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文档简介

名词:3、微生物菌体发酵:以获得具有多种用途的菌体为目的发酵就称为微生物菌体发酵。4、菌体生长期:在微生物发展过程中,以产生初级代谢产物(如氨基酸、核基酸、蛋白质、核酸、类脂、糖类)的菌体生长时期叫菌体生长期。5、微生物的转化:就是利用微生物细胞的一种或多种酶把一种化合物转变成结构相关的更有经济价值的产物的生化反应称为微生物转化。6、表面培养法:是以微生物在基质表面上进行培养的方法。随着所利用培养基种类的不同,它又分为固体表面发酵和液体表面发酵。7、深层培养法:是以微生物细胞生长于液体培养基(厌气或好气)深层中进行培养的方法称深层培养法。10、微生物生长曲线:在适宜的培养基中接入少量细菌以后每隔一段时间取样测定细胞数目。以细胞群体量对数对培养时间作图,可绘制出细胞群体量随时间的变化曲线,该曲线被称为微生物生长曲线。12、初级代谢产物:是微生物代谢产生的,并是微生物自身生长繁殖所必需的代谢产物称为初级代谢产物。15、生物合成:指各种构建单位在多种酶的作用下合成代谢产物的过程。16、分叉中间体:菌体代谢过程中产生的某些中间产物,既可用于合成初级代谢产物,又可用于合成次级代谢产物,这种中间产物叫做“分叉中间体”。18、酶合成的调节:指通过调节酶的合成数量来调节微生物代谢速率,这种调节方式称酶合成调节,又叫酶量的调节。19、反馈阻遏:指代谢终产物达到一定浓度时,反馈阻遏该代谢途径中的一种酶或几种酶的生物合成。21、酶活性调节:是通过改变已有酶的活性来调节代谢速率。包括酶的激活和酶的抑制。22、能荷调节(腺苷酸调节):指细胞通过改变ATP、ADP、AMP三者比例来调节其代谢活动,这种调节方式称能荷调节。25、前突变:诱变剂所造成的DNA分子的某一位置的结构改变称为前突变。26、表型迟延:突变基因出现并不等于突变表型的出现,表型的改变落后于基因型改变的现象称为表型迟延。27、随机筛选:指菌种经诱变处理后,进行平板分离,随机挑选单菌落,从中挑选高产菌株。28、摇瓶筛选法:即将挑出的单菌落传种斜面后,再由斜面接入模拟发酵工艺的摇瓶中培养,然后测定其发酵生产能力。31、杂交育种:指两个不同基因型的菌株通过接合或原生质体融合使遗传物质重新组合,再从中分离和筛选出具有新性状的菌株。33、分子克隆:指使DNA分子进行重组,再在受体细胞内无性繁殖的技术又称为分子克隆。35、培养基条件:是指培养基组成、PH值、二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂和固形物含量。38、前体:是指在产物的生物合成过程中,被菌体直接用于产物合成而自身结构无显著改变的物质称为前体。39、孢子培养基:是指制备孢子用的培养基。40、种子培养基:是指供孢子发芽的菌体生长繁殖用的培养基。41、发酵培养基:是指供菌体生长繁殖和合成大量代谢产物用的培养基。43、辐射灭菌:是利用高能量的电磁辐射和微粒辐射来杀灭微生物。45、热阻:是指微生物在某一种特定条件下(主要指温度和加热方式)的致死时间。48、介质过滤除菌:是指把空气中各种微粒和极少量的游离微生物捕捉起来予以除掉。49、致死温度:是指杀死微生物的极限温度。51、孢子进罐法:是将斜面孢子制成孢子悬浮液直接接入种子罐的方法。52、种子制备:是将固定培养基上培养出的孢子或菌体转入到液体培养基中培养,使其繁殖成大量菌体或菌丝的过程。54、二级种子:是指把一级种子接入体积较大的种子罐中,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子。55、二级发酵:是指把一级种子转入发酵罐内发酵称为二级发酵。61、菌丝粘壁:是指在种子培养过程中,由于搅拌效果不好,泡沫丝逐步粘附的罐壁上的现象。