实验室内部质量控制方式及结果评价.doc

实验室内部质量控制方式及结果评价中国兽药杂志2011,45(11):4649/.蓓,等实验室内部质量控制方式及结果评价王蓓,商军,代书玲(1.上海市兽药饲料检测所,上海201103;2.1二海农林职业技术学院,上海201106)收稿日期20110825文献标识码A文章编号10021280(2011)110046-04中图分类号N33摘要对使用标准物质或控制样品,使用相同或不同方法进行重复检测,留样再测,使用添加回收率,分析一个物品不同特性结果的相关性等实验室内部质量控制方法及结果评价进行了具体的探讨.为规范实验室内部质量控制方式与结果评价提供参考.关键词实验室内部质量控制;控制方式;结果评价ControlProceduresandReviewingoftheResultsinInternalQualityControlforLaboratoryWANGBei,SHANGJun,DAIShuling(1.ShanghaiInstituteforVeterinaryDrug&FeedsControl,Shanghai201103,China;2.ShanghaiVocationalTechnicalCollegeofAgriculture&Fortry,Shanghai201106,China)Abstract:Thecontrolproceduresandthereviewingoftheresultsforregularuseofcertifiedreferencematerialsand/orsecondaryreferencematerials,replicatetestsusingthesameordifferentmethods,retestingofretaineditems,useoftheaddrecovery,andcorrelationofresultsfordifferentcharacteristicsofanitemininternalqualitycontrolareanalyzedanddiscussedindetail,SOastoprovidereferencesforthequalityassuranceandcontrolinlaboratory.Keywords:internalqualitycontrolforlaboratory;controlprocedures;reviewingoftheresults作为出具检验报告的质检机构,实验室内部质量控制是一项重要的技术管理工作.检测结果质量始终是实验室关注的重点.中国国家认证认可监督管理委员会(CNCA)和中国合格评定国家认可委员会(CNAS)每年都组织各领域的能力验证活动或计量审查活动,以评价通过认证或认可实验室的检测能力和检测质量.对实验室而言,虽然参加权威机构组织的这类比对活动对衡量其检测能力既有效又方便,但这种活动常常不能覆盖所有检测项目,还需采取其他措施进行补充评价和控制.GB/T270252008(检测和校准实验室能力的通用要求(GB/T270252008)和检测和校准实验室能力认可准则(CNASCL01:2006)中的5.9条款,对实验室内部质量控制提出明确规定:实验室应建立内部质量控制程序,以监控检测的有效性,所得数据的记录方式应便于可发现其趋势.因此,为确保检测结果的准确,可靠和有效,做好实验室内部质量控制对质检机构至关重要.但长期以来,部分实验室缺乏对内部质量控制方法应用的研究,使实验室质量管理工作成为薄弱环节,导致一些检测结果的偏离未能及时发现.为此,结合实验室实际工作,笔者就如何通过实验室内部质量控制方式及使用恰当统计技术对分析数据进行评价,更加客观的认识实验室的质量水平进行论述.1实验室内部质量控制的方式根据检测和校准实验室能力的通用要求作者简介:王蓓(1959年一),女,研究员,主要从事兽药检测与实验室管理工作.通讯作者:商军.Email:sjshvdc163.corn2011,45(11):4649/王蓓,等中国兽药杂志(GB/T270252008)中规定,对检测的监控应有计划并加以评审,可包括(但不限于)下列内容J:a)定期使用有证标准物质(参考物质)进行监控和/或使用次级标准物质(参考物质)开展内部质量控制;b)参加实验室间的比对或能力验证计划;c)使用相同或不同的方法进行重复检测或校准;d)对存留物品进行再检测或再校准;e)分析一个物品不同特性结果的相关性.