化疗脱发的治疗与预防的研究.doc

中山大学 硕士学位论文化疗脱发的治疗与预防的研究 姓名：陈清彬 申请学位级别：硕士 专业：微生物与生化药学 指导教师：杜军邹江鹰 20080609中山大学硕士学位论文 中文摘要 化疗脱发的治疗与预防的研究 专 业：微生物与生化药学 硕士生：陈清彬 指导教师：杜军教授 邹江鹰研究员 中文摘要研究目的： 本研究的主要目的是建立一种治疗和预防化疗脱发的新方法和寻找一种治疗和预防化疗脱发的新药物，以期望对化疗脱发病人给予治疗和预防，并对热休克反应对化疗脱发的治疗与预防作用的分子机制进行初步的探讨。研究方法： 、 在小鼠腹腔内注射体重的紫杉醇诱导小鼠新生毛发脱落，构建 化疗脱发的动物模型。 、 应用热激疗法和药物疗法对化疗脱发小鼠进行预防和治疗，观察毛发生长 情况，并用组织化学染色方法观察皮肤组织毛囊数量的变化。 、 应用免疫组织化学和 方法检测各组小鼠皮肤组织内热休克蛋 白的表达。 、 分离并培养毛乳头细胞，用法检测热激处理对毛乳头细胞的影响， 用 检测其对毛乳头细胞内表达的影响。研究结果： 、 成功构建了化疗脱发小鼠的动物模型， 、 热激处理和对化疗脱发具有预防和治疗的作用。 、 结果显示热激处理对毛乳头细胞具有较好的保护作用。 、 免疫组织化学和 结果显示，在体内和体外，经过热激处理后， 皮肤组织和毛乳头细胞内的的表达量显著增加。研究意义： 本研究所采用的局部加热的方法，期望能够对化疗脱发病人给予预防和治疗，促进毛发再生，减少病人的心理压力，提高化疗病人的生活质量，为化疗脱发的研究提供新的思路；应用一代替热机处理得到了相同的实验结果，有望作为一种用于开发治疗和预防化疗脱发的新药物，具有很大的应用 中山大学硕士学位论文 中文摘要前景和开发意义。关键词：化疗脱发紫杉醇格尔德霉素毛乳头细胞热激疗法热休克反应热休 克蛋白中山大学硕士学位论文 英文摘要 ： ： ， ： ， ： 篡刚： 川 。 。 圳娜 唧 ）。 ， ， ， 删 嘲“ 。 ： 。 中山大学硕士学位论文 原创性声明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：砾耥 日期：参嘶月日 学位论文使用授权声明 本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。学位论文作者签名：低豸争渺 导师签名： 夺专 日期：知毋年易月夕日日期砌绰伽日中山大学硕士学位论文 引言 第一章 弟一早 引 言 石脱发 毛发是由毛和毛囊两个部分组成的，毛生长在类似于筒状的毛囊中，露出皮面的为毛干，生长于毛囊内的则叫毛根，毛根下部与毛囊下部相连，此部分略呈膨大称为毛球，毛囊深入到皮下组织内，起到把人体内的营养输送给毛发的作用，这一过程受到血液、神经和内分泌系统的调节。毛发从毛囊深部不断向外生长，每根毛发可生长若干年。一般而言，即使毛干受到损伤，只要不伤及发根就不会影响毛发的继续生长，直至毛发本身自然脱落进入休止期。待毛囊休止一段时间后，又再萌生长出新的毛发，这一过程叫做毛发的生长周期。头皮每个毛囊从婴儿到出生后的几十年中，大约可发生个生长周期。成人头发每日的生长速度约为，每个月头发可长出左右。人的头皮大约有万个毛囊，每根头发的生长期为”年，休止期个月，其后又生新发，如此周而复始不断更新。头皮按 万根毛发中处于生长期， 处于休止期【。如此计算，每天脱落根毛发是属于正常的生理变化，因为同时会有相应数量的头发再生，脱发与生发处于一个动态平衡中。若次脱落根以上，才要考虑是否属于病理改变。头发覆盖于头皮，可以减少外界理化因素对头皮的损伤，如防止紫外线的过度照射等。人类在长期的进化过程中，头发对头皮的保护作用已经越来越弱了，然而，头发的社会性的一面却愈来愈重要了：外观与美容。脱发是临床常见疾病。随着生活水平的提高，人们对美容美发的要求日益迫切，现代医学和祖国传统医学对此的研究也越来越受到重视。脱发根据其特征及脱发病因一般可分为以下几种：斑秃（ ，） 斑秃（ ）俗称“鬼剃头”，意思是一觉睡醒来不知不觉中发现一片一片的头发脱落。由于此病通常是突然发生的，所以在梳头理发或别人在无意中发现。