第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物

1 药物分析第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 1 第二小组主讲人 小组成员 2 拟肾上腺素药物 拟肾上腺素药物 大多具有苯乙胺结构 药理作用 具有收缩血管 升高血压 散大瞳孔 舒张支气管 弛缓胃肠肌 加速心率 加强心肌收缩力等药理作用临床应用 升压 平喘 充血治疗 3 主要内容 第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质检查第四节含量测定 非水滴定法 4 第一节结构与性质 5 1 1典型药物与结构特点 1 1 1基本结构 苯乙胺 属于芳胺类中芳烃胺类 含苯环的基团 乙胺 6 7 1 1基本结构 苯乙胺 肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素 重酒石酸去甲肾上腺素 盐酸多巴胺 硫酸特布他林均属于儿茶酚胺类 儿茶酚 氨基 药物 8 9 1 1基本结构 苯乙胺 1 具有邻苯二酚或酚 2 具有烃胺侧链 属于芳烃胺类 3 具有手性碳 10 1 2理化性质 1 酚羟基特性邻苯二酚 或苯酚 结构 与金属离子络合呈色 在空气中或遇光 热易氧化 色泽变深 在碱性溶液中更易变色 2 弱碱性烃胺基侧链 仲胺氮 弱碱性 游离碱难溶于水 易溶于有机溶剂 其盐可溶于水 3 旋光性 手性碳原子 具有旋光性 4 紫外 红外吸收特性 11 第二节鉴别试验 2 1与三氯化铁反应 酚羟基 Fe3 络合显色 H 绿色 OH 变色 紫色 氧化 高铁盐氧化 紫红色 12 第二节鉴别试验 2 2甲醛 硫酸反应酚羟基取代的可与甲醛在硫酸中反应 形成具有醌式结构的有色化合物 13 与三氯化铁反应 与甲醛 硫酸反应现象 14 2 3氧化反应 还原性反应 酚羟基 易被碘 过氧化氢 铁氰化钾氧化呈现不同颜色 15 2 4氨基醇的双缩脲反应 芳环侧链具有氨基醇 盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素等药物 16 2 4氨基醇的双缩脲反应 芳环侧链具有氨基醇结构可显双缩脲反应 盐酸去氧肾上腺素 盐酸麻黄碱 CuSO4 NaOH 紫色 乙醚 醚层 不显色 水层 蓝色 CuSO4 NaOH 蓝紫色 乙醚 醚层 紫红色 水层 蓝色 17 2 5脂肪伯胺的Rimini反应 鉴别具有脂肪伯胺基的药物 可用于重酒石酸间羟胺的鉴别 重酒石酸间羟胺 水溶 亚硝基铁氰化钠 碳酸氢钠 丙酮 红紫色 注意 脂肪伯胺的Rimini反应中丙酮中不能含有甲醛 甲醛与伯胺基脱水缩合为仲胺 使反应无法进行 18 2 6吸收光谱特征法 19 第三节特殊杂质与检查 3 1酮体杂质检查来源 原料残留 氢化不完全 20 3 1酮体杂质检查来源 原料残留 氢化不完全 原理 利用酮体在紫外310nm处有最大吸收 而药物本身在此波长几乎没有吸收 21 3 1酮体杂质检查 方法 比较法 22 3 1酮体杂质检查 取本品0 2g 置100ml量瓶中 加盐酸溶液 9 2000 溶解并稀释至刻度 摇匀 在310nm处测定吸光度不得超过0 05 酮体的百分吸收系数为435 求酮体的限量 23 3 2光学纯度的检查 ChP采用比旋度法进行光学纯度检查目前常用的方法为毛细管电泳法和液相色谱法 24 3 3有关物质检查 盐酸去甲肾上腺素 薄层色谱法盐酸苯乙双胍 纸色谱法其他药物 肾上腺素 高效液相色谱法 25 3 3 1肾上腺素有关物质检查 HPLC法 1 色谱条件固定相 ODS 十八烷基硅烷键合硅胶 流动相 硫酸氢四甲基铵溶液 甲醇 95 5 2 系统性试验 n 3000 R 3 自身稀释对照法供试液 样品配成1mg ml的溶液对照液 药品配置成0 002mg ml的溶液要求 供试液色谱图中单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积 各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的2 5倍 0 2 0 5 26 3 3 2盐酸去氧肾上腺素中有关物质检查 TLC法 1 色谱条件固定相 