62、菌种衰退:是指在生产上使用的菌种,在使用和保藏过程中,经常会逐渐向不利于生产的方面发展,这种变化称为菌种衰退。63、微生物摄氧率:指单位体积培养液每小时消耗的氧量,mmol(O2)(L.h)。64、呼吸强度:指单位重的干菌体每小时消耗的氧量,单位为mmol(O2)(g(干菌体).h)。68、发酵热(Q发酵):指产生的热能减去散失的热能,所得的净热量就是发酵热。69、生物热(Q生物):指产生菌在生长繁殖过程中产生的热能,叫做生物热。70、搅拌热(Q搅拌):指搅拌器转动引起的液体之间和液体与设备之间的摩擦所产生的热量。71、蒸发热(Q蒸发) :指空气进入发酵罐与发酵液广泛接触后,排出引起水分蒸发所需的热能。72、辐射热(Q辐射):指由于罐外壁和大气间的温度差异而使发酵液中的部分热能通过罐体向大气辐射的热量。73、补料分批培养(FBC)叫半连续培养或半连续发酵:是指在分批过程中,间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法。74、呼吸商:指CO2释放率与氧消耗率之商叫做呼吸商。75、前反馈控制:如果被控对象动态反应慢,且干扰频繁,则可通过对一种动态反应快的变量(叫做干扰量)的测量来预测被控对象的变化,在被控对象尚未发生变化时提前实施控制,这种控制方法叫做前馈控制。76、PID控制:当控制负荷不稳定时,可采用比例、积分、微分控制算法,简称为PID控制。77、串级反馈控制:有两个以上控制器对一种变量实施联合控制的方法叫做串级控制。81、原位传感器:传感器安装在发酵罐内,直接与发酵液接触,给出连续响应信号,如温度、压力、PH、溶氧等的测量。83、发酵规模的放大:将实验室和中间试验车间试验所取得的结果,设法应用到工业性大规模生产中去,这种转移的过程,又叫做放大。84、发酵实验室实验:就是利用前述的设备尽可能得到培养新菌株或实施新工艺的最佳发酵条件。86、化学需氧量:在规定的条件下,用氧化剂处理水样时,与溶解物和悬浮物消耗的该氧化剂数量相当的氧的质量浓度。87、生化需氧量:在规定的条件下,水中有机物和(或)无机物用生物氧化所消耗的溶解氧的质量浓度。89、厌氧消化处理:将空气隔断,保持无氧状态,由厌气或兼性厌气生物将主要有机物还原、分解,如厌氧消化法等。90、生物膜法:是通过在滤材表面上生长的生物相进行污水的净化的方法称为生物膜法。91、厌氧消化处理:是利用厌氧菌将工厂废水、下水污泥中所含的有机物进行分解的方法称为厌氧消化处理。94、发酵产率:是单位操作时间、单位发酵罐容积生产的发酵产物量,有小时产率(又称发酵指数)和年产率两种表示方法。96单位产量发酵成本:发酵产生单位数量产物所投入的固定成本与可变成本之和,叫做单位产量发酵成本。知识点2 、1923年弗莱明发现了青霉素。5、中国维生素C“两步发酵法”研究成功,居世界领先水平,已向国外技术转让。8、初级代谢产物生成多在微生物生长的对数期产生。9、次级代谢产物的生成多在菌体生长的静止期。10、形成次级代谢产物时期又叫生产期。11、生物转化最明显特点是特异性强。12、利用生物技术所获得的生物细胞进行培养的新型发酵,称为生物技术的生物细胞发酵。13.深层培养法据供气方式不同可分为振荡培养和深层通气(搅拌)培养。15、深层培养所需氧气是外界通入空气中的氧经溶解后提供的。16、种子制备过程是贮存菌种生长繁殖,得到良好的孢子或生物细胞,再制足够量菌丝体,然后进行发酵。17、种子制备方式包括菌丝进罐培养和孢子进罐培养两种。18、发酵过程中,培养菌及培养设备都必须经过灭菌。19、在发酵过程中,通入的空气或中途补料都要无菌。21、在发酵产物分离纯化技术中,最好的方法是层析。23、产酶的主要微生物有细菌、酵母菌、霉菌。24、微生物发酵的初级代谢产物主要由氨基酸、核苷酸、蛋白质、核酸、类脂、糖类等。25、次级代谢产物主要有抗生素、生物碱、细菌毒素、植物生长激素、色素。