斑秃多表现为圆形或椭圆形脱发区域，数目可多可少，大小也不一样。秃发部分的皮肤正常，无明显不适症状，有的脱发不经治疗可在”个月或更长的时间后渐渐长出新发。新长的头发比较细软，颜色较浅，以后慢慢变粗中山大学硕士学位论文 引言变硬，色泽加深直至完全正常；也有部分患者边边脱历经数年之久，有的经过治疗后痊愈了，但不久又复发，如此反复达十余年。根据病情严重程度可分为斑秃（头皮斑块性脱发，）、全秃（整个头发全部脱失，）和普秃（全身毛发的脱发，）一。一般人群中患病率大约为，男女之间没什么差异，约占皮肤科门诊初诊的【。通过对大量的人群、家系、双生子的研究表明遗传因素是构成易感性的重要因素之一。在感染、损伤、压力等因素的作用下可以诱发该病。因而多数学者认为是一种遗传与环境因素相互作用的多基因病。斑秃的病因比较复杂，目前尚未完全搞清楚，可能与以下因素有关： 免疫因素 部分患者具有其他免疫性疾病，可测到自身抗体，这些抗体可能与斑秃的发生有关，因应用皮质类固醇激素治疗可促使新发生长，故也支持发病机制与免疫有关。斑秃是淋巴细胞介导的自身免疫性疾病： 等一进行的实验显示当斑秃患者的患处头皮被移植到裸鼠后，移植物处能生长出新的毛发，而斑秃也与其它自身免疫病如自身免疫性甲状腺炎（桥本甲状腺炎）和白癜风等有关联。为了进一步确定斑秃是否由淋巴细胞介导， 等将斑秃患者的患处头皮移植到患有重症联合免疫缺陷病（）的小鼠身上，同时，作者分离出该患者患处头皮活检组织的淋巴细胞，然后与毛囊组织匀浆以及自身同源的抗原呈递细胞一同培养。接着将淋巴细胞注射人鼠身上的同源头皮移植物中，而在注射前，该处的头皮移植物上此时已经长出了毛发。因小鼠同时缺乏细胞和细胞，而裸鼠只是缺乏细胞，故，鼠能够接受人皮肤和淋巴细胞两者的移植物。实验结果显示：注射人头皮淋巴细胞之后使本来已经长出的毛发又脱落。因此被认为与组织学和免疫化学的改变有关，包括毛囊周围淋巴细胞的浸润，以及毛囊上皮细胞和的表达等。而分离出的头皮淋巴细胞如未经与毛囊组织匀浆一同培养，则注射后无此效果。初步结果显示，毛发的脱落需要和细胞的合作。这些研究表明斑秃可被淋巴细胞的转移来诱导产生，而这些淋巴细胞能识别毛囊自身抗原。 遗传因素在斑秃的病因中，遗传因子的重要性可以从许多有阳性家族史的患者中看出，曾见过多例父母与子女先后发生斑秃的患者。在大量的报道中，有阳性家族史的比例从到不等，而真实数字可能更大，因为较轻的病例常常被忽略或隐瞒了。 由于半数以上病例可自行恢复，所以得了斑秃患者大可不必恐慌，首先要仔细寻找可能的致病因素，消除精神上的紧张与忧虑，并保持乐观向上的心态，树立战胜疾病的信心，适当的放慢生活节奏，工作要有规律，在此基础上加以药物治疗，一般都能取得满意的疗效。 精神因素人的精神状态不稳定，常常焦虑不安，大脑长时间的处于紧张、烦恼、愤怒、急躁或用脑过度的状态时，均可导致头部血管长期处于收缩状态， 中山大学硕士学位论文 引言使血液循环不流畅，头发营养供应不足，牛长受到抑制，从而造成新牛毛发生长受到障碍，导致脱发。在青年或成年中，精神受到刺激，如学习、工作紧张、忧虑等常是本病的引发原因。中医认为，斑秃的病因是肝肾虚亏，毛发失养，发枯易脱等，这些认识也包含有精神因素的影响。脂溢性脱发（ ，） 即雄激素性脱发（ ，），又称男性型秃发，以壮年脑力劳动者居多，在现代的社会中越来越年轻化了，患病部位多数发生在头顶部。患者头皮毛囊对雄激素敏感性增加，毛发生长期缩短导致生长期毛发数目减少；同时毛囊缩小，终末期毛囊转变成毳毛毛囊【引。本病常伴有皮脂溢出，属多基因遗传疾病，与体内雄激素作用有密切关系。患者进入成年后，前额部头发就逐步脱落，前发迹线向后退，头项部头发稀薄进而发展为除发缘外整个头皮的头发脱落，症状可因其家族遗传倾向程度不同而不同，病程大多缓慢，多见于男性，女性患病则程度较轻，且一般表现为头项部弥漫性头发稀少，女性型雄激素性脱发（尚需排除其他病因，如产后秃发、贫血等）多呈顶部头发稀疏，而额部仍保留不变，属多基因遗传。无论男性或女性均多发生于一岁。由于此病发病原因不明且受遗传影响明显，因此在治疗上比较困难。 本病的发病机制，除遗传因素外，与雄激素的代谢有密切关系。