大葱根系分泌物对黄瓜和枯萎病原菌的化感作用及其GCMS分析.doc

大葱根系分泌物对黄瓜和枯萎病原菌的化感作用及其GCMS分析 中国.paper.-1-科技论文在线大葱根系分泌物对黄瓜和枯萎病原菌的化感作用及其GC/MS分析#徐宁1，王超1，魏珉1,2，时伟1，王秀峰1,2*基金项目国家自然科学基金项目 （31071830）；高等学校博士学科点专项科研基金 （xx3702110005）；“十二五”国家科技支撑计划项目（xxBAD12B04）作者简介徐宁，（1983-），男，博士研究生，主要研究方向设施蔬菜栽培。 通信联系人魏珉，（1968-），男，博士，教授，博导，主要研究方向设施蔬菜与无土栽培。 E-mail:minweisdau.（1.山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安271018；52.作物生物学国家重点实验室，山东泰安271018）摘要采用连续根系分泌物收集系统（CRETS）收集大葱根系分泌物，研究了分泌物对黄瓜及其枯萎病原菌的化感作用，并利用气相色谱-质谱技术（GC/MS）分析了其化学组成。 结果表明大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长均表现低浓度促进、高浓度抑制的作用，元藏大葱比章丘大葱的化感作用更强；随着根系分泌物浓度升高，对枯萎病原菌菌10丝生长和孢子萌发的抑制作用逐渐增强，元藏大葱根系分泌物的抑制程度大于章丘大葱。 大葱根系分泌物中含有烃类、醇醚类、酚类、萘类、醛酮类、酸类、酯类、酰胺类以及杂环化合物等物质，其中，杂环化合物、酯类和酰胺类化合物所占的比例较大，邻苯二甲酸酯类和苯并噻唑类物质相对含量较高，且元藏大葱根系分泌物中相对含量高于章丘大葱。 关键词大葱；根系分泌物；化感作用；黄瓜；枯萎病原菌15S633.1Allelopathy of Welsh OnionRoot Exudateson Cucumberand FusariumOxysporum f.sp.Cucumerinum and the GC/MS Analysis20XU Ning1,WANG Chao1,WEI Min1,2,SHI Wei1,WANG Xiufeng1,2(1.College ofHorticultural Scienceand Engineering,Shandong AgriculturalUniversity,ShanDong Taian271018;2.State KeyLaboratory ofCrop Biology,ShanDong Taian271018)Abstract:The allelopathyof Welsh onion root exudates collectedby continuousroot exudates25trapping system(CRETS)was studiedon cucumberand Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum,andtheponents ofthe root exudates wereidentified bygas chromatography-mass spectrometry(GS/MS).The resultsshowed that:the seed germination and sprout growth of cucumberwere promotedby root exudates atlow concentrationwhile suppressedat highconcentration,the allelopathyofYuanzangwas strongerthanZhangqiu.Inhibitory effectson30mycelial growthand sporegermination ofFusarium oxysporumf.sp.cucumerinum enhancedwith increasingconcentration of root exudates,andYuanzangshowed strongereffects thanZhangqiu.Hydrocarbon,alcohol,ether,phenol,naphthalene,aldehyde,ketone,acid,ester,amide,heterocyclic