26、表面培养法的优点:简单易行、投资省,适用小型生产。27、深层培养法的优点:生产效率高、占地少、可人为控制。38、生长细胞、静止营养细胞、孢子或干细胞均可进行转化反应。39、转化反应包括脱氢反应、氧化反应、脱水反应、缩水反应、脱羧反应、氨化反应和异构化反应。40、发酵是整个发酵工程的中心环节。41、微生物的生长包括原生质量的增加细胞质量的增加。42、微生物的繁殖指细胞个体数目的增加。43、菌丝末端伸长和分支,交错成网状结构称菌丝体。44、放线菌的菌丝长度受遗传性的控制和环境的影响,其分支数量取决于环境条件。45、成晶节杆菌在葡萄糖-盐培养基上,球状体分裂成球状体。46、球状体肽聚糖的多糖主干长度为 20nm。48、细菌芽孢形成过程中,从0期到VI期大约需8h。50、积累初级代谢产物的微生物都是代谢失调的突变菌株。51、分批发酵时,产生菌生长周期分为三个时期,即菌体生长期,产物合成期,菌体自溶期。52、金霉素链霉素对6-甲基前四酰胺中间产物进一步修饰而形成四环素(或金霉素)。53、红霉素A生物合成,在红霉素内酰B与红霉糖和红霉糖胺以糖苷链连接后,就形成了红霉素D。54、红霉素组成部分的链霉胍生物合成中链霉胍合成的关键酶是脒基转移酶。56、初级代谢与次级代谢都受到核内遗传物的控制,而抗生素产生菌产生抗生素的合成同时受到核外遗传物质质粒的控制。57、将受到质粒控制的代谢产物称为“质粒产物”。58、细胞中ATP、ADP、AMP系统中可供利用的高能磷酸键的量度称能荷。59、当细胞内全部腺苷酸都是ATP,能荷为100%。60、微生物合成的初级代谢产物不仅用于菌体的自身生长繁殖,而且可被分离精制成医药用品。61、当细胞内全部腺苷酸都是AMP能荷为0。62、细胞内全部腺苷酸都是ADP能荷为50%。63、分批培养中,细胞生长繁殖的过程可分为以下几个时期:延滞期(适应期)、对数生长期(包括加速生长期)、稳定期(平衡期)、对数死亡期。64、从细胞生长至形成牙孢的I期,细胞内的蛋白质开始转移,同时开始分泌抗生素、淀粉酶、蛋白酶、核糖核酸酶67、两种以上末端产物的代谢途径的反馈抑制,其调节方式有:协同反馈抑制、累积反馈抑制、顺序反馈抑制、增效反馈抑制。70、末端产物的反馈抑制普遍存在于合成途径。71、当代谢过程中同化作用的速度超过异化作用时,细胞的原生质总量就不断增加,表现为细胞的增长。72、霉菌以无性孢子和有性孢子进行繁殖。73、当微生物细胞形态发生变化时,主要是细胞壁中肽聚糖组分变化。75、灰色链霉素既能合成链霉素,又能合成杀假丝菌素。76、次级代谢中,丙酸单位可由琥珀酰C0A转化、奇数碳脂肪酸降解、支链氨基酸降解等形式。77、次级代谢产物分子中含有的糖以O-糖苷、N-糖苷、S-糖苷、C-糖苷与糖苷配体连接。79、发酵工业要采取措施来打破菌的正常代谢,使之失去调节控制,而积累大量代谢产物。80、菌种的生产能力决定于菌种的遗传特性和生理状态。81、菌种的性状实际上是孢子群体的特征,群体较纯的,传代后变异较少。82、常用的自然选育方法是单菌落分离法。83、从突变诱发的影响看,修复系统可以分为校正差错和引起差错。84、具有校正差错的性质不利于突变的诱发。86、一切有利于蛋白质合成的因素都有利于提高突变率。87、大肠杆菌在对数生长期含有2-4个核质体,当其中一个核发生改变时,这细胞即变成异核体。88、芳香族氨基酸营养缺陷型可以增产氯霉素。89、头孢菌素产生菌的亮氨酸营养缺陷性可增产头孢菌素C。90、菌种的发酵产量决定于菌种的遗传特性和菌种的培养条件。91、菌种选育在生产上常用方法有自然选育、诱变育种、杂交育种、分子育种。92、从前突变到突变,具有校正差错的性质的修复作用有光复活作用、切补修复、DNA多聚酶校正作用。93、从前突变到突变,具有引起差错的性质的修复作用有重组修复、SOS修复系统。94、诱变育种包括三个环节突变的诱发、突变株的筛选、突变高产基因的表现。