通常在实验室内部质量控制活动中,经常并方便使用的方式为a),c),d)和e),可根据具体情况采用其中一种多种方式来进行.2实验室内部质量控制结果评价在实施质量控制计划的同时,对数据的有效评价是衡量实验室质量水平的关键,也是实验室发现和改进不合格测试工作的有效方式.2.1使用标准物质或控制样品2.1.1对单一组数据的质量评价2.1.1.1按En值评价当实验室能够对该检测项目进行正确的不确定度评定时,可使用值对结果评价.丽Xtab-X,T(1)式(1)中:为实验室测量结果;为标准品或控制样品的参考值;U为实验室此项目的扩展不确定度;,为参考值的扩展不确定度.若Enl,判定结果为满意结果,否则判定为不满意结果.2.1.1.2按临界值(CD值)评价当实验室对检测项目缺乏正确的不确定度的评定时,而用于测量的标准方法提供有可靠的重复性标准偏差or和再现性标准偏差时,可采用CD值进行评价.:/(2.8o-).一(2.8o)()(2)2式(2)中:n为在重复性条件下测量的次数.若实验室在重复性条件下n次测量的算术平均值与参考值,之差lrI小于临界c值,该测量结果为满意结果,否则为满意结果.2.1.1.3按专业标准方法规定评价在En值和CD值不可获得时,如相关专业标准规定了测试结果的允许差,可按标准规定评价.计算z值:z=(3)式(3)中:为实验室测量结果;为标准品或控制样品的参考值;为标准中规定的允许差.若z1,测试结果为满意结果,否则为不满意结果.2.1.1.4按检验评价在评价数据是否存在系统误差,可采用单一总体的均值检验,即均值与给定值的比较,计算t检验值:(4)k一,rS/n式(4)中:为实验室测量结果;,为标准品或控制样品的参考值;s为测量结果的标准差;n为测定次数(5次以上).根据测定次数/,和置信概率P(一般为95%),查t分布临界表,若计算t值小于t临界值时,实验室测定数据无系统误差,反之则存在系统误差.2.1.2对长期数据的质量控制及评价2.1.2.1控制图的制作要查看实验室内部的检测能力是否处于一个稳定的水平,需要对标准品或控制样品的长期数据监控,即在实验室正常的可接受的偏差下,分析数据要呈现正态分布.分析控制图是长期监控实验室内部质量常用的方法,它可以通过一段时间内的数据波动情况,分析是正常的随机波动还是异常因素的干扰,进而提升检测质量.在常规控制图(GB/T40912001)中规定:检测实验常用的控制图可采用均值一标准差,均值一极差,单值一移动极差控制图等,可根据分析目的和测试性质等因素决定采用何种控制图_3-4.使用控制图进行测试质量控制时,应将测试样品和控制样品一同交给检测人员测试,保证在通常的测试能力进行,以免失去控制的真实性.控制图的形成通常需要一下几个步骤:a)确定控制样品监控的检测项目,或称统计量.b)取预备数据,通常取2025个子组,每次测定在45次.数据的取得条件应包含实验室测试条件的变化范围,同时测试子组和次数的多少,应根据检验过程的稳定程度而最终确定.c)计算统计量,根据选择的统计图的类型分别计算.d)计算各控制限,各统计量的上控制限和下控制限.e)对极差或标准差控制图进行判定,若判定稳定,将继续进行下一步;若没有判稳,需对收集到的异常数据剔除(异常原因为可以控制的),然后重新计算各统计量和控制限,再次判定直到稳定.f)对均值或单值控制图进行判定,若判定稳定,延长此图的控制限,将其作为日后的控制用控制图使中国兽药杂志2011,45(11):4649/王蓓,等用;若没有判定稳定,查明原因剔除异常数据,重新计算,直到判定稳定.2.1.2.2控制图的评价控制图是否已经处于稳定状态,可根据常规控制图(GB/T40912001)中八项准则进行判定(图1).