poundswere detectedin Welsh onion root exudates,of whichheterocyclic,ester andamide poundsoupied higherproportion,and phthalateesters andbenzothiazole35derivatives hadgreater relativecontents,which werehigher inYuanzangthan inZhangqiu.Keywords:Welsh onion;root exudates;allelopathy;cucumber;Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum0引言40化感作用是植物或微生物代谢过程中对环境中其它植物或微生物所产生的直接或间接、有利或不利的影响（Rice，1984；阎飞等，2000）。 化感作用包括促进和抑制两个方面。 中国.paper.-2-科技论文在线植物在生长发育过程中由根系向根际环境分泌大量根系分泌物，其中一部分物质或其进一步分解产物具有一定化感潜力，对作物生长会产生有益或有害的作用（Yu etal.，2000；Hao etal.，xx），并极大地改变根际微域环境（Bertin etal.，xx；Kong etal.，xx），对根45际养分状况产生重要影响（Yu etal.，1997）。 越来越多的试验表明，植物的连作障碍与根系分泌物密切相关，根系分泌物及其化感作用研究成为揭示连作障碍问题的热点（吴凤芝和赵凤艳，xx；Inderjet&Duke，xx）。 前人研究探明了西瓜（Hao etal.，xx）、黄瓜、豌豆（Yu&Matsui，1994，1999）、茄子（张凤丽等，xx；刘娜等，xx）、辣椒（耿广东等，xx）等多种蔬菜根系分泌物的化感作用及其中的部分化感物质，为揭示连作障50碍机理和开展有效防控提供了理论依据。 葱蒜类是瓜类蔬菜理想的轮作前茬（中国农业科学院蔬菜花卉研究所，xx）。 随着研究手段不断进步，对其内在机理的认识逐渐深入。 人们已通过研究证实了分蘖洋葱根系分泌物对黄瓜及其枯萎病原菌（杨阳，xx）、大蒜根系分泌物对不同受体作物和瓜类枯萎病原菌的化感作用，并初步明确了大蒜根系分泌物中的部分化感物质（周艳丽，xx）。 我们和55国内同行的试验发现，大葱轮作可有效减轻温室黄瓜连作土壤障害，改善土壤性状，增加细菌和放线菌数量，减少真菌数量，促进植株生长发育，提高产量（李元等，xx；杨凤娟等，xx）。 分析原因，可能与根系分泌物及其化感作用有关。 为此，本试验研究了不同大葱品种根系分泌物对黄瓜及其枯萎病原菌的化感作用，并分析其化学组成，以期从化感作用角度揭示大葱轮作防控黄瓜连作障害的机理。 601材料与方法1.1试验材料供试大葱（Allium fistulosumL.）品种为元藏大葱和章丘大葱，黄瓜（Cucumis sativusL.）品种为新泰密刺。 黄瓜枯萎病原菌（Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum）从山东农业大学园艺试验站日光温室内的黄瓜枯萎病株中分离获得。 651.2试验方法1.2.1大葱根系分泌物的化感作用1.2.1.1根系分泌物的收集采用连续根系分泌物收集系统（Continuous RootExudates TrappingSystem，CRETS）（Tang&Young，1982）。 将培育6个月的30株大葱幼苗小心挖出，洗根，移栽到连续根系分泌物收集装置的种植盆中，恢复生长3d后，在种植盆中加70500mL Hoagland营养液，开动循环泵，让营养液从盆底部流出，让营养液通过内装80mL XAD-4吸附树脂（Sigma）的色谱柱（2cm30cm），重新回到种植盆中，控制流速1-1.5Lh-1。 每天补充营养液，连续培养10d，取下色谱柱，先用500mL去离子水清洗，再用200mL甲醇洗脱。 收集结束后取样植株，称量根系鲜重。 洗脱液在30下减压浓缩至干，加50mL去离子水溶解，每个品种2次重复，将两个色谱柱的溶液合并，浓度为1.2gmL-1（1gmL-175为1mL水溶液中含有1g鲜根的根系分泌物）（张凤丽等，xx），分别稀释到0. 6、0. 3、0.2gmL-1备用。 1.2.1.2根系分泌物对黄瓜的化感作用采用滤纸培养皿法（曾任森，1999）。 在直径9cm的培养皿中铺2层定性滤纸，加入5mL根系分泌物稀释液，均匀摆放20粒健康饱满的黄瓜种子，然后加盖一层打孔薄膜，置于28恒温培养箱中发芽。 