95、影响突变诱发的因素有遗传特性、诱变剂、菌种的生理状态、诱变处理时环境条件。96、在随机筛选中,为提高筛选效率,可采用下列方法增大筛选量:摇瓶筛选法、琼脂块筛选法、筛选自动化和筛选工具微型化。98、用微生物发酵方法生产药物,首先要有一个良好的菌种。99、菌种选育的目的是改良菌种的特性。100、采用单菌落分离法有时会夹杂一些由两个或多个相邻的孢子所长成的菌落,另外不同孢子的芽管间发生吻合,也可形成异核菌落。101、在转录时,DNA双连解开更有利于诱变剂作用。103、光复活作用中有一种为可见光所激活的酶在起作用。104、核酸內切酶、核酸外切酶、DNA多聚酶I、DNA多聚酶III在DNA的切补修复中起作用。105、Ba2+对DNA多聚酶的31核酸外切酶活性有抑制作用,从而可提高突变率。109、对细菌和放线菌,制备原生质体主要采用溶菌酶;对酵母菌和霉菌,一般采用蜗牛酶和纤维素酶。110、水是构成菌体细胞的主要成分,又是一切营养物质传递的介质。111、由已知组成成分的各种营养物质组成的培养基叫合成培养基。112、由一些组成成分不完全明确的天然产物与一些无机盐组合的培养基叫复合培养基。113、在培养基的筛选方法中,均匀试验设计法具有试验点均匀分散特点。114、分批发酵工艺可分为菌种发芽生长、扩大菌体繁殖、发酵罐内的菌体生长和产物合成等几个培养过程。115、培养基的原材料归纳起来有碳源、氮源、无机盐和微量元素、水、生长因子和前体等。117、工业发酵中常用的糖类按化学结构可分为单糖、双糖、多糖、淀粉水解液和多种糖蜜。118、工业生产中用的双糖主要有蔗糖、乳糖、麦芽糖。119、工业发酵用的多糖有糊精、淀粉及其水解液。120、工业发酵中常用有机氮源有黄豆饼粉、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、菌丝体和酒精等。121、工业发酵中常用无机氮源有氨水、硫酸铵、氯化铵、硝酸盐。123、培养基按生产中的用途(或作用)可将生产上应用的培养基分为孢子培养基、种子培养基和发酵培养基。124、生产中按某些特殊用途的培养基又可分为分离纯化培养基、原生质体再生培养基、鉴别培养基、生物检测培养基。125、培养基的筛选方法中常采用的有单因子试验法、正交试验设计和均匀设计等。127、氮源的主要功能是构成微生物细胞和含氮的代谢产物,当培养基碳源不足时可作为补充碳源。128、在培养基中加入适量的生理酸性物质和生理碱性物质,可以调节发酵液的PH值。129、铁是菌体的细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化物酶的组成因素。130、常用的消沫剂有植物油脂、动物油脂和一些化学合成的高分子化合物。131、糖类在高温条件下易被破坏、容易产生化学反应,形成与5-甲基糠醛和棕色的黑精。133、一般说灭菌是否彻底,是以能否杀死热阻大的芽孢杆菌为指标。134、一般杀死微生物营养体E值为200-270KJmol,杀死微生物芽孢的E值为400KJmol以上,一般酶类和维生素分解的E值为80000KJmol左右。135、工业生产中培养基灭菌方法有分批灭菌和连续灭菌。136、连续灭菌时,培养基中的悬浮颗粒不能大于2nm。137、在生产实践中,一般采用连消系统对培养基灭菌时,维持时间t2定为5-7分。138、抗生素等多数品种发酵,耗氧最大,无菌程度要求十分严格,所以空气必须先经过严格的无菌处理后才通入发酵罐内,以确保生产的正常运转。139、目前发酵工业大多数采用介质过滤除菌法来制备大量的无菌空气。140、把空气中的各种微粒和极少量的游离微生物捕集起来以除掉的方法为介质过滤除菌。141、染菌是发酵工业的大敌。142、工业生产中常用的灭菌方法有化学物质灭菌、热灭菌、辐射灭菌和过滤介质除菌。143、获取无菌空气的方法有多种如辐射灭菌、化学灭菌、静电除菌、过滤介质除菌等。