果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量及生产性能的影响.doc

果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量及生产性能的影响中国畜牧杂志2005年第41卷第12期11果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量及生产性能的影响易中华.一,胥传来,计成,马秋刚,陈旭东(t.中国农业大学动物科技学院,北京100094;l2.江西农业大学动物科技学院,江西南昌330045;3.江南大学食品学院,江苏无锡214036)摘要:本试验选用360只1日龄AA肉公鸡,通过在饲粮中添加果寡糖和枯草芽孢杆菌,考察其对内鸡肠道茵群数量及生产性能的影响.结果表明:果寡糖和枯草芽孢杆茵具有选择性地增加肉鸡盲肠中的乳酸杆茵等有益茵群的数量,减少大肠杆菌和沙门氏茵等有害茵的数量,二者的配合使用可以更好地调节肉鸡肠道微生态系统.果寡糖和枯草芽孢杆菌能在一定程度上改善肉鸡的生产性能,取得与添加金霉素相似的效果;果寡糖和枯草芽孢杆菌的配合使用可以取得更好的抗腹泻和促生长效果.关键词:畜牧学;果寡糖;芽孢杆菌;生产性能;肠道茵群数量;肉鸡中图分类号:$831.5文献标识码:A文章编号:0258.7033(2005)12.0011-04绿色和环保是21世纪畜牧业发展的主题,寻求和应用抗生素替代品理应成为科研人员和畜牧业工作者的重要任务.因此,无污染,无残留,无三致的新型绿色添加剂应运而生.寡糖和益生素便是其中的典型代表,二者都具有调节动物消化道微生态环境的作用,但作用机制不同.近年来,研究人员结合寡糖和益生素的优点,研制出由二者组合收稿日期:2004.06.08;修回日期:2004.10.18*通讯作者而成的合生元.本试验的目的是研究饲粮中添加果寡糖,枯草芽孢杆菌及其二者的合剂对肉鸡肠道菌群数量和生产性能的影响,为调控畜禽肠道微生态环境提供参考.1材料与方法1.1试验动物与试验饲粮选用360只1日龄AA肉公鸡,随机分成5个处理组,每个处理设6个重复,每个重复12只鸡.试验饲粮分别为:基础饲粮(对照组);基础饲粮+0.3%果寡糖;基础饲粮+0.1%枯草芽孢杆菌;基础饲粮+0.3%果寡._?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?_?H?_?_?_?_?_?_?_._.EffectofAcemannanfromAIoeveraontheContentofcAMP/cGMPandImmuneFunctionofBroilersJIANGLin,FENGYuan.zhang3,WangQin3,ZHOUXinting,YANGDe.po(1.CollegeofPharmaceuticalSciences,ZhongshanUniviersity,GuangdongGuangzhou510080,China;2.GuangdongQingyuanPharmaceuticalGroupCompanyLimited,GuangdongQingyuan511515,China;3.ZhongkaiCollegeofAgricultureandTechnology,GuangdongGuangzhou510080,China)Abstract:TheeffectsofdietaryacemannanfromAloeveraonthecontentofcAMPandimmunefunctionofbroilerwerestudied.Theresultsshowedthataloegel,polysaccharidandacemannanincreasedsignificantlytheweishtofbroilerchickensandtheirlivers,thecAMPandcGMPlevelinbloodplasmaandlivers,andtheratioofcAMP/cGMP(P<0.05).After7daysinjectingSRBCwiththefirstimmune.thecontentofantibodyandIgGattainedpeakvalue.Com-paredwithcontrolgroups,thecontentofantibodyandIgGofvaccinegroupswerehigherandhadsignificantdifference(P<0.01)after7,11and14dayswiththefirstlyimmunization.ThecontentofantibodyandIgGattainedpeakvalueandkeptthehighlevelafter4dayswiththesecondaryimmunization.AndacemannanfromAloeveraobviouslyenhancedtheantibodylevelofbroilerchickensonNDV,strongeredtheimmunologicresponseofbroilerchickenstoNDV.TheseresearchesindicatedthattheacemannanfromAloeveraCanimprovetheimmunefunctionofbroilerchickens.Keywords:animalscience;acemannan;immunefunction;broiler:12鞋黛赋敏中国畜牧杂志2005年第41卷第12期糖+0.i%枯草芽孢杆菌;基础饲粮+150mg/kg金霉素(有效成分为15%).