从第3d开始，在种子80中国.paper.-3-科技论文在线表面加盖一层滤纸，每天补充2mL根系分泌物稀释液。 以加入等量去离子水，即0gmL-1为对照（CK）。 自第1d起每天统计萌发种子数，第3d计算发芽指数，第5d调查胚芽、胚根长度和芽苗鲜重。 试验重复3次。 发芽率（%）=发芽种子数/供试种子数100；发芽指数GI=（GT/DT）。 式中，GT为第T天的发芽数，DT为相应发芽天数；85化感效应指数（RI），当TC时，RI=1-C/T；当T 式中，C为对照各指标数值，T为处理各指标数值；当RI0时，为促进作用；当RI0时，为抑制作用；RI绝对值的大小与作用强度一致（Williamson&Richardson，1988）；化感综合效应（SE）是各化感效应指数的平均值（沈慧敏等，xx），即SE=(RI GI+RI RL+RI SL+RI SFW)/4。 901.2.1.3根系分泌物对枯萎病原菌的化感作用根系分泌物对枯萎病原菌菌丝生长和孢子萌发的化感作用参考周艳丽 （xx）的方法。 (1)对菌丝生长的影响无菌条件下，将过滤灭菌的根系分泌物稀释液和40的PDA培养基（1000ml中含有马铃薯300g、琼脂25g、蔗糖30g）等体积混匀，对照加去离子水混合倒平板。 用直径5mm的打孔器打取菌落圆片置于培养基上，每皿3片，每处理3皿，95倒置于28黑暗条件下培养，3d后测量菌落直径，并计算菌丝抑制率。 抑菌率（%）=（对照皿菌落直径-处理皿菌落直径）/对照皿菌落直径100 (2)对孢子萌发的影响将载玻片放入铺有滤纸的培养皿中，用直径15mm的打孔器打取水琼脂培养基置于载玻片上，吸取等体积混匀的根系分泌物稀释液和菌悬液20L于培养基上，28黑暗培养12h后，40倍物镜下镜检病原菌孢子萌发情况并计算孢子萌发抑制率。 100试验重复3次。 孢子萌发抑制率（%）=（对照孢子萌发数-处理孢子萌发数）/对照孢子萌发数1001.2.2大葱根系分泌物的GC/MS分析1.2.2.1根系分泌物的收集采用连续根系分泌物收集系统，方法同1.2.1.1。 洗脱液于30下减压浓缩至干，加100mL去离子水溶解，用乙酸乙酯按体积比1:1萃取3次，合并105萃取液，30下减压浓缩至5mL，过0.45m有机膜后用于GC/MS分析。 1.2.2.2GC/MS分析方法色谱条件为Rtx-5MS色谱柱，30.0m0.32mm毛细管柱，0.25m滤膜；先在50保持2min，以6/min速度升温至250，保持10min；进样口温度230，载气He，流速2.4mLmin-1，进样量1L。 质谱条件为EI电离方式，电子能量70eV，离子源温度xx10，扫描范围45550amu。 通过谱图库NIST08检索确定根系分泌物成分，采用峰面积归一法计算各成分相对含量。 气相色谱-质谱仪（GC/MS-QPxxPlus）以及处理峰值软件均Shimadzu公司。 1.3数据处理采用Microsoft Excelxx软件处理原始数据和绘图，采用DPS软件对数据进行方差分115析及最小显著差异性检验（Duncans新复极差法，P0.05）。 中国.paper.-4-科技论文在线2结果与分析2.1大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长的影响表1大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长的影响120Tab.1Effects of Welsh onion rootexudates on seedgermination andsprout growthof cucumber大葱Welsh onion浓度(gmL-1)Concentration发芽率(%)Germination rate发芽指数Germination index胚根长(cm)Radicle length胚芽长(cm)Shoot length芽苗鲜重(g)Sprout freshweight0(CK)100.0019.830.29a6.000.42b4.330.28b0.200.01b章丘0.2100.0020.000.00a7.320.33a4.800.25a0.260.02a