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文档简介
实验误差及其控制 生理学教授秦晓群 一 误差公理与误差的表达1 误差公理误差 测定值与真实值之差实验结果都会有误差 误差自始至终存在于一切科学实验过程 人们认识能力与科学技术水平的限制 测量方法与工具的有限性 抽样误差不可避免性等 2 误差的分类产生原因与性质分为 随机误差 系统误差 过失误差 误差的来源 自然误差 人为误差 误差的可控性 可避免的误差 易控制 不可避免的误差 不易控制 3 误差的表达 精密度 重复性 同一方法重复测定同一样品 测定值的一致程度 衡量指标 标准差 S 变异系数 CV CV S X 100 例 重复测定某样品 n 10 x 7 120 s 0 155CV 2 18 例 高效液相色谱测定阿米替林 要求 无机分析 1 生化 免疫分析5 10 生物活性分析10 15 准确度 测定值与真实值的接近程度 偏差系数 CB CB 100 R R VP VB VA 100 R 回收率VA 加入标准量 VB 未加标准量前的测定值VP 加入标准量后的测定值 回收量 VP VB如 5次测定血清某物质的均值为15mg L 加入该物质标准量10mg L 则得均值为24 5mg L 计算回收率 R 24 5 15 10 100 95 范围 100 1 10 如 高效液相色谱测定阿米替林 回收率 95 8 101 0 偏倚 系统误差 如某抗菌药物标准品100mg连续5次称重 天平正确 技术熟练99 99 100 01mg天平正确 操作不熟练98 00 102 00mg天平不正确 操作熟练94 99 95 01mg天平不正确 操作不熟练93 00 97 00mg 偏倚 不偏倚 精密 不精密 不正确 不正确 正确 不正确 民兵实弹射击命中靶心图 精确度 精密度与准确度的综合指标 分析系数 CA CA 100 CV 2 CB 2 二 随机误差特点 双向性 分布随机性 不可避免性和可减性原因 1 抽样误差2 非均匀误差 受试对象性别 年龄 生活习惯 工作条件 居住环境 3 分配误差 受试对象组间分配 4 分野误差 细胞计数 5 偶然误差 黑子爆炸 影响电生理 减少随机误差的主要方法 随机化和对照原则 2 分层抽样 3 交叉实验 4 盲法 5 调整样本的大小和适当增加重复数Sx s n 增大样本数 减少标准误增加重复数 平行管 三管测定 减少标准误 增加重复数减少标准误 三 系统误差特点 单向性 恒差和 或恒比 可消性 表现形式 1 恒定系统误差 偏向真实值的一侧 仪器末校正 样品处理2 线性系统误差 测定时间与空间顺序 生物物质效应 药物作用 酶催反应 测定值与时间有关 肌肉疲劳实验 开始收缩幅度大 密集 一段时间后 收缩幅度小 间歇加大 3 非线性系统误差测定时间延续而呈曲线变化或周期性变化糖皮质激素分泌 上午8 10点分泌高峰 午夜12点最低 月经周期 雌激素变化 系统误差的原因 仪器误差 仪器损耗 未校正 方法差异 采用方法不同 如微量蛋白质测定有化学分析法 放免法与ELISA法 样品处理方法不同 浓度 PH 温度 作用时间等 试剂差异6级 保证试剂 GR 必需时用 分析试剂 AR 科研用 化学纯 CP 实验室试剂 LR 中学生用 生物试剂 BR 工业试剂 浓硫酸 重铬酸盐 条件差异受试对象环境条件 动物 气候 季节 温度 湿度通风 照明 营养状况 病人 湿度 温度 通风 照明 饮食 服务态度 实验室环境条件 季节变化 湿度 顺序差异a 个体生物钟现象 昼夜 季节 近海地区潮汐的涨落变化 睡眠与觉醒 体温 血压 心率 血浆中激素水平等BP HR 上午9 00 10 00最高 凌晨3 00最低犬冠脉左旋支的血流量 16 00比上午8 00高12 8 血小板聚集性 上午6 9时 聚集性显著增强心肌梗死和心源性猝死 早晨醒后死亡率明显增加 9 00 10 00高峰皮内注射致敏原后局部发红的范围 午夜反应最强 中午11时最轻吲哚美辛口服后浓度 早晨7时 晚间19时利多卡因局部麻醉持续时间 早晨7时20min 下午3时52minb 反应速率变化酶催反应c 工作人员精神状态 精神集中观察仔细 人为差异技术误差 实验人员的技术水平 经验 1 选用的方法不当 模型 指标 兔心脏不具有黄嘌呤氧化酶大鼠呕吐反射差豚鼠侧支循环丰富心肌细胞培养基CPKt1 27h LDHt1 224h心肌缺血再灌注损伤诱发心律失常 缺血10min 功能抑制 30min 2 量与时间概念不强样品采集时间 运送及保存不当a 血液标本放置时间过长 酶活性降低 b 曝光 血液 尿液物质浓度变化 化学法测定SOD与光照时间有关 分光法测CPK单位时间生成产物 c 开口器皿 蒸发 3 检验质控不严 方法质控 消除系统误差的基本方法1 控制环境条件 受试对象环境条件 实验室环境条件 2 正确选用现代检测指标 了解原理 灵敏度 注意事项 适应范围 3 保证检测仪器的准确性4 保证试剂质量5 采样方法 样品制备 储藏标准化 预试 掌握方法 6 注意药物或其他因素的干扰 处理因素之相互作用 7 固定检测实验人员8 校正办法 找不出原因 回归方程校正 四 过失误差特点 多为远离性 可杜绝 不遵守随机化分组原则 主观选择研究对象 技术路线不清 记录错误 计算错误 责任心不强 措施 责任感 严格工作制度 五 估计误差收集资料和记录数据 主观偏性 偏爱高 或低 的数据阳性反应数较多时将似是而非的反应判断为阳性暗示病人数据处理与分析 统计结果与愿望不一致时 种种理由否定 统计结果与愿望相符时 存在影响因素的结果加以辩解措施 单盲或双盲坚持严肃的态度 严格的方法 严谨的作风 六 误差的考核1 随机误差与系统误差的判别随机误差与系统误差同时存在 系统误差 随机误差 找出系统误差
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