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文档简介

实验三外周血单个核细胞分离 实验目的 掌握外周血单个核细胞分离的原理与操作掌握外周血单个核细胞的概念 实验原理 人外周血单个核细胞 peripheralbloodmononuclearcell PBMC 包括淋巴细胞和单核细胞 单个核细胞的体积 形态和比重与外周血其他细胞不同 因此利用一种介于1 075 1 090之间的聚蔗糖 泛影葡胺 ficoll hypaque 分离液作密度梯度离心 离心后不同比重的血细胞在分离液中呈梯度分布 从而分离出PBMC 人血液中各种细胞的密度如下 红细胞 1 093白细胞 1 092淋巴细胞和单核细胞 1 075 1 090血小板 1 030 1 035 F H 1 077 0 001 实验步骤 1 用抗凝管抽取外周血2ml 2 将装有2ml分离液的试管微微倾斜 用吸管将抽取的抗凝外周血缓缓加入到分离液上层 保持液面分层清晰 3 水平离心机中离心 2000rpm 20min 4 将离心好的试管轻轻拿出 用毛细吸管吸取PBMC层细胞涂片 5 将涂片进行瑞氏染色 抗凝血 分离液 血浆 PBMC 分离液 红细胞白细胞
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