Zhangqiu0.3100.0020.000.00a7.880.67a5.030.29a0.270.02a0.6100.0019.830.29a7.720.31a4.750.32a0.260.02a1.2100.0019.670.58a5.200.64c3.930.19c0.190.01b0(CK)100.0019.830.29a6.000.42c4.330.28b0.200.01c元藏0.2100.0020.000.00a8.230.33b4.880.25a0.260.02b Yuanzang0.3100.0020.000.00a9.220.29a5.050.14a0.290.02a0.6100.0019.830.29a7.850.66b4.900.28a0.260.01b1.2100.0019.500.50a4.520.39d3.550.34c0.170.02d注同列不同字母表示处理间差异显著（P0.05）。 Note:Different lettersin thesame columnmeant significantdifference amongtreatments at0.05level.由表1可以看出，两个大葱品种根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长均呈现低浓度促125进、高浓度抑制的现象，但对黄瓜种子发芽率无显著性影响。 根系分泌物浓度为0. 2、0. 3、0.6gmL-1时表现为促进作用，以0.3gmL-1作用最显著，章丘大葱使黄瓜发芽指数、胚根长、胚芽长和芽苗鲜重分别比对照增加0.86%、31.33%、16.17%和35%，元藏大葱分别比对照增加0.86%、53.67%、16.62%和45%；1.2gmL-1的根系分泌物对黄瓜发芽指数、胚根长、胚芽长、芽苗鲜重表现出抑制作用，章丘大葱使之分别降低0.81%、13.33%、9.24%130和5%，元藏大葱使之分别降低1.66%、24.67%、18.01%和15%。 表2大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长的化感作用评价Tab.2Allelopathic potentialofWelshonion rootexudates onseedgerminationandsproutgrowthof cucumber化感效应指数RI大葱Welshonion浓度(gmL-1)Concentration发芽指数Germination index胚根长Radicle length胚芽长Shoot length芽苗鲜重Sprout freshweight化感综合效应Synthesis effect0(CK)0.0000.000a0.0000.000c0.0000.000c0.0000.000c0.0000.000c章丘0.20.0080.014a0.1800.034b0.0970.028b0.2140.029b0.1240.008bZhangqiu0.30.0080.014a0.2380.020a0.1390.031a0.2640.021a0.1610.006a0.60.0000.000a0.2230.030a0.0870.022b0.2250.033b0.1340.012b1.2-0.0090.015a-0.1360.049d-0.0910.029d-0.0670.040d-0.0750.012d0(CK)0.0000.000ab0.0000.000d0.0000.000b0.0000.000c0.0000.000c元藏0.20.0080.014a0.2710.038b0.1130.026a0.2290.035b0.1540.013bYuanzang0.30.0080.014a0.3500.028a0.1420.036a0.3130.029a0.2020.012a0.60.0000.000ab0.2350.016c0.1160.012a0.2260.027b0.1440.005b1.2-0.0170.015b-0.2480.030e-0.1820.036c-0.1340.054d-0.1430.020d注同列不同字母表示处理间差异显著（P0.05）。 135Note:Different lettersin thesame columnmeant significantdifference amongtreatments at0.05level.由表2可知，大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长各指标的化感效应指数变化趋势基本相同，0. 2、0. 