理学-珍珠层粉在化妆品中的应用

序号： 编码： 第九届“挑战杯”广东大学生课外学术科技作品竞赛作品申报书 作品名称： 珍珠层粉在化妆品中的应用 学校全称： 华南农业大学 申报者姓名 （集体名称）： 罗善锴 罗冠生 林韶芸 类别：自然科学类学术论文 哲学社会科学类社会调查报告和学术论文 科技发明制作A类 科技发明制作B类 报送方式：省级报送作品高校直送作品说 明1.申报者应在认真阅读此说明各项内容后按要求详细填写。2申报者在填写申报作品情况时只需根据个人项目或集体项目填写A1或A2表，根据作品类别（自然科学类学术论文、哲学社会科学类社会调查报告和学术论文、科技发明制作）分别填写B1、B2或B3表。所有申报者可根据情况填写C表。3.表内项目填写时一律用钢笔或打印，字迹要端正、清楚，此申报书可复制。4.序号、编码由第九届“挑战杯”广东大学生课外学术科技作品竞赛组委会填写。5学术论文、社会调查报告及所附的有关材料必须是中文（若是外文，请附中文本），请以4号楷体打印在A4纸上，附于申报书后，字数在8000字左右（文章版面尺寸14.522cm）。6作品申报书须按要求由各省或各校竞赛组织协调机构统一寄送。7.其他参赛事宜请向本校竞赛组织协调机构咨询。A2申报者情况（集体项目）说明：1必须由申报者本人按要求填写；2申报者代表必须是作者中学历最高者，其余作者按学历高低排列；3本表中的学籍管理部门签章视为申报者情况的确认。申报者代表情况姓名罗善锴性别男出生年月1984.06学校华南农业大学系别、专业、年级理学院04级应用化学学历本科学制四年入学时间2004.09作品名称珍珠粉酶液在化妆品中的应用毕业论文题目通讯地址华南农业大学华山学生宿舍19栋410室邮政编码510640办公电住地通讯地址华南农业大学华山学生宿舍19栋410室邮政编码510640住宅电话02085285264其他作者情况姓 名性别年龄学历所在单位 罗冠生 男22 本科华南农业大学 林韶芸 女 22本科华南农业大学资格认定学校学籍管理部门意见以上作者是否为2006年7月1日前正式注册在校的全日制非成人教育、非在职的高等学校中国籍专科生、本科生、硕士研究生或博士研究生。是否 （部门签章）年 月 日院系负责人或导师意见本作品是否为课外学术科技或社会实践活动成果是否负责人签名：年 月 日B1申报作品情况（自然科学类学术论文）说明：1必须由申报者本人填写；2本部分中的科研管理部门签章视为对申报者所填内容的确认；3作品分类请按作品的学术方向或所涉及的主要学科领域填写；4硕士研究生、博士研究生作品不在此列。作品全称作品分类（D ）A机械与控制（包括机械、仪器仪表、自动化控 制、工程、交通、建筑等） B信息技术（包括计算机、电信、通讯、电子等） C数理（包括数学、物理、地球与空间科学等） D生命科学（包括生物、农学、药学、医学、健 康、卫生、食品等） E能源化工（包括能源、材料、石油、化学、化 工、生态、环保等）作品撰写的目的和基本思路作品介绍：本作品是用胰蛋白酶对珍珠（层）粉进行水解，获得含有多种氨基酸及微量元素的酶解液，并将酶解液应用于化妆品中，研发具有特殊功能的化妆品。通过实验，本作品预计可以达到以下目的：一、为工业生产珍珠(层)粉酶解液提供优异的实验数据（如反应温度、反应时间及催化剂等等），节省工业生产成本，提高珍珠有效成分的提取率;二、为珍珠在医疗、健康等方面的应用提供前提基础;三、利用珍珠含有的药用成分，开发具有特殊功能的化妆品（如消炎、去痘、消斑、美白、抗衰老等），保护人体皮肤健康。基本思路：珍珠层粉酶解液制备滤液成分检测酸解过滤珍珠层粉滤液成分检测滤渣酶酸 过滤滤渣合并两次滤液，浓缩，作为化妆品和医用的原料液。