144、纤维介质除菌,捕集作用的机制有惯性冲击、拦截、扩展、重力沉降和静电吸附等5种。145、空气过滤常用介质有棉花、棒状活性炭、玻璃棉、超细玻璃纤维纸、石棉滤板等。146、目前采用的无菌室试验方法有肉汤培养法、双碟培养法、斜面培养法。147、化学物质不适合用于培养基的灭菌,只适合用于局部空间或某些器械的消毒。148、紫外线对营养细胞和芽孢均有杀灭作用,但穿透力很低,只适用于表面灭菌。X射线的穿透力很强,但不适用于大生产使用。149、工业生产中热灭菌采用的条件是1600C,1h。150、在灭菌过程中微生物随时间而逐渐死亡,其减少的速率与一瞬间残留的菌数成正比,这就是对数残留定律。153、加热灭菌可用蒸汽、电能、空气压缩过程中产生的热量进行灭菌。154、空气过滤介质要求除菌效率高、能耐受高温高压,不易被油水污染、阻力小、成本低、易更换。155、为了缩短无菌试验判断时间,有时向培养基中加入赤霉素、对氨基苯甲酸等生长激素,促进杂菌生长。156、菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序,该工序又称为种子制备。158、种子制备一般包扩两个过程,孢子制备过程和种子制备过程。159、采用母斜面孢子接入液体培养基有利于防止菌种的变异。161、菌种进入种子罐的方法有两种,孢子进罐法和摇瓶菌丝进罐法。162、将孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐中,这就是摇瓶种子。164、发酵的目的是获得大量的发酵产物。166、摇瓶种子的质量主要以外观颜色、效价、菌丝浓度或粘度以及糖氨代谢、PH变化为指标,符合要求方可进罐。170、丝状体在斜面培养基上的生长发育过程可分为5个阶段:孢子发芽和基质菌丝生长阶段、气生菌丝生长阶段、孢子形成期、孢子成熟期、斜面衰老菌丝自溶阶段。171、种子质量主要受孢子质量、培养基、培养条件、种龄和接种量等因素影响。172、发酵工业生产上常用的种子质量标准:细胞菌体、生化指标、产物生成量、酶活力等。173、氮源丰富有利于菌丝繁殖而不利于孢子的形成。174、霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。175、霉菌的培养温度一般为25-280C,培养时间为4-14天。176、种子罐的级数主要决定于菌种的性质和菌体生长速度及发酵设备的合理运用。177、孢子的培养工艺一般选择在孢子成熟阶段终止培养。178、凡接种后菌落均匀分布整个斜面,隐约可分菌体的生理状况。179、斜面低温利用低温降低菌种的新陈代谢,使菌种的特性在短时期内保持不变。180、微生物在-1300C以下,新陈代谢活动停止,这种环境可永久保存微生物菌种。181、沙土管保藏法,沙和土的比例一般为3:2或1:1。182、需氧发酵的全过程必须不断向培养液中提供氧气。183、培养液中的溶解氧只能维持菌体生命活动20-50s,如不向培养液中连续供给氧气,菌体的呼吸将会受到强烈抑制。184、在以葡萄糖为碳源的大肠杆菌形成1g新细胞的耗氧量为0.4g。185、以甲醇为碳源的假单胞菌形成1g新细胞的耗氧量为1.2g。189、在补料分批发酵过程中,一般补料后,摄氧率均呈不同程度的增大。190、培养液中溶质浓度影响氧的浓度,当然直接影响菌体的摄氧能力。191、由于氧很难溶解于水,所以供氧方面液膜阻力是氧溶于水时的限制条件。192、在供氧方面阻力中,1K1是气体主流与气-液界面间的气膜阻力。193、在供氧方面阻力中,1K2气-液界面阻力。201、一般的细菌和酵母菌的发酵液都属于牛顿型液体。202、达到一定浓度的高分子溶液、胶体、霉菌和放线菌的发酵液、含有淀粉的培养基等多为非牛顿型液体。203、发酵液,特别是含有固形物质数量较多的发酵液,往往表现为非牛顿型液体特性。