在雄激素性脱发中，由于毛囊外毛根鞘及真皮乳头中的型一还原酶的表达水平增高，使睾酮转换成双氢睾酮的量增加。双氢睾酮足一种较强的雄激素，它不能被芳香酶转化变为雌激素，同时双氢睾酮对雄激素受体的亲和力要比睾酮大倍【】。双氢睾酮结合雄激素受体后进入细胞核，在核内控制毛发生长基因的表达，结果使毛囊微小化，生长期缩短，头发变成细小的绒毛状而至稀疏【】。 对于本病的治疗主要有药物治疗、毛发移植及基因治疗等。 ）药物治疗：一是通过调节雄激素代谢药物一非那雄胺（）。非那雄胺是一种选择性型【还原酶抑制剂，能降低血清和毛囊二氢睾酮水平。型还原酶分布在毛囊的外根鞘内层、毛囊近端区域、内根鞘及毛囊的漏斗部【。二是利用抗雄激素药物：有研究指出女性与头皮睾酮水平增高有关，而与二氢睾酮水平升高无关，这说明了为何还原酶抑制剂对治疗女性无效【 。 【等证实了女性患者脱发程度与雄烷，二醇葡萄糖醛酸甙及还原雄激素反应性成正比，与性激素结合球蛋白水平成反比。这说明女性应以抗雄激素药物治疗为主引。 ）毛发移植：年等先激光用于毛发移植，但激光及其后出现的铒激光（：）存在止血障碍及横向受热损害的严重缺点。 中山大学硕士学位论文 引言：是一种把激光和铒激光结合在一起的新技术【。此技术克服了以往激光毛发移植引起的上述缺点。认为椭圆形移植皮片能使毛发牛长达到最佳自然形态 。在一项随机双盲对照研究中，例 级男性患者及度女性患者被随机分成组，分别接受椭圆皮片移植术、小型环状皮片移植术及激光槽状皮片移植术。年后由评审人员对其疗效进行评估，结果显示椭圆皮片移植术可取得最佳的美学效果（），而小型环状皮片移植术较多出现皱褶及囊肿俨）。患者自我评估结果也显示椭圆皮片移植术的美学效果优于另外两组。近期等通过对中国人头皮毛囊单位分布情况做出的研究，发现若要在宽的全秃前额头皮重建自然发际，至少移植个毛囊单位、密度为毛囊单位是最适合中国患者的移植密度，这样可使毛发密度达到正常者的。等【更发现在移植部位加用的米诺地尔能增加毛发密度及毛发生长速度。 基因治疗：等【通过小鼠体内实验证实了被嵌入到脂质体的钙黄绿素及黑素能进入毛囊细胞及毛干内，其量与时间长短成正比。相反，未经修饰的钙黄绿素及黑素不能到达上述部位。这表明该脂质体对毛囊具有选择性，能把基因、蛋白质或其他一些分子传送到毛囊中，从而达到治疗目的。等【将人类皮肤移植到免疫缺陷小鼠中，在移植物上应用。通过对超过个毛囊的研究，结果发现发生转染的细胞仅为毛发生长初期毛囊的毛发干细胞，且应用前先对移植物进行脱毛法及维酸处理能增加转染率。此实验说明了在毛发生长初期应用匕使该基因选择性地表达于毛发干细胞并使其转染，从而影响毛发的特性。此发现为将来改变毛囊表型并以基因治疗各种毛发疾病打下基础 蹦。化疗脱发（ ，） 长期放疗、化疗，使血液中毒性物质增加，引起脱发。化疗药物引起的大片脱发可导致抗癌治疗严重的心理不良反应吼。化疗脱发是化疗的毒性反应之一，从患者的角度看，仅次于呕吐和恶心，排在化疗副作用的第位，严重脱发可使某些患者心理负担过重，甚至拒绝接受进一步治疗，所以化疗后脱发的干预是肿瘤治疗过程中需要解决的问题。能引起脱发的药物有环磷酰胺、紫衫醇、氟脲嘧啶、常春新碱、柔红霉素、依托泊苷、顺铂、阿糖胞苷、鬼臼毒素等，人体化疗后脱发大约出现在开始化疗的”周，而毛发的再生出现在化疗结束后”个月。现认为与化疗药诱导毛囊内细胞凋亡，从而使生长期毛囊提前进入退行期有关【】。脱发的程度与使用药物的种类、剂量、方法有关，一般出现于系统用药的患者，但局部应用也可以引起脱发。目前尚无满意的预防化疗后脱 中山大学硕士学位论文 引言发的药物：虽然有人提出了局部低温【】和外用米诺地尔【、，二羟基维生素等某些药物可以治疗化疗后脱发，但临床实践中表明疗效不明显。 化疗后脱发的动物模型 由于接受肿瘤化疗治疗患者的头皮标本很难获得，所以研究的标本一般都来源于动物模型。目前用于化疗后脱发机制与治疗研究的模型主要有两种【。一种模型是在出牛的大鼠腹腔内持续注射化疗药物阿糖胞昔（也可用环磷酰胺、柔红霉素、依托泊苷、鬼臼毒素等），一周后毛发出现脱落【卜。第二种模型足在周的、鼠背部皮肤剃毛诱导牛长期毛囊的产生，然后单剂量皮下注射环磷酰胺 诱导严重的毛发脱落 蚓。在该模型中，环磷酰胺诱导生长期毛囊营养不良性