成品设计：营养液在水相配制成品配方设计配料乳化油相原料液配制成品功能性检测：去痘、美白、抗衰老等等成品质量标准及分析检测：稳定性、安全性等等作品的科学性、先进性及独特之处本作品在化妆品原料液的提取中采用方开泰和王元先生提出的均匀试验设计方法1，该方法是对多因素多水平的试验设计提出的，具有均匀好、试验次数少，预报准确等特点。广泛用于国防、工业等的试验设计。本实验采用该方法的设计思路：根据酸酶解珍珠（层）粉的反应因素、反应水平数及因素间可能存在的交互作用选择合适的均匀设计表，建立试验方案，通过实验、利用方差分析和回归分析法，建立数学模型，优化数学模型，从而预报较佳的实验条件和响应值（配方设计也会尝试用该方法进行设计）。一直来国内对珍珠的水解报道较多，但能检测出色氨酸的报道较少见，是因先用盐酸解珍珠使色氨酸受到破坏之故。色氨酸是一种衡量蛋白质品质的重要指标之一，是人体所必要的氨基酸。本实验采用酸酶水解法，再用High Pertormance Liquid Chromatography对酶解液的滤液进行分离及检测，用Atomic Emission Spectrometry等对酸解液的滤液进行微量元素的检测，有望检测出色氨酸及之前未能被检测出成份。成品方面的研究：在对水相与油相进行乳化的过程中，通过试验设计寻求最佳的剪切乳化速度、时间、压力、温度及剪切乳化机搅拌的方向，从而获得更稳定优质的乳化体。成品中的水相溶剂与油相溶剂经过乳化均匀混合后，水相中的营养成份通过透皮促进剂的促进而被皮肤吸收。作品的实际应用价值和现实意义因本实验在整个试验过程中对操作条件要求不高，对反应条件要求不苛刻，很适合对其放大进行工业上的批量生产，本实验的结果之一，珍珠（层）粉的酶解液可以广泛地应用于健康、医疗及食品工业等方面，本实验的最终结果，护肤系列产品，将对人体的皮肤起到增强免疫力、消斑、抗衰老等作用，进而保护人体皮肤健康。学术论文文摘贝壳珍珠层经研磨得到珍珠层粉，其成份组成和结构与珍珠非常相似，有研究机构对多种珍珠与贝壳珍珠层的碳酸钙含量、微量元素和氨基酸种类进行对比分析后认为：二者有相似的药理效用。目前，贝壳珍珠层并没有充分发挥其效用，只有少量贝壳被研磨成层粉出售，而大量的贝壳被人们所遗弃。贝壳珍珠层粉较珍珠的价格便宜得多，完全有可能用贝壳珍珠层替代名贵的珍珠，作为开发化妆品和保健食品的原料，这样可以大大降低成本，且较易为大众所接受。本文通过酸酶解的方法从贝壳珍珠层粉溶解碳酸钙和提取蛋白质，并对二者进行处理，从而得到浓缩了的营养液。并加入专为贝壳珍珠粉营养液所配的润肤露配方中，使其营养成份易于被人体吸收，从而提高贝壳珍珠层粉的利用价值。 作品在何时、何地、何种机构举行的会议上或报刊上发表及所获奖励鉴定结果请提供对于理解、审查、评价所申报作品具有参考价值的现有技术及技术文献的检索目录申报材料清单（申报论文一篇，相关资料名称及数量）科研管理部门签章 年 月 日C.当前国内外同类课题研究水平概述 说明：1.申报者可根据作品类别和情况填写； 2.填写此栏有助于评审。当前国内外同类课题研究水平概述珍珠是由贝体外套膜中的珍珠囊分泌的珍珠质沉积而成,而贝壳是直接由外套膜分泌产生的,二者的成分和结构非常相似。鉴于此,近 年来人们在对珍珠综合开发利用的同时,增加了对贝壳的研究,以期在利用方面以廉价的贝壳替代价值昂贵的珍珠,达到节约和开发并举的目的。（一）贝壳珍珠层的成分孙家美等曾用X射线荧光光谱仪法对25种淡水贝壳珍珠层进行了多种元素的检测,共检测出18种元素，尽管这些贝类生活环境、方式、个体大小、身体形状、珍珠层颜色等各不相同,但其元素组成却极为相似。主体元素是Ca,海产贝壳都含有Cl,有的还检测到Br和I。刘承松等人对大珠母贝和合浦珠母贝珍珠层进行的化学成分研究指出:无机灰分中含有16种无机元素,微量元素还有Pb、Ag、Ga、V。