3、0.6gmL-1表现为促进作用，以0.3gmL-1作用最大，1.2gmL-1则表现为抑制作用，且元藏大葱的化感作用强度高于章丘大葱。 不同测定指标间比较，对140胚根长和芽苗鲜重的化感效应指数绝对值较大，浓度0. 2、0. 3、0. 6、1.2gmL-1的章丘大葱根系分泌物对黄瓜胚根长的化感效应指数为0. 180、0. 238、0. 223、-0.136；元藏大葱根系中国.paper.-5-科技论文在线分泌物为0. 271、0. 350、0. 235、-0.248。 化感综合效应可反映供体对受体的总体化感作用强度（杨阳，xx）。 由表2看出，两个大葱品种的根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长的化感综合效应与单一指标基本一致。 1452.2大葱根系分泌物对枯萎病原菌的抑制作用由图1可知，随着大葱根系分泌物浓度升高，对黄瓜枯萎病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用逐渐增强。 章丘大葱对枯萎病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别达到5.03%22.03%和3.51%27.46%，元藏大葱分别达到4.32%25.05%和4.44%33.61%。 当根系分泌物浓度0.3gmL-1时，元藏大葱对枯萎病原菌菌丝生长的抑制率大于章丘大葱；150浓度0.2gmL-1时，元藏大葱对枯萎病原菌孢子萌发的抑制率大于章丘大葱。 随着根系分泌物浓度升高，两个大葱品种的抑菌率和孢子萌发抑制率差异逐渐增大，当根系分泌物浓度为1.2gmL-1时，元藏大葱抑菌率和孢子萌发抑制率比章丘大葱高出13.71%和22.40%。 01020300.20.30.61.2抑菌率/(%)Hyphal growthinhibi tion ratio章丘Zhangqiu元藏Yuanzangaaabbaba0102030400.20.30.61.2孢子萌发抑制率/(%)Sporegerminat ioninhibitionrat ioaaaababa浓度Concentration(gmL-1)图1大葱根系分泌物对黄瓜枯萎病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用155Fig.1Inhibitory effectsofWelshonionrootexudatesonhyphal growthand sporegermination ofFusariumoxysporumf.sp.cucumerinum2.3大葱根系分泌物的GC/MS分析图2是章丘大葱和元藏大葱根系分泌物的总离子流色谱图，可以看出，两个大葱品160种根系分泌物色谱图一致性较高。 但章丘大葱比元藏大葱分离出更多的的色谱峰。 不同大葱品种的根系分泌物，无论成分和相对含量都存在一定差异。 章丘大葱根系分泌物中检测出10大类59种物质，元藏大葱检测出9大类48种物质（表3）。 大葱根系分泌物中主要含有烃类、醇醚类、酚类、萘类、醛酮类、酸类、酯类、酰胺类以及杂环化合物等物质。 其中，杂环化合物、酯类和酰胺类化合物所占的比例较高，章丘大葱根系分泌物165中分别占58.31%、30.48%和2.54%，元藏大葱根系分泌物中则分别占62.62%、26.39%和4.21%。 苯并噻唑、苯并噻唑酮、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二乙酯属于两个大葱品种所共有的物质，且相对含量较高。 章丘大葱根系分泌物中，邻苯二甲酸酯类占酯类总量的60.50%，苯并噻唑类占杂环化合物总量的97.56%；元藏大葱根系分泌170物中，邻苯二甲酸酯类占酯类总量的81.85%，苯并噻唑类占杂环化合物总量的97.32%。 2,2-亚甲基双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、苯甲酸苄酯、苯甲酸-4-甲基苯酯、2-甲硫基异硫氰酸苯酯也属于两个大葱品种根系分泌物中相同的物质，但相对含量较低。 中国.paper.