硅胶G板展开剂 异丙醇 三氯甲烷 浓氨溶液 85 5 15 显色剂 重氮苯磺酸溶液 2 自身稀释对照法供试液 20mg ml对照液 0 1mg ml要求 供试液杂质斑点与对照品主斑点比较不得更深 0 5 27 3 3 3盐酸苯乙双胍中有关物质检查 纸色谱法色谱滤纸展开剂 乙酸乙酯 乙醇 水 6 3 1 显色剂 10 铁氰化钾 10 亚硝酸铁氰化钠 10 NaOH检测 剪下显色斑点后甲醇萃取用UV法测定A 0 48 28 第四节含量测定 4 1非水溶液滴定法4 2溴量法4 3亚硝酸钠滴定法4 4紫外分光光度法及比色法4 5高效液相色谱法 29 4 1非水溶液滴定法 非水滴定法 在非水溶剂中进行的滴定分析方法称为非水滴定法 非水溶剂有异味 有毒 而且价格又贵 为何发展非水滴定法 30 4 1 1以水为溶剂的酸碱滴定法局限 1 许多物质的酸 碱太弱 在水溶液中用碱 酸滴定没有明显的突跃 终点难以观测 2 许多有机物在水中基本不溶或溶解甚少 不能在水中滴定 3 多元强酸或强碱或混合酸在水中全部离解为H 和OH 在水中不能区分强酸或强碱 不能分步或分别滴定 31 4 1 2非水酸碱滴定法的特点 32 溶质在溶剂中的酸碱性 若将酸HA溶于质子溶剂SH中 则发生下列质子转移反应 HAH A SH H SH2 SH HAA SH2 33 溶质在溶剂中的酸碱性 HA在溶剂SH中的表观离解常数KHA按下式计算 上式表明 酸HA在溶剂SH中的表观酸强度决定于HA的酸度和溶剂SH的碱度 即决定于酸给出质子的能力和溶剂接受质子的能力 SH HAA SH2 34 溶质在溶剂中的酸碱性 同理 碱B溶于溶剂SH中的平衡常数KB为 碱B在溶剂SH中的表观碱强度决定于B的碱度和溶剂SH的酸度 即决定于碱接受质子的能力和溶剂给出质子的能力 35 溶质在溶剂中的酸碱性 溶质在溶剂中表现的酸碱强度 不仅与自身的酸碱强度有关 还与溶剂的酸碱强度有关 弱酸溶于碱性溶剂中能增强其酸性 弱碱溶于酸性溶剂中能增强其碱性 36 4 1 2非水酸碱滴定法的特点 改变物质相对酸碱性增大有机物溶解度扩大酸碱滴定范围 37 4 1 3溶剂种类 1 酸性溶剂 有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱度 最常用的酸性溶剂是冰醋酸 2 碱性溶剂 有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸度 最常用的碱性溶剂是二甲基甲酰胺 3 两性溶剂 兼有酸碱两种性能 最常用的是甲醇 4 惰性溶剂 溶剂没有酸碱性 如甲苯 三氯甲烷 丙酮 38 非水溶液滴定法测定苯乙胺类药物的条件 39 4 1 4基本原理 游离碱B HClO4 BH ClO4 有机弱碱盐 BH A HClO4 BH ClO4 HAHA酸性强弱不同 对滴定反应的影响也不同 40 4 1 5一般方法 注意 加入醋酐时应防止氨基被乙酰化 导致碱性减弱 伯氨基的乙酰物 电位法仲胺基的乙酰物 指示剂法和电位法都不行避免方法 低温条件加醋酐 供试品 冰醋酸 HClO4 结晶紫 结果 空白试验校正 10 30ml 醋酐或醋酸汞等 41 4 1 6问题讨论 适用范围酸根影响滴定剂的稳定性终点指示方法其他干扰 42 4 1 6问题讨论 1 适用范围非水溶液滴定法适用于pKb 8的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定 包括有机弱碱 及其有机酸盐 氢氯酸盐 磷酸盐 硫酸盐 硝酸盐 有机酸的碱金属盐等 43 4 1 6问题讨论 2 酸根的影响无机酸类在醋酸介质中的酸性大小 高氯酸 氢溴酸 硫酸 盐酸 硝酸 磷酸 有机酸 BH A HClO4BH ClO4 HA 44 4 1 6问题讨论 2 酸根的影响 HX盐的滴定排除方法 加入醋酸汞Hg Ac 2稍过量 一般为药品量的1 3倍 BH X HClO4BH ClO4 HX 2HX Hg Ac 2HgX2 2HAc 45 4 1 6问题讨论 2 酸根的影响 H2SO4盐的测定 BH 2 SO4 HClO4BH ClO4 BH HSO4 排除方法 加入醋酐提高目视灵敏度 HNO3盐的测定HNO3具有氧化性 使指示剂褪色 排除方法 测定时以电位法指示终点 46 4 1 6问题讨论 2 