杜安道等用中子活化法分析出太湖产贝壳(不限于珍珠层)中存在21种元素。总之,贝壳珍珠层中一般含有Ca、Al、Cu、Fe、K、Na、Mg、Mn、Si、Sr、Cr、S、P等元素,取样地点不同，贝体种类和测试方法不同,元素的种类和含量有些许出入。就目前见到的研究珍珠层有机组成的文献(国内),只有有关氨基酸的报道证明氨基酸是贝壳珍珠层有机物组成的主体,且不下15种之多,以丙氨酸和甘氨酸为最多因测试的具体贝类不同,其种类和数量略有差异,氨基酸占整个珍珠层含量的1%5%有的文献指出,珍珠层中还含有多糖、色素等其它一些有机物,但具体的分离、测试尚未见报道。贝壳珍珠层主要由碳酸钙组成,约占整个贝壳组成的95%左右,以方解石和文石两个结晶相出现。陈贵卿等对21种贝类进行的X射线衍射分析发现,有的贝类珍珠层完全由文石组成,如背角无齿蚌、褶纹冠长蚌、黑珠母贝、合浦珠母贝、大珠母贝、珠母贝、企鹅珍珠贝等;而有的贝壳珍珠层则完全由方解石组成,如近江牡蛎,但这类种属极少。（二）贝壳珍珠层的形成学说（1）模板说 模板理论由Weiner等提出,经较多研究者完善,是影响最为广泛的理论,也是至今为止唯一试图从分子水平上解释珍珠层形成机制的。模板理论认为,当无机相的某一面网的结晶学周期正好与带活性基团有机基质的结构周期相匹配时,就会降低无机相晶体的成核活化能并诱导晶体沿该面网方向生长,从而导致晶体呈有序定向的结构。模板说较好地解释了珍珠层的结构特征,对珍珠层中文石晶体的受控成核、形貌及结晶学定向控制等问题给出了很好的解释,但对有机质对碳酸钙多型!珍珠层中文石的结晶学定向畴等的控制无法作出解释。（2）多模板二步成因假说张刚生在研究三角帆蚌时提出了其珍珠层的形成机制,认为,生物完成了棱柱层向珍珠层的过渡阶段后,珍珠层的形成经历了以下几个阶段: Ca2+的富集生物从环境中吸收的Ca2+经过复杂的代谢活动后一部分被搬运至外套腔中提供了部分Ca2+来源,棱柱层溶解提供了另一部分Ca2+来源新分泌的有机质的酸性域键合Ca2+,使Ca2+逐步富集形成凝胶初生珍珠层的形成主要受有机质及棱柱基底中晶体定向的控制碳酸钙凝胶在陈化结晶过程中形成文石,而文石晶体的定向受两种作用的控制:通过矿物桥,即有机质中的微小孔隙,文石晶体与棱柱层的晶体发生取向附生作用,即棱柱层中的晶体作为文石晶体生长的模板之一,结果可诱导出定向为主的晶体的定向生长;新分泌的有机质自组装成有序的模板,有机无机界面的识别诱导方向晶体的生长。同一层面晶体的生长受有机质界面识别作用成板片状,即在垂直方向生长受到抑制,横向方向正常生长,直到横向上晶体相互接触为止后继层面的生长与前一层面的生长受到同样的控制作用,但不经历凝胶阶段,直接从溶液中异相成核结晶文石晶体形状及粒度受有机质及文石晶体化学特征的控制。（三）在医药和化工方面的开发应用珍珠入药,有镇心定惊、清肝除翳、收敛生机之用。近年来随着珍珠医药保健品、饮品和化妆品的大量开发,珍珠的价格有升无降,于是人们就将开发的目光投向了成分与其相似的贝壳珍珠层。刘承松、谢玉坎等人对大珠母贝珍珠层的化学成分进行了系统研究后指出/大珠母贝、合浦珠母贝的贝壳珍珠层与其天然珍珠在化学组分上基本相似,少数无机元素的差异不足以影响其药用价值,用珍珠层代替珍珠入药,从化学组成的相似性这一点来看是合理可行的。上海测试技术研究所对多种珍珠及其贝壳珍珠层的主要成分、微量元素、氨基酸种类、含量进行对比分析后认为:二者有相同的药理效用,完全有可能用人们遗弃的贝壳珍珠层替代名贵的珍珠。卢慧卿专门对五种入药的珍珠母(贝壳珍珠层)中的微量元素的药理作用进行了研究,分别测定了其含量及对人体健康的作用王顺年等人研究了合浦珠母贝有效成分后认为:马氏珠母贝起药理作用的主要成分是朱磺酸、鸟氨酸,提出了辟合浦珠母贝全脏为药源的新建议。