-6-科技论文在线5.010.015.020.025.030.035.0BA保留时间Retention time/min175图2章丘大葱（A）和元藏大葱（B）根系分泌物的总离子流色谱图Fig.2Total ioncurrent chromatogramof rootexudates ofZhangqiu(A)andYuanzang(B)表3不同品种大葱根系分泌物的化学组分Tab.3The chemicalponents ofrootexudates of differentvarieties ofWelshonion180化合物名称Name ofthe chemical相对含量(%)Relative content相对含量(%)Relative content章丘Zhangqiu元藏Yuanzang化合物名称Name ofthe chemical章丘Zhangqiu元藏Yuanzang1.烃类Hydrocarbon2.080.26苯甲酸苄酯Benzyl Benzoate0.450.491-甲氧基十五烷1-Methoxypentadecane0.38-2-甲硫基异硫氰酸苯酯2-(Methylthio)phenyl isothiocyanate0.260.35愈创奥Azulol1.70-4-氰基苯甲酸丁酯4-Cyanobenzoic acid,butyl ester1.79-3-甲基-3-丙基-2,5-吡咯烷3-Methyl-3-propyl-2,5-pyrrolidinedione-0.269-十二炔基环戊烷甲酸酯Cyclopentanecarboxylic aciddodec-9-ynyl ester0.30-2.醇、醚类Alcohol,Ether1.370.67对苯二甲酸2-氯乙烷异丁酯Terephthalic acid,2-chloroethyl isobutylester0.52-乙基己醇Ethylhexanol0.17-邻苯二甲酸二丁酯Dibutyl phthalate3.704.71甲基苯甲醇Benzenemethanol,.alpha.-methyl-0.19-邻苯二甲酸二异丁酯Diisobutyl phthalate1.120.749-芴醇9-Fluorenol0.33-邻苯二甲酸二乙酯Diethyl Phthalate2.423.24异雪松醇Epicedrol-0.27邻苯二甲酸二甲酯Dimethyl phthalate0.700.923-甲基-1-戊烯-3-醇3-Methyl-1-penten-3-ol-0.17苯甲酸-4-甲基苯酯Benzoic acid,p-tolyl ester0.081.131,3-二氯-2-丙基-2,3-二氯-1-丙醚1,3-Dichloro-2-propyl2,3-dichloro-1-propyl ether0.400.23邻苯二甲酸二异辛酯Diisooctyl phthalate9.4511.431,4-丁二醇二缩水甘油醚Butane,1,4-bis(2,3-epoxypropoxy)-0.28-邻苯二甲酸二异丙酯Diisopropyl phthalate1.05-3.酚类Phenol1.520.47邻苯二甲酸丁基甲酯Phthalic acid,butyl methyl ester-0.562,2-亚甲基双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)p-Cresol,2,2-methylenebis6-tert-butyl-0.360.36对甲苯磺酸正辛酯Benzenesulfonic-acid,4-methyl-,octyl ester0.44-3-叔丁基苯酚m-tert-Butylphenol0.30-双(2-羟乙基)对苯二酸酯Bis(2-hydroxyethyl)terephthalate2.89-2,4-二叔丁基苯酚2,4-Di-tert-butylphenol0.86-3-巯乙基丁酸酯3-Sulfanylhexyl butyrate0.69-5,8-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-萘酚5,8-Dimethyl-1,2,3,4tetrahydro-1-naphthol-0.11延胡索酸2-甲代烯丙基乙酯Fumaric acid,ethyl2-methylallyl ester-0.124.苯类Benzene0.15-苯甲酰基异硫氰酸酯-0.17中国.paper.-7-科技论文在线Benzoyl isothiocyanate卡达萘Cadalene0.15-吡啶甲代-2-thia-硬脂酸酯Picolinyl2-thia-stearate-0.145.醛、酮类Aldehyde,Ketone1.980.708.