在日常的质量控制过程中,将每次分析的结果画在控制图上,当出现|B/CV/CB|AI检验1:1个点落在A区之外ABC/C/B/_A检验3:连续6个点递增或递减八X,1XB/,/C/CIB/xlX有点落在控制线以外,连续9点落在控制中心线一侧或连续6点出现递增或递减等八项判定准则中列出的现象时,则表明检测过程出现异常,应当从人,机,料,法,环各方面进行查找原因,排除异因后,重新对质量控制样品进行检测,当结果在控制限以内才可继续正常的分析测定.ABCC,./.B,A检验2:连续9点落在中心线同侧AB入C/1C/,/BA检验4:连续14点中相邻点交替卜下A.B卜C,/C./B入/A检验5:连续3点中有2点落在中心线同一侧的B区以外检验6:连续5点中有4点落在中心线同一侧的Cb_.以外XLCLABC,./C,./BAUCLAB/C|c|BA检验7:连续l5点落在中心线两侧的C区内检验8:连续8点落在中心线两侧且无一在C区内图1八项准则判定图2.2使用相同或不同方法进行重复检测2.2.1两个样本均值间的t检验两个操作者,两种分析方法或两台仪器分析结果是否存在显着性差别;不同分析时间,样品是否存在显着性变化;两个样品中某成分的含量是否存在显着性差别等,可采用两个样本均值问的t检验方法用于评价检测数据是否存在系统误差.一般情形下测试的次数不少于5次,计算成对测试结果的差值及其标准差,均值问的t检验方法如下:a)计算成对结果的差值:差值:l一I(5)b)计算合并标准差或组合标准差:s=s一巫(6)或由两组数据的平均值求SSR=(7)C)计算统计量值:=-n,2urLLJn一LUL皿n衄n肌肌UUULUU2011,45(11):4649/王蓓,等中国兽药杂志2.2.2结果评价根据测定次数n和置信概率P(一般为95%),查t分布临界表,当计算t值小于t临界值时,则两方法不存在显着性差异,反之则存在显着性差异.2.3留样再测留样再测是实验室较为常用的一种质量控制手段,它不但能体现测试结果的可靠性,也能反应样品的稳定性,存储条件的影响程度以及实验室的人员操作差异等方面的信息.对再检测数据可采用如下方式进行评价:a)可参照2.1.1对单一组数据的质量评价进行评价,以衡量测试结果的可靠性.b)在一定的时间间隔里,通过对同一保留样品的再检测,得到与时间对应的分析数据,用2.1.2对长期数据的质量控制及评价,绘制分析控制图进行评价,进而考核样品的稳定性,存储条件的影响等等.2.4使用添加回收率进行评价在试样中加入已知含量的待测组分,与试样同时进行测定,计算出加人待测组分回收比率.用来审核实验室的检测能力,测定方法或检测仪器的准确度及检测结果的准确性.用添加法测定的回收率,至少应选定3个添加浓度,对于禁用物质,回收率在方法测定低限,两倍方法测定低限和十倍方法测定低限进行3水平试验;对于已制定最高残留限量(MRL)的,回收率应在方法测定低限,MRL,选一合适点进行3水平试验;对于未制定MRL的,回收率应在方法测定低限,常见限量指标,选一合适点进行3水平试验.对不同添加浓度的回收率要求不同,但一般应达到以下要求(表1).表1回收率范围2.5分析一个物品不同特性结果的相关性2.5.1数学模型的建立利用同一样品不同间的相关分析,可以得出相关指标见的经验公式(回归方程),这样可以间接地用一指标来评价出另一指标的准确程度.按标准方法对样品的两个指标进行若干次再现性测试(检测次数愈多,代表性,准确性越好).两指标问的一元回归方程形式可写为:多:a+(9)式(9)中:多为因变量指标的估计值;为自变量指标的检测值;口为回归方程的截距;b为回归方程的斜率.a的估计值a与b的估计值b,可用自变量和应变量Y的若干次的实测值,用最小二乘法求出:a:YbX(10)b:Lxy/(11)式(1O),(11)中:x=Yx/n,Y=Yi/n;L=(XX)(Y),L=(XiX).相关系数可由下式求出:()(y)-CxL/(Jjf)(y一y)(12)式(12)中:L=(riY).2.5.2结果评价根据给定的显着性水平a及检测次数,查相关系数表.若I3/l,则变量与Y之间线性相关关系不显着;若nIIy.,则变量与Y之间线性相关关系显着;若II.,则变量与Y之间线性相关关系特别显着.利用相关系数可以判断回归方程是否线性关系显着,也可将其作为用自变量指标审核因变量Y或用Y指标审核指标的依据.3小结通过实验室内部质量控制方式及使用恰当统计技术对分析数据进行评价,可发现和改进不合格的测试工作;同时也可以根据数据的趋势性变化,对质