由于贝壳珍珠层含有丰富的氨基酸和许多人体必需的微量元素且价廉易得,成为开发高级化妆品的重要原料,在起到良好保健作用的同时也收到了客观的经济效益。据所查文献，珍珠层粉还能治疗复发性口腔溃疡、婴儿红臀、作为乳酸发酵中钙源添加剂，但还没有珍珠层粉水解液在化妆品中的应用。 参考文献：1 孙家美,毛振伟。贝壳珍珠层元素的X射线荧光光谱分析。湛江水产学院学报,1991,11(2):2530。2 刘承松,陈婉颜,谢窨玻等。大珍母贝贝壳珍珠层的化学成分研究。动物学杂志,1984,(4):79。3 陈贵卿等。珍珠类化妆品的鉴别。中国海洋药物,1990,(2):4548。4 吴晓京,陈贵卿等。珍珠和珍珠贝壳的显微结构。无机材料学报,1990,5(3):272276。5 冯庆玲等。贝壳珍珠层中文石晶体的取向畴。材料科学,1997,(4):210213。6 周恩贵等。贝壳珍珠层织构的测定。物理,1985,14(1):2930。7 陶 靖,徐治庄等。珍珠和贝壳珍珠层的傅里叶变换红外光谱研究。光谱学与光谱分析,1998,18(3):307310。8张秀英,廖照江,杨林,等.环糊精与碳酸钙结晶的相互作用J.化学学报,2003,61(1):699陈斌,彭向和.生物自然复合材料的结构特征及仿生复合材料的研究J.复合材料学报,2000,17(3):5910郭香华,等.陶瓷叠层结构增韧设计的数值模拟及实验研究J.硅酸盐学报,2000,28(3):234D.推荐者情况及对作品的说明说明：1由推荐者本人填写； 2推荐者必须具有高级专业技术职称，并是与申报作品 相同或相关领域的专家学者或专业技术人员（教研组 集体推荐亦可）； 3推荐者填写此部分，即视为同意推荐； 4推荐者所在单位签章仅被视为对推荐者身份的确认。推荐者情况姓 名性别年龄职称工作单位通讯地址邮政编码单位电话住宅电话推荐者所在单位签章 （签章） 年 月 日请对申报者申报情况的真实性作出阐述 请对作品的意义、技术水平、适用范围及推广前景作出您的评价其它说明推荐者情况姓 名性别年龄职称工作单位通讯地址邮编单位电话住宅电话推荐者所在单位签章 签章日期 年 月 日 请对申报者申报情况的真实性作出阐述 请对作品的意义、技术水平、适用范围及推广前景作出您的评价其它说明学校组织协调机构确认并盖章 （团委代章） 年 月 日 校主管领导或校主管部门确认盖章 年 月 日 各省（区、市）评审委员会初评意见 评委签名： 年 月 日 各省（区、市）组织协调委员会审定意见 团 委 科 协 教 育 厅 学 联（签章） （签章） （签章） （签章） 年 月 日E大赛组织委员会秘书处资格和形式审查意见组委会秘书处资格审查意见 审查人（签名） 年 月 日组委会秘书处形式审查意见 审查人（签名） 年 月 日组委会秘书处审查结果合格 不合格 负责人（签名） 年 月 日F参赛作品打印处珍珠层粉在化妆品中的应用作者：罗善锴 罗冠生 林韶芸 指导老师：何庭玉 副教授 （华南农业大学理学院） 华南农业大学理学院，广州，510640摘要：贝壳珍珠层经研磨得到珍珠层粉，其成份组成和结构与珍珠非常相似，有研究机构对多种珍珠与贝壳珍珠层的碳酸钙含量、微量元素和氨基酸种类进行对比分析后认为：二者有相似的药理效用。目前，贝壳珍珠层并没有充分发挥其效用，只有少量贝壳被研磨成层粉出售，而大量的贝壳被人们所遗弃。贝壳珍珠层粉较珍珠的价格便宜得多，完全有可能用贝壳珍珠层替代名贵的珍珠，作为开发化妆品和保健食品的原料，这样可以大大降低成本，且较易为大众所接受。本文通过酸酶解的方法从贝壳珍珠层粉溶解碳酸钙和提取蛋白质，并对二者进行处理，从而得到浓缩了的营养液。