胺类Amine2.544.213,5-二甲基苯甲醛3,5-Dimethylbenzaldehyde0.190.16环己基甲酰胺Cyclohexylformamide0.280.19苯乙酮Acetophenone1.250.141,3-二环己基脲1,3-Dicyclohexylurea0.720.713-乙基苯甲醛3-Ethylbenzaldehyde-0.10环莠隆Cycluron1.412.67四氢化-1,3-恶嗪-2-硫酮Tetrahydro-1,3-oxazine-2-thione0.34-N,N-二甲基-1-氨基硫脲Hydrazinecarbothioamide,N,N-dimethyl0.130.134-甲氧基-2,5-二氢-1H-2-吡咯酮1H-2-Pyrrolone,4-methoxy-2,5-dihydro0.20-2-甲基苯磺酰胺Benzenesulfonamide,2-methyl-0.232-环戊基环戊酮Cyclopentanone,2-cyclopentyl-0.09S-苯甲酰亚磺酰胺S-Benzoylsulfenamide-0.28环十一酮Cycloundecanone-0.139.杂环化合物Heterocyclic58.3162.623,5,6,7,8,8a-六氢-4,8a-二甲基-6-(1-甲乙烯基)-2(1H)萘酮2(1H)Naphthalenone,3,5,6,7,8,8a-hexahyd ro-4,8a-dimethyl-6-(1-methylethenyl)-0.082-己基-5-甲基-3(2H)-呋喃2-Hexyl-5-methyl-3(2H)-furanone0.18-6.酸类Acid1.111.283-甲基苯并呋喃Benzofuran,3-methyl-0.170.214-甲基苯丁酸Benzenebutanoic acid,4-methyl-0.18-2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃7-Benzofuranol,2,3dihydro2,2-dimethyl-0.30庚酸酐Heptanoic anhydride0.170.22二苯并呋喃Dibenzofuran-0.996-氧基十二烷二羧酸6-Oxododecanedioic acid0.11-2-(甲硫基)苯并噻唑Benzothiazole,2-(methylthio)-0.440.86十二酸Dodecanoic acid0.15-苯并噻唑Benzothiazole38.8741.32十三酸Tridecanoic acid0.17-苯并噻唑酮Benzothiazolone15.2815.755-羟基-6-甲基-3,4-吡啶二羧酸5-Hydroxy-6-methyl-3,4-pyridinedicarboxylic acid0.20-2-巯基苯并噻唑2-Mercaptobenzothiazole0.540.43硫代苯甲酸Benzoic acid,thio-0.932-巯基苯并咪唑2-Benzimidazolethiol0.32-十二烯基丁二酸酐2,5-Furandione,3-dodecenyl-0.132-(乙氨基)苯并噻唑Benzothiazole,2-(ethylamino)-1.762.584-苯腈氧基乙酸Benzeneacetic acid,4-cyano-.alpha.-oxo-0.13-2-羟基-4-二氟甲氧基嘧啶2-Hydroxy-4-difluormethoxypyrimidine-0.187.酯类Ester30.4826.39异喹啉Isoquinoline0.28-环己基异氰酸酯Cyclohexane,isocyanato-0.120.145H-茚1,2-b吡啶5H-Indeno1,2-bpyridine0.31-环己基异硫氰酸酯Cyclohexane,isothiocyanato-2.861.592,2,4-三甲基-1,2-二氢喹啉Quinoline,1,2-dihydro-2,2,4-trimethyl-0.16-庚酸烯丙酯Allyl enanthate0.21-10.其它Others0.311.42苯甲酸甲酯Methyl benzoate1.01-4,4,5,7,8-五甲基二氢香豆素4,4,5,7,8-Pentamethyl-2-chromanone0.310.61甲基二乙基二硫代氨基甲酸酯Carbamodithioicacid,diethyl-,methylester0.15-2-(甲硫基)苄腈2-(Methylthio)benzonitrile-0.27亚氨基二硫代碳酸甲基二甲酯Carboni-midodithioic acid,methyl-,dimethyl ester0.270.66甲基-4-O-辛基-a.