基础饲粮参照NRC(1994)家禽营养需要量标准,见表1.试验鸡自由采食和饮水,饲养管理和免疫程序参照有关文献资料进行.试验地点为北京农学院实验鸡舍.i.2果寡糖和枯草芽孢杆菌果寡糖由江南大学食品学院提供,组分按HPLC法测定uj为:单糖1.83%,蔗糖1.13%,蔗果三糖39.81%,蔗果四糖49.78%,蔗果五糖7.06%;枯草芽孢杆菌为本课题组跨越计划项目安全畜牧微生物饲料生产与使用技术(中试)科研成果,枯草芽孢杆菌总含量(605)亿/g.表1不同生长阶段肉鸡基础饲粮组成和营养水平注:禽用多维预混料可为每千克全价料提供:维生素A5500IU,维生素D3650IU,维生素E35mg,维生素K32.5mg,核黄素7.5mg,泛酸18.6mg,尼克酸45.0mg,生物素0.25mg,维生素Bl2100Fg;微量元素预混料可为每千克全价料提供:锰180mg,铁240mg,锌120mg,铜25mg,碘0.3mg,硒0.5mg;粗蛋白,钙为实测值,其他指标为计算值1.3测试指标及方法1.3.1生产性能于0,3,6周龄时分别按每个重复进行称重;于3,6周龄末时按重复结算饲料消耗量.以重复为单位分别计算各处理组肉鸡的平均日增重,平均日采食量和饲料转化率.每日定期观察试验鸡的健康状况,记录腹泻鸡数和死淘数,腹泻的标准为在泄殖腔El可见明显的干或稀湿粪便黏附.以重复为统计单位,分别计算各处理组试验鸡的腹泻率和死淘率.1.3.2肠道菌群数量分别从21日龄和42日龄各处理组中随机选取6只试鸡,肌肉注射戊巴比妥酸钠麻醉后,迅速解剖,截取盲肠末端2cm肠段,液氮保存至实验分析.将样品从液氮中取出,在超净操作台内进行1010倍比稀释.本试验拟测定肉鸡盲肠内容物中大肠杆菌,沙门氏菌,总需氧菌和乳酸杆菌的数量.大肠杆菌,沙门氏菌和总需氧菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)各200,uL分别接种于伊红美兰琼脂,SS琼脂和营养琼脂培养基平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,在37生化培养箱中有氧培养24h后菌落计数.乳酸杆菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)200ttL接种于乳酸杆菌选择性培养(LBS)平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,将培养平皿置于自制厌氧罐中,在37生化培养箱中培养48h后进行菌落计数.平皿培养后,选择最适宜的稀释梯度(以长30300个菌落为宜),对4种微生物进行平板菌落计数,求其平均值并计算每克肠道内容物所含的细菌数(LgCFU/g).1.4数据处理采用SPSS11.0软件,对所有试验数据进行单因素方差分析,差异显着者再作Duncan氏多重比较.2结果与分析2.1果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响由表2可见,果寡糖,枯草芽孢杆菌和果寡糖+枯草芽孢杆菌均显着(P<0.05)提高肉鸡生长全期(06周龄)的平均日增重,但果寡糖对03周龄肉鸡平均日增重的影响不明显;抗生素虽然显着(P<0.05)提高03周龄肉鸡的平均日增重,但这种影响未能在36周龄和06周龄表现出来.果寡糖,枯草芽孢杆菌,果寡糖+枯草芽孢杆菌和抗生素均显着(P<0.05)改善肉鸡生长全期(06周龄)的饲料转化率;与果寡糖,枯草芽孢杆菌和果寡糖+枯草芽孢杆菌不同的是,抗生素对饲料转化率的影响主要体现在03周龄阶段.各处理组之间平均日采食量的差异均不显着(P>0.05).各处理组肉鸡的腹泻主要出现在03周龄;腹泻率以抗生素组为最低,枯草芽孢杆菌组和果寡糖+枯草芽孢杆菌组其次,果寡糖组则与对照组差异不显着(P>0.05).本试验肉鸡的死淘率都很低,仅有零星个例发生,各处理组之间差异均不显着中国畜牧杂志2005q-g41卷第12期霸睡13注:同行数据肩注字母不同者表示差异显着(P<0.05),未标注或字母相同表示差异不显着(P>0.05).下表同(P>0.05).具体数据见表2.2.2果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量的影响果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡盲肠微生物的影响较为相似,二者都减少肉鸡盲肠中的总需氧菌,大肠杆菌和沙门氏菌的数量,增加乳酸杆菌的数量;随着肉鸡的生长,这种作用更加明显,但在3周龄末,果寡糖组肉鸡盲肠中的总需氧菌和大肠杆菌的数量尚无显着减少;另外,果寡糖和枯草芽孢杆菌之间还具有一定的协同作用.与果寡糖和枯草芽孢杆菌不同的是,金霉素对肉鸡盲肠微生物中的总需氧菌,大肠杆菌,沙门氏菌和乳酸杆菌都具有显着的抑制作用.结果见表3.表3果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡盲肠菌群的影响LgCrU?g一3讨论肠道菌群存在于宿主动物的消化道中,受饲料和环境等因素的影响而发生变化.