并加入专为贝壳珍珠粉营养液所配的润肤露配方中，使其营养成份易于被人体吸收，从而提高贝壳珍珠层粉的利用价值。 关键词：珍珠层粉 酶解液 凯氏定氮法 化妆品1 前言珍珠是一种非常重要的中药材，也是一种高贵的水产品，在我国已有两千多年的使用历史。本草纲目载“珍珠涂面，令人润泽好颜色。珍珠涂手足，去皮肤逆胪 , 能化面去黯 , 令光泽洁白”。据文献报道，珍珠含有的主要成分为碳酸钙、微量元素和有机物，而有机物中主要组成是角壳蛋白，角壳蛋白由多种氨基酸组成，主要有谷氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、亮氨酸、赖氨酸、精氨酸、门冬氨酸14。微量元素主要有铁、锌、钴、铬、锰、锶和镍等。我国珍珠资源十分丰富。目前，中国淡水珍珠年产量过1200吨，成为世界第一产珠国，而贝壳珍珠层作为珍珠生产的副产物，其年产量也很大。有资料报道，贝壳珍珠层的主要成分与珍珠相似，同样含有碳酸钙、有机物和微量元素，且二者的药效作用也相当5。由于珍珠比较难以养殖且价格比较昂贵，珍珠层粉价格比价便宜，而珍珠层粉和珍珠粉的药效成分相差不大。越来越多人把珍珠层粉运用于美容科学上。一般珍珠层粉有两种用法：口服和外敷。据文献报道6，用珍珠层粉外敷治疗青春期痤疮临床实验治愈例为76以上。广州第一人民医院中医科也用珍珠层粉外敷辅助清痘饮治疗青春期痤疮63例，有效率达937。可见珍珠层粉药效功效之大。珍珠层粉外敷的一般用法是用水调成糊状涂于患处或做成面模敷于脸上，许多有效成分被不溶于水的碳酸钙所包围，不能被皮肤很好的吸收；时常要调糊成模，使用起来不方便。因此珍珠层粉的进一步开发利用显得很有必要。本实验通过酸酶解反应，使不溶的碳酸钙转化为钙离子、角壳蛋白转化为氨其酸和小肽，所以酶解酸解后的珍珠层粉不受碳酸钙和有机物颗粒的影响，应用于护肤品中更能被皮肤吸收，使用起来也较为方便。它的保健功效是:去痘、消斑、增白、嫩肤。2 实验部分2.1原料、试剂和仪器 珍珠层粉，购于湛江银浪海洋生物技术有限公司，批号：20060701 乳酸，分析纯（天津市化学试剂一厂）批号：060417 胰蛋白酶，活力为10001500u/mg（上海源聚生物科技有限公司）批号：060528 FOSS KjeltexTM 2200自动凯氏定氮仪电子分析天平，Produce by Metler-Toledo Group OJ90 电动搅拌器（天津欧诺仪器仪表有限公司） SY12电热式恒温水浴锅（天津欧诺仪器仪表有限公司） JRJ3001剪切乳化搅拌机（上海标材模型厂） 台式离心机（上海安亭科学仪器厂） 电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司） 其他试剂均为国产分析纯1.2 珍珠层粉样品分析1.2.1 珍珠层粉的钙含量测定准确称取0.4542g珍珠层粉，并将其溶于蒸馏水中，定溶至100ml，。用移液管精确量取四份20ml的样品于250ml锥形瓶中，根据GB/T 19281-2003测定钙含量的方法对样品进行标定。1.2.2 珍珠层粉蛋白质含量测定在分析天平中准确称量1.000g珍珠层粉三份于小烧杯中，分别加入数毫升1.0mol/L的硫酸溶液，使CO3-2转化为CO2逸出，再用自动凯氏定氮仪测定其蛋白质含量。1.3 角壳蛋白的提取及制备1.3.1 均匀设计方法影响角壳蛋白提取率（y）的因素有乳酸浓度、反应温度、反应时间、搅拌速度。