-D-吡喃葡萄糖苷.alpha.-D-Glucopyranoside,methyl-4-O-octyl-0.54注-未检测到。 Note:-:not detected.3讨论本试验结果表明，大葱根系分泌物对黄瓜种子萌发和芽苗生长均呈现低浓度促进、高浓185度抑制的作用，与茄子（张凤丽等，xx）、大蒜（周艳丽，xx）等的研究结果一致。 但在研究分蘖洋葱根系分泌物对黄瓜的化感作用时发现，随着浓度升高，对胚根、胚芽生长的促进作用增强（杨阳，xx）。 上述结果的差异，可能由于作物种类（包括供体和受体）不同，而且采用不同的根系分泌物收集方法，获得根系分泌物的物质构成和浓度也不一样。 枯萎病是黄瓜连作障害的主要原因。 本试验中，随着大葱根系分泌物浓度的升高，对黄190瓜枯萎病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用逐渐增强，这与分蘖洋葱（杨阳，xx）、大蒜根系分泌物（周艳丽，xx）对枯萎病原菌化感作用的研究结果一致。 葱蒜类作物的根系分泌物可以明显抑制枯萎病病原菌生长和繁殖，这是合理轮作有效减轻瓜类蔬菜土壤连作障害的重要原因之一。 孔垂华等 （xx）认为，LC/MS是研究作物根系分泌物最理想的手段。 但是，何海斌195中国.paper.-8-科技论文在线等 （xx）指出，分析根系分泌物粗提物时，通常会出现几十个检测峰，且大多是物，故利用有谱图库的GC/MS进行前期检测更为可行。 本试验的研究对象是大葱根系分泌物中容易气化的小分子物质，因此利用GC/MS分析方法是可行的。 本试验结果表明，大葱根系分泌物中含有烃类、醇醚类、酚类、萘类、醛酮类、酸类、酯类、酰胺类以及杂环化合物等物质。 其中，苯并噻唑及其衍生物、邻苯二甲酸酯类物质相200对含量较高，是具有化感潜力的物质组分。 前人研究表明，邻苯二甲酸二丁酯是辣椒和茄子根系分泌物中的主要化感物质，对黄瓜种子萌发及幼苗生长有显著促进作用，且具有抑菌作用（耿广东等，xx；李轶修等，xx；周宝利等，xx）；苯并噻唑及其衍生物是分蘖洋葱根系分泌物中的重要组分（何海斌等，xx），具有抗菌、杀虫、除草、调节植物生长等生物活性（洪艳平等，xx）。 205大葱根系分泌物中的2,2-亚甲基双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、苯甲酸苄酯、苯甲酸-4-甲基苯酯、2-甲硫基异硫氰酸苯酯相对含量较低，但也是具有化感潜力的物质组分。 2,6-二叔丁基苯酚、2,6-二异丙基苯酚是茄子和大蒜根系分泌物中的化感物质，对萝卜有显著化感作用，且对茄子幼苗光合作用和荧光参数有显著影响（郁继华等，xx；周艳丽，xx）。 苯甲酸、肉桂酸及其衍生物是黄瓜和豌豆根系分泌物中的化感物质，对黄瓜和豌豆存在自毒作用210（Yu&Matsui，1994，1999）；苯甲酸苄酯是茄子根系分泌物中的化感物质，可提高茄子对黄萎病的抗性，促进茄子种子萌发和幼苗生长（周宝利等，xx）。 异硫氰酸酯类衍生物是十字花科植物中的化感物质，具有一定的抑菌作用（Yamane etal.，1992；Olivier etal.，1999）。 大葱根系分泌物中的上述物质均可能是具有化感潜力的成分，但究竟以哪些组分为主尚需通过进一步试验确定。 215参考文献(References)1Bertin C,Yang XH,Weston LA.The roleofrootexudates and allelochemicals inthe rhizosphere.Plant andSoil(J),xx,256:67-832耿广东,张素勤,程智慧.辣椒根系分泌物的化感作用及其化感物质分析.园艺学报(J),xx,36 (6):220873-8783Hao ZP,Wang Q,Christie P,Li XL.Allelopathic potentialof watermelontissues androotexudates.Scientia Horticulturae(J),xx,112 (3):315-3204何海斌,陈祥旭,林瑞余,林文雄,何华勤,贾小丽,熊君,沈荔花,梁义元.化感水稻PI312777苗期根系分泌物中化学成分分析.应用生态学报(J),xx,16 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