204、要想增加氧传递的推动力(C*-CL),就必须设法提高C*或降低CL。206、搅拌器出现“气泛”现象时的空气流速称为“气泛点”。208、影响氧饱和浓度的主要因素:温度、溶液的性质、氧分压。209、影响微生物需氧量的因素有:菌种的生理特性、培养基组成、溶氧浓度、培养工艺条件等。210、供氧方面的阻力有1K1、1K2、1K3、1K4。需氧方面的阻力有1K5、1K6、1K7、1K8。211、与菌种遗传性相关的阻力:1K7、1K8。213、溶解氧是需氧发酵的必备条件。215、在实际生产中,常用丰富培养基,促进菌体迅速繁殖,菌浓增大,引起溶氧下降。216、临界菌体浓度是菌体的遗传特性和发酵罐的传氧特性的综合反映。220、要改善后期出现糖利用缓慢、菌浓度稀、PH值下降的现象,提高发酵单位,可补加尿素。221、发酵中后期,对于分批发酵来说,溶氧浓度变化比较小。222、补料分批培养简称FBC。223、在微生物发酵中,有的基质又是合成产物必须的前体物质,浓度过高,就会影响菌体代谢或产生毒性,使产物产量降低。224、发酵生产和试验采用的物理参数:温度、压力、搅拌转速、搅拌功率、空气流量、粘度、浊度、料液流量。227、在发酵过程中,PH值的变化决定于所用的菌种、培养基的成分和培养条件。228、发酵的需氧量受菌体浓度、基质的种类和浓度以及培养条件等因素的影响。229、FBC的类型,就补料方式而言,有连续流家,不连续流加或多周期流加。230、FBC从反应器中发酵体积来分,又有便体积,恒体积之分。231、FBC从反应器数目分类又有单级和多级之分。232、FBC从补加培养基的成分来分,又可分为单组分补料和多组分补料。233、发酵工业常用的消泡剂主要有天然油脂类、高碳醇、脂肪酸和脂类、聚醚类、硅酮类4大类。234、要确定一个合理的放罐时间,须考虑下列因素:考虑经济因素、产品质量因素、特殊因素。235、从产物形成来说,代谢变化就是反映发酵中的菌体生长、发酵参数和产物形成速度这三者之间的关系。236、在产物形成阶段,产生菌的呼吸强度一般无显著变化,菌体物质的合成仍未停止。237、在产物合成阶段代谢变化是以碳源的分解代谢和产物合成代谢为主。238、比生长速率大的菌体,菌浓增长也迅速,反之就缓慢。239、发酵培养基一般选用含有快速和慢速利用的混合氮源。241、一般要求传感器能与发酵液同时高压蒸汽灭菌。243、OUR是指好氧率。244、CER是指CO2释放率。245、RQ是指呼吸商。246、RQ=CEROUR。247、发酵的过程的检测方法有物理测量、物理化学测量、化学测量、以及生物学和生物化学测量。249、发酵用传感器按其测量原理分为力敏原件、热敏元件、光敏元件、礠敏元件、电化学传感器。250、发酵过程主要在线传感器:PH传感器、复膜溶氧探头、氧化还原电位、溶二氧化碳传感器等。251、发酵过程反馈控制可分为开关控制、PID控制、串级反馈控制、前馈反馈控制。253、往复式摇瓶机的往复频率为80-120次min,冲程为8-12cm。旋转式摇瓶机的旋转速率一般为60-300rmin,偏心距为3-6cm。254、往复摇瓶机适用于培养单细胞菌体。255、往复摇瓶机用于培养丝状菌时,则在培养基表面上形成固体菌膜。256、中间工厂采用的小型发酵罐体积一般为10-15L。257、工厂规模采用的发酵罐一般为15-50m3。258、工业发酵过程的研究,一般分为三种规模,即实验室规模、中试工厂规模、工厂生产规模。259、微生物发酵的实验室研究有:研究菌种的保藏、研究菌株在固定培养基上培养和繁殖条件、考查培养基最适组成、实验室规模的培养技术。262、COD是指化学需氧量。263、BOD5是指5天生化需氧量。264、好氧生物处理方法有生物膜法、活性污泥法、生物氧化塘等。265、厌氧消化处理方法主要有上流式厌氧污泥床法、厌氧生物膜法等。266、生物处理法的特殊处理方法有除汞、除酚、除铁、除锰等。