本实验采用均匀设计试验的方法8，在恒定搅拌速度的条件下对乳酸浓度（x1）、反应温度（x2）及反应时间（x3）三个因素进行考查,现取三个考查因素的水平如下：酸浓度/：14 16 18 20 22 24温度/： 40 45 50 55 60 65时间/h ： 1 1.5 2 2.5 3 3.5利用DPS统计软件自带的均匀试验设计功能，通过输入3因素6水平进行迭代5min，得到以下均匀设计表：中心化偏差 CD0.1365因子 乳酸浓度（x1）/% 反应温度(x2)/ 反应时间(x3)/hN1 (1)14 (2)45 (4) 2.5 N2 (6)24 (3)50 (5)3.0 N3 (4)20 (1)40 (2)1.5 N4 (5)22 (6)65 (3)2.0 N5 (3)18 (5)60 (6)3.5 N6 (2)16 (4)55 (1)1.0 1.3.2 均匀设计实验步骤1配制相应浓度的乳酸溶液250ml2 .准确称取5.000g珍珠层粉于250ml三口烧瓶中，用20ml水把烧瓶壁的层粉洗干净，从下到上安装反应装置，固定装置后，开启电动搅拌器，以预定速度搅拌，再打开恒压漏斗（预先盛有相应的乳酸溶液），慢慢滴入乳酸溶液，以反应器内少量气泡为宜，滴完后用10ml水润洗量筒和恒压漏斗，润洗液滴入反应器。并适当摇匀反应器。预定时间一到，停止搅拌，反应后溶液PH为56。把反应液移入离心管，用15ml水冲洗烧瓶。离心管于相应温度恒温10min，然后以4500rpm离心10min，上层液倒入锥形瓶，用15ml水把各管沉淀洗进一支离心管，再以4500rpm离心5min，上层液倒入锥形瓶，再洗涤离心管两次。然后用10ml水洗涤沉淀，把滤渣洗入烧杯，用凯氏定氮法进行蛋白质的测定,计算提取率y。把滤液浓缩至饱和，静置过夜，以少量沉淀析出为宜，备用。重复以上操作6次1.4 酶解反应参考文献9的方法，对1.3提取出的角壳蛋白进行酶解反应1 酶液的配制准确称取0.5000g胰蛋白酶，溶于PH8.04的磷酸二氢钾磷酸氢二钠的缓冲溶液中，再定溶至100ml，配成0.005g/ml的酶液2反应液的制取对1.3酸解反应确定的条件进行放大处理，以20g层粉反应，以获得足够多的、较为纯的角壳蛋白。准确称取0.1000g角壳蛋白于50ml三口烧瓶中，加入PH8.04的磷酸二氢钾磷酸氢二钠缓冲溶液10ml，用搅拌头慢慢搅拌使角壳蛋白溶解，再加入（1）配制的酶液2ml,于50水解24h。反应完后，把反应器于90环境中保温10min灭酶，再把反应液移入离心管，并用510ml水冲洗三口烧瓶，以4500rpm离心，上层清液于旋转蒸馏仪中浓缩至一定体积。1.5 化妆品营养液制取合并1.3酸解后离心的上层清液与1.4酶解后离心的上层清液，加入少量活性碳，数小时抽滤，所得滤液即为珍珠层粉营养液。1.6化妆品配方设计1.6.1实验用的配方：（100g）物质（） 配方一配方二配方三配方四油相 蜂蜡 1 1 0.5 0.42硬脂酸 4 4 4 2.6羊毛脂 2 2 1.03 0.84十六醇 3 3 2.5 1.28硅油 3 3 4.12 5BRIJ-72 0.8 0.8 0.84 0.51水相 甘油 55 5.03 4.21聚乙二醇400 5 5 5 4.29三乙醇胺 0.5 0.5 0.51 0.37EDTA-Na2 0.7 0.7 0.7 0.61硫代硫酸钠 0.1 0.1 0.1 0.1尼箔金甲脂 0.1 0.1 0.1 0.1硼酸 0.5 0.5 0.5 0.5珍珠层粉营养液35 353535BRIJ-721 2.4 2.4 2.4 1.71去离子水 余量 余量 余量 余量1.6.2实验步骤1. 按照以上的配方四配好水相和油相。加热水浴锅中的水至80待用。2 用75以上的乙醇蒸汽将乳化剪切机的定子和转子熏10min。所要用的仪器都要用75的乙醇消毒或者用沸水消毒10min，并烘干待用。3 将水相和油相分别加热到90，使油相和水相中的各物质完全熔化，并保温30min， 灭菌。