色谱仪（型号： 、编号: ）一、 泵流量设定误差的不确定度1、泵流量设定误差是通过收集一定时间流出的流动相，称重，除以流动相的密度和收集时间得到流量的实测值，与设定值比较给出流量设定误差，则流量的计算公式为：F = - （1）式中： F-流量 ml/min ; m-收集到的流动相质量 g ;t-收集流动相的时间 s ; -流动相的密度 g/ml 。灵敏系数： c1= m / m = -1 c2= t / t =-1 c3= / = -1 c4（crep）= rep / rep =12、流量设定误差检定不确定度的来源如下： 不确定度分量u(i)不确定度来源检测时数值标准不确定度相对标准不确定度ci uiu1流动相质量 m2.99140.00050.02%-10.02%u2流动相的密度 0.7910.0030.38%0.38%u3时间 t3000.10.03%0.03%u4测量重复性 rep1.0000.0050.5%10.5%3、合成标准不确定度的计算 uc = = 0.62（%）4、扩展不确定度的评定 取k=3U = k uc = 3 0.62 2.0（%）二、 温箱温度设定误差的不确定度1、 柱温箱温度设定误差的检定，使用一台分度值为0.1、测量范围为0100的数字温度计，柱温箱温度设定误差为： T = Tb - Ts 式中：Tb、Ts分别为标称值和标准温度（）。2、温度检定不确定度来源如下：不确定度分量u(i)不确定度来源检测时数值标准不确定度相对标准不确定度Tb45uTs测量出的标准温度45.20.10.22%urep测量重复性 rep45.20.070.15%3、合成标准不确定度的计算 uc = = 0.27（%）4、扩展不确定度的评定 取k=3U = k uc = 3 0.27 0.9（%）三、最小检测浓度的不确定度八、测量不确定度评定检测器最小检测浓度是通过20l 1.010-7g/ml的萘/甲醇溶液，记录色谱峰高，在S/N=2是按下式计算。1、数学模型： cl = 式中 cl-最小检测浓度 g/ml Nd-基线噪音mm C-标准溶液的浓度 g/mlV -进样体积 l H -标准溶液的色谱峰高 mm灵敏系数： c1= Nd / Nd = -1 c2= C / C = -1 c3= V / V = -1 c4= V / V = -1 c5（crep）= rep / rep =1 2、最小检测浓度检定不确定度的来源如下： 不确定度分量u(i)不确定度来源检测时数值标准不确定度相对标准不确定度ci uiu1基线噪音 Nd4.010-5AU0.110-5AU0.3%-10.3%u2标准溶液的浓度 C1.010-7 g/ml1.0%1.0%u3进样体积 V20l0.5l2.5%2.5%u4色谱峰高 H1.4710-3 AU0.0110-3 AU0.7%0.7%u5测量重复性 rep4.480.112.4512.453、合成标准不确定度的计算 uc = = 3.8（%）4、扩展不确定度的评定 取k=3U = k uc = 3 3.8 12（%）四、波长示值误差的不确定度波长示值误差是用被测的紫外-可见光检测器直接测量以知波长的标准溶液，用测得值与标准值之差表示。 1、数学模型： = -s式中 -波长示值误差 -波长示值的算术平均值 s-标准溶液的波长2、波长示值误差检定不确定度的来源如下： 的不确定度主要来源于紫外-可见光检测器的测量重复性，可以通过连续多次测量（例如，连续8次测量）方式，用单次测量标准偏差表示；s的不确定度主要来源于标准溶液波长定值的不确定度，标物证书给出的结果为： 0.1nm,包含因子k95=1.96, 则标准不确定度为u(s)=a/k=0.1/1.96=0.051 nm 。（以257mm为例）不确定度分量u(i)不确定度来源检测时数值标准不确定度相对标准不确定度u（）波长测量的平均值257 mm1 mm0.4%us标准溶液波长定值257 mm0.0510.02八、测量不确定度评定3、合成标准不确定度的计算 uc = = 0.5（%）4、扩展不确定度的评定 取k=3U = k uc = 3 0.5 1.5（%）（其他波长示值误差不确定度的评定可参照以上进行。）五、定量重复性检定的不确定度1、液相色谱仪定量重复性用6次测量结果的相对标准偏差来表示，即RSD6 = 2、定量重复性检定的不确定度：色谱仪定量重复性的检定使用GBW（E）130167萘/甲醇标准溶液，含量为1.010-4g/ml。检定时溶液开瓶后连续测量67次，在此过程中因溶剂挥发引起溶液浓度的变化估计为0.05%，微量注射器的检定不确定度为1.0%，定量重复性检定的不确定度汇总于下表：不确定度分量u(i)不确定度来源检测时数值相对标准不确定度uiu1标准溶液浓度 CBY1.010-4g/ml0.05%0.05%u2注射器的体积 V20l1.0%1.0%u3测量重复性 rep0. 5%0. 5%3、合成标准不确定度的计算 uc = = 1.1（%）4、扩展不确定度的评定 取k=3U = k uc = 3 1.1 4（%）九、计量标准的测量不确定度验证 标准溶液均来自国家标准物质研究中心，不同批次标准物质的标准值定值没有变化，在正常操作下，用同一瓶溶液检定岛津LC-6A和water*两台仪器的定量重复性，各连续测量峰面积6次，测量结果如下：型号岛津LC-6Awater*测量值11525.922245.6721524.882244.8731525.372244.2341524.412244.9851525.572245.1261524.992244.76平均值1525.192244.94标准偏差S