抗生素早在20世纪40年代就开始用于调控畜禽消化道微生物区系,曾对饲料工业的发展起到重要推动作用.现有的科研和生产都表明,抗生素不但在促生长机理方面不明确,而且在实际应用中还存在一系列以下问题,如残留,耐药性,二重感染和降低机体免疫力等,其应用受到了很大的限制.因此,研制安全性高的抗生素和抗生素的替代品已成为研究热点.国内外众多报道认为,果寡糖,益生素及其合生元等微生态制剂能够调控畜禽消化道微生态环境,提高其生产性能和改善机体健康状况_2j.在本研究中,果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡盲肠微生物的影响较为相似,而与金霉素有较大的不同.这两种添加剂都减少肉鸡盲肠中的总需氧菌,大肠杆菌和沙门氏菌的数量,增加乳酸杆菌的数量;而且随着肉鸡的生长,这种作用更加明显.据报道,芽孢杆菌可14中国畜牧杂志2005年第41卷第12期使胃肠道内有益菌如乳酸杆菌和链球菌的数量增加,这些细菌会产生大量的有机酸使肠道内pH下降,从而抑制胃肠道内病原菌的繁殖;而且有报道已从芽孢杆菌中分离出杆菌肽,这也可抑制病原菌的繁殖.芽孢杆菌虽然耐热,有利于饲料加工,但由于不是畜禽消化道主要正常菌群,在消化道内发芽和定植不稳定,使其推广应用受到一定的限制.果寡糖是一种非消化寡糖,不能被单胃动物体内分泌的消化酶分解,只能以未降解的形式进入后段肠道被乳酸杆菌和双歧杆菌等有益微生物分解利用,使肠道有益微生物得到大量繁殖,成为肠道内优势菌群;几乎不能被有害菌(如大肠杆菌,沙门氏菌等)利用;从而维持了肠道菌群的平衡,促进了动物的健康;而且寡糖具有低热,稳定,无残留和耐药性等优点,是一种很有开发潜力的绿色饲料添加剂.在本研究中,果寡糖对肉鸡盲肠大肠杆菌和总需氧菌的抑制作用在3周龄以前并不明显,而在肉鸡生长后期才表现出来,可能是由于果寡糖对宿主消化道微生物区系的调控需要一定的时间,这与Houdk等(1998)83报道类似.非消化性寡糖(NDOs)和能降解NDOs的益生素配合使用,能很好地控制肠道微生态系统,由于这些益生菌与肠道固有菌产生竞争性的酵解作用,从而使益生菌在通过上段肠道时存活率得到改善,结肠微生物的定植率提高,增强了NDOs对内源和外源菌生长及活性的刺激作用.因此,合生元结合了寡糖和益生素的优点,被看作是一种很有开发潜力的绿色饲料添加剂,使用效果优于抗生素.本研究由果寡糖和枯草芽孢杆菌组成的合剂是一种简单的合生元,对肉鸡盲肠菌群的作用效果最佳.参考文献:1甘宾宾.高效液相色谱法测定低聚果糖的组分J.色谱,1999,17(1):87.89.2GatiL.EffectofLactosaccaddedtosoworpigletdietsA.ProceedingsofAlhechs8thAnnualSymposiumC.Nicholasville,Kentucky,USA.1992.3McGinnisK.Lacto.saccversusBacitracininbroilerstarterdietsA.ProceedingsofAlltechs8thAnnualSymposiumC.AlhechTechnicalPublications.Kentucky,USA.1992.4ScheuermannSE.EffectofprobioticsonenergyandproteinmetabolismgrowingpigsJ.AnimFeedSciTechnol,1993,41:181.189.5潘康成,杨汉博.饲用芽孢菌作用机理的研究进展J.饲料工业,1997,18(9):32.34.6仇丽.枯草芽孢杆菌在养殖中的应用J.渔业现代化,2002,(4):26.7陈旭东,马秋刚,计成,等.芽孢杆菌的果寡糖制剂对断奶仔猪肠道菌群的影响J.中国饲料,2O03,(18):11.13.8HoudijkGM,BoschMW,VerstegenHJ.EffectsofdietaryoligosaccharidesonthegrowthperformanceandfaecalcharactefisticofyounggrowingpigsJ.AnimFeedSciTechnol,1998,71:35.48.EffectsofFructo-oligosaccharideandBacillusSubtilisOnPerformanceandIntestinalMicroflorainBroilersYIZhong.hua,XUChuan.1ai,JICheng,MAQiu.gang,CHENXu.dong(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JiangxiAgriculturalUniversity,JiangxiNanchang330045,China;3.CollegeofFoodScience,SouthernYangtzeUniversity,JiangsuWuxi214036,China)Abstract:Atotalof360newly.hatchedAAbroilerswereselectedtoinvestigatetheeffectsoffmcto.oligosaccharideandbacillussubtilisonperformanceandintestinalmicro