酸根的影响无机酸类在醋酸介质中的酸性大小 高氯酸 氢溴酸 硫酸 盐酸 硝酸 磷酸 有机酸 磷酸盐或有机酸的测定酸性较弱 对滴定没有影响 47 4 1 6问题讨论 3 滴定剂的稳定性高氯酸滴定液的浓度校正公式 注 滴定供试品与标定高氯酸滴定液时的温度差未超过10 可以用公式进行浓度校正 若超过10 则应重新标定 48 4 1 6问题讨论 4 终点指示方法 高氯酸滴定 指示剂法和电位法常用指示剂 结晶紫 喹哪啶红 孔雀绿等结晶紫的酸式色为黄色 碱式色为紫色 从碱性到酸性区域颜色的变化涉及紫 蓝 蓝绿 绿 黄绿和黄色 注 指示剂的终点颜色变化 均需用电位滴定法来确定 49 4 1 6问题讨论 5 其他非水滴定 所用仪器必须干燥无水 在非水介质中水既是酸性介质又是碱性介质滴定速度不宜太快冰醋酸 高氯酸均具有腐蚀性 应小心注意安全称样量一般以消耗标准溶液6 8ml为宜 属于半微量滴定 50 4 2溴量法 原理 药物分子结构中的苯酚结构 在酸性溶液中酚羟基的邻 对位活泼氢能与过量溴定量地发生溴取代反应 再以碘量法硫代硫酸钠滴定剩余的溴 应用 2010版ChP 盐酸去氧肾上腺素 重酒石酸间羟胺原料药 51 4 2溴量法 例 盐酸去氧肾上腺素 1 测定方法 取本品0 1 精密称定 置碘量瓶中 加水20ml使溶解 精密加溴滴定液50ml 在加盐酸5ml 立即密塞 放置15min并时时振摇 注意微开瓶塞 加碘化钾试液10ml 立即密塞 振摇后 再用硫代硫酸钠滴定液滴定 至近终点时加淀粉指示液 继续滴定至蓝色消失 并将滴定的结果用空白试验校正 52 4 2溴量法 定量过量 1 3 剩余 例 盐酸去氧肾上腺素 2 注意事项 游离溴及碘极易挥散 操作过程中防逸失 不能加入太过量的溴液 以防酚羟基氧化或溴化 一般以过量2 为宜 平行条件作空白 校正操作中溴及碘挥发 53 4 3亚硝酸钠法 盐酸克伦特罗 芳伯氨基 重氮化 永停滴定法指示终点 54 4 3亚硝酸钠法 永停滴定法 在终点前回路中没有电流 电流计指针指零 当滴定终点时 溶液中有微量过量的NaNO2 使得在两个电极上发生氧化还原反应 回路中有电流产生 使指针发生偏转并且不在返回零点 55 4 4紫外分光光度法 4 4 1紫外分光光度法制剂含量测定 Chp2010盐酸甲氧明注射液 重酒石酸间羟胺注射液 例 盐酸甲氧明注射液含量测定 精密量取本品适量 约相当于盐酸甲氧明100mg 置250ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 精密量取10ml 至100ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 照紫外 可见分光光度法 在290nm的波长处测吸光度 按盐酸甲氧明的吸收系数为137计算 即得 吸收系数法 56 4 4紫外分光光度法 4 4 2比色法分子中具有芳伯胺基的药物采用重氮化 偶合反应显色 分子中含有酚羟基可与亚铁离子显色 然后进行比色测定 Chp2010采用比色法测定盐酸克伦罗特栓和盐酸异丙肾上腺素气雾剂 对照品法 57 4 5高效液相法 Chp2010采用高效液相色谱法作为盐酸肾上腺素注射液 重酒石酸去甲肾上腺素注射液 盐酸异丙肾上腺素 盐酸多巴胺注射液 硫酸沙丁胺醇注射液 盐酸苯乙双胍片等 58 4 5高效液相法 例 硫酸沙丁胺醇片的含量测定色谱条件 固定相 ODS 十八烷基硅烷键合硅胶 流动相 磷酸二氢钠 甲醇 85 15 系统性试验 按硫酸沙丁胺醇峰不低于3000 59 4 5高效液相法 例 硫酸沙丁胺醇片的含量测定测定法 外标法取本品20片 精密称定w1 研细 精密称取适量w2 约相当于硫酸沙丁胺醇4mg 至50ml量瓶中 用流动相适量 振摇使硫酸沙丁胺醇溶解 用流动相稀释至刻度 摇匀 过滤 精密量取续滤液20 l 注入液相色谱仪 记录色谱图 另取硫酸沙丁胺醇 C13H21NO3 2H2SO4 对照品适量 精密称量 加流动相定量稀释成96 g ml的溶液 同法测定 按外标法以峰面积计算 并将结果与0 8299相乘 即得 60 小结 1 结构与性质酚羟基 弱碱性 旋光性 紫外吸收特性2 鉴别反应铁盐 甲醛硫酸反应 还原性 氨基醇的双缩脲反应 脂肪伯胺的Rimini反应3 杂质检查酮体杂质检查4 含量测定非水溶液滴定法 溴