4 30min后将油相转移到磁力搅拌机上搅拌并恒温80左右，确定油相完全熔化后，待水相85时把水相缓慢地加入油相当中，加完后搅拌数分钟，此时要恒温在75左右。5 把均质后混合液转至乳化剪切机进行乳化剪切，并用水浴锅恒温7075左右。若在转移的过程中油水混合液的温度低于70必须在低速乳化的情况下把混合液加热到70才缓慢的调节乳化剪切机的速度至50005500rpm。当乳化机的速度达到50005500rpm时要迅速记下时间。20min后调整乳化剪切机的速度至1500rpm左右，并记下时间。待温度降至55左右时关闭乳化剪切机，并记下时间，此时为成品 。1.7 产品功能性检测1，确定乳化类型 将乳液滴加在含有Cocl2的干燥滤纸上，若液滴周围变红则为O/W型乳液，若依然为蓝色则为W/O型乳液 10。2，稳定性测定将10克产品装入离心管中，将烘箱的温度调至481左右，（保温一个小时，目的是使润肤露均匀地到达48。）立即拿到离心机中离心分别以2000rpm.3000rpm.4000rpm离心30min。若以2000rpm离心30min不分离则为合格品，以3000rpm离心30min不分离则为一级品，若以4000rpm离心30min不分离则为优秀品 11 。3，耐热考验 将产品置于烘箱中，并保温48124小时后取出恢复到室温，若不出现油水分离的情况，则产品耐热性优。4耐寒性考验 将产品置于冰箱中，并分别保温5，10，1524小时后取出恢复室温观察油水情况。若保温524小时后恢复室温油水不分离则为合格品，若保温1024小时后恢复到室温不分离则为一级品，若保温1524小时后恢复室温油水不分离则为优级品。 2 结果与讨论2.1珍珠层粉的钙含量见表一表一项目 样品液 EDTA浓度 所用EDTA体积 碳酸钙含量 平均值 相对偏差体积V0/ml c/mol/L V/ml / 1 17.05 94.503 0.632 17.40 96.443 1.413 20 0.0503 17.08 94.670 95.099 0.454 17.10 94.780 0.34钙含量以碳酸钙（CaCO3）的质量分数计，数值以表示，按以下公式计算： =*100 结果列于上表第五列。M碳酸钙的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol）(M=100.1)m称取的珍珠层粉质量，单位为克(g)由以上结果可知，第二号样品相对偏差太大，估计为异常值，应将其去除，去除后碳酸钙含量平均值及相对偏差如表二表二项目 碳酸钙含量/ 平均值/ 相对偏差/1 94.503 0.163 94.670 94.651 0.024 94.780 0.14去除异常点后，结果令人满意。2.2 测定珍珠层粉中蛋白质含量凯氏定氮测定蛋白质含量结果见表三表三项目 层粉质量 盐酸浓度 所用盐酸体积 试剂空白所用 含氮量 平均值 /g mol/L ml 盐酸体积/ml /g /g1 1.00 0.4778 3.04 0.57 0.0042872 1.00 0.0618 8.68 5.02 0.003167 0.0033513 1.00 0.0590 7.45 4.11 0.002598根据蛋白质的质量与蛋白质中含氮量的关系，即6.25g蛋白质中含有1g氮。所以珍珠层粉中蛋白质含量为0.021g/1g层粉。由于尝试采用了不同浓度的盐酸标定吸收液硼酸，所得结果有点不尽人意。2.3寻求较适提取角壳蛋白的条件均匀设计试验结果表四因子 乳酸浓度 反应温度 反应时间 含氮量 x1/% x2/ x3/h y/gN1 14 45 2.5 0.010633N2 24 50 3.0 0.010071N3 20 40 1.5 0.012208N4 22 65 2.0 0.009889N5 18 60 3.5 0.010832N6 16 55 1.0 0.012814由上表可知，6次试验结果中以第6号试验的效率（0.012814）为最高，相应的试验条件为：乳酸浓度x116，反应温度x2=55，反应时间x3=1.0。现为研究各因素对响应值的影响，运用SAS系统8上线性归模型对试验进行分析，结果如下:模型 y=0.01588-0.00009546 x1-0.00002423x2-0.00076529x3方差分析表，表五方差来源 自由度 平方和 均方 F P值 回归 3 0.00000445 0.00000148 1.18 0.4898误差 2 0.00000252 0.00000126总和 5 0.00000698参数估计，表六变量 自由度 参数估计 标准差 t p值 截距 1 0.01588 0.00352 4.52 0.0457 x1 1 -0.00009546 0.00013893 -0.69 0.5630 x2 1 -0.00002423 0.00005557 -0.44 0.7054 x3 1 -0.00076529 0.00055571 -1.38 0.3024调整后的相关系数Ra=0.0963由方差分析的F检验和各参数估计的t检验可以看出，各因素对响应值都没有统计意义，因此，线性回归模型并不适合。进一步考虑用二次响应回归模型，但无法得到回归结果。因此对结果采用直观分析的方法，结果是以第6号试验最好，但在对第6号试验结果进行研究时发现，提取物包含有较多未反应的碳酸钙，这将影响下一步的酶解反应。为此，对6次试验中再进行分析，发现第3号试验效率较高、且提取物包含的碳酸钙很微量，相应的条件为乳酸浓度为20，反应温度为40 ，反应时间为1.5h。利用第3号试验条件进行重复，重复试验结果如下表，表七次数 乳酸浓度/% 反应温度/ 反应时间/h 含氮量1 0.0100622 20 40 1.5 0.0113233 0.010845由表七可知，试验重复性好。2.3 配方乳化结果配方一的乳化剪切的时间为44min其中以速度4000rpm4500rpm乳化的时间为30min，降温乳化的速度为1000rpm,时间为10min。而配方二乳化剪切的时间为31min，其中15min是以4000rpm4500rpm进行乳化，降温乳化的速度为1000rpm，时间为10min。配方三乳化时间为33min，其中以5000rpm5500rpm乳化的时间为20min，降温乳化的时间为10min。配方四乳化的时间为33min，其中以5000rpm5500rpm乳化的时间为20min，降温乳化的时间为10min。通过四个配方的实验，对此四个配方进行比较如下：配方一和配方二的油相比例一致均为13.08，但是乳化时间不一样，配方一的乳化时间较长，得出来的产品的稠度最大和铺展性最差，但是较配方二细腻，涂抹在皮肤上比配方二舒服，由于本次实验乳化时所用的仪器是500ml的敞口烧杯，乳化的温度为7075，所以乳化的时间越长水份的损失也就越严重从而导致产品的粘稠度增加。与前两个配方相比，配方三与配方四的油相含量均减少，其中配方三的油相含量为12.99，配方四的油相含量为10.65。配方三和配方四乳化条件相同，乳化速度均为5000rpm5500rpm，乳化时间相同均为20min。配方三涂抹在皮肤上的油腻感比配方四强，比配方一和配方二弱。配方四滋润而不油腻，表观比配方一、配方二、配方三均细腻有光泽，在皮肤上的铺展性最好，涂抹的分散性最好，皮肤感觉最舒服。因此配方四为本实验较优配方。2.4 产品功能性检测结果以上四个配方所得到的产品均为O/W型的润肤露。 产品在48的干燥箱中恒温24h及4000rpm的速度下离心30min油水均不分层，本产品为优级品。产品在20