270、甲烷发酵的最适温度,中温发酵为37-380C,高温发酵为53-540C。271、甲烷发酵的最适PH为7左右。272、青霉素菌丝菌渣只能当作饲料或肥料使用。273、产物在发酵液中的浓度一般以gL或kgm3,也有用百分数表示的。274、对抗生素来说,通常采用活性单位,称为发酵单位或发酵效价,以uml表示。275、如果单位产量发酵成本不上升,那么批产量越高,批效益也越高。276、由于发酵成本中一般以原材料占首位,故基质转化率的发酵过程,发酵成本较低。278、发酵过程中降低原料成本的方法有菌种改良、发酵工艺改进、选用廉价原材料。280、发酵过程中提高设备利用率的方法有缩短非运转时间、增加菌体浓度、加大发酵液收获体积。281、发酵生产用菌株的最关键性能是它的比生产率。重点:1、 微生物转化及其特点:微生吻转化就是利用微生物细胞的一种或多种酶把一种化含物转变成结构相关的有经济价值的产物的生化反应。特点:生物转化最明显的特点是特异性强,包括反应特异性(反应类型):结构位置特异性(分子结构中的位置):立体特异性(特殊的对映体)。2、维生素C“两步发酵法”的生物转化过程:把山梨醇转化成L-山梨糖,再用两种菌株自然组合的菌株进行第二步转化,就可将L-山梨糖转化成a-酮基-L古龙酸。 3、发酵过程要求的无菌条件:培养基及培养设备都必须经过灭菌;通入的空气或中途补料要无菌;转移种子要采用无菌技术。4、发酵液分离方法有:凝胶过滤;离子交换;亲和层析;疏水层析;聚焦层析;亲和分配;亲和沉淀。5、微生物发酵工业发展迅速的原因:微生物发酵工业能够得到如此迅速的发展,主要源于微生物三个重要特点:微生物的比表面积非常大,有利于迅速摄取所需要的各种营养物质,维持极高的生长繁殖速度和很高的生物合成活动;微生物能够进行及其多样化的代谢反应(尤其是次级代谢,可为人类提供无穷无尽的次级代谢产物);容易适应多种环境条件,可以把菌种从自然界转种到实验室或工业生产,进入人工培养,在廉价的碳源、氮源的条件下合成若干种有价值的代谢产物。6、细菌典型生长曲线各时期特点:分批培养中,细胞生长繁殖的过程可分四个时期,其各时期特点为:(1)延滞期(适应期)此期内微生物数目保持不变或略有降低,菌体的生长速率为零。该期的菌体代谢机能非常活跃,对环境适应能力强,诱导酶类形成得最快(进入对数生长期的细胞;酶的诱导能力下降),单个细胞的体积和质量显著增加。此期中细胞内DNA含量特别高。延滞期细胞对物理和化学因子极为敏感,抵抗力很弱。(2)对数生长期(包括加速生长期)菌体开始生长繁殖,生物速度迅速增加,达最大值并保持相当长时间。细胞数目以几何级数增加,即细胞数目的对数与培养时间呈直线函数关系。细胞的化学组成与生理学性质稳定,代谢极其旺盛。(3)稳定期(平衡期,包括减数生长期)此期内细胞数量达最高峰。细胞的生长速率与死亡速率达到动态平衡,总菌数不变或稍有增加,并可维持一段时间:这一期细胞内开始积累贮存物,如糖原、脂肪、异染颗粒等。大多数芽孢细菌形成芽孢。许多微生物在此期内合成大量的次级代谢产物。(4)对数死亡期稳定期的末期,培养基中营养物质几乎耗尽,而影响菌体代谢的毒性物质大量累积,造成细胞死亡速率迅速增加,细胞数量显著下降,并呈现多种形态,如原生质凝聚、形成菌丝断片、形成“沉投孢子”等。7、成晶节杆苗的球状体和杆状体细胞壁肽聚糖的差别:(1)杆状体的细胞壁肽聚糖具有更多交联,球状体投有;(2)球状体细胞壁肽聚糖的肽键之间的连接物有甘氨酸,杆状体细胞没有;(3)球状体肽聚糖的多糖主干长度为20nm,而杆状体细胞多糖主干长度为球状体的3倍。8、次级代谢与初极代谢关系:(1)从生化代谢方面看,次级代谢产物的生源说和生物合成途径虽然比较复杂,但是它们的合成途径与初级代谢途径相互交叉又相互制约,因此菌体代谢过程中产生的某些中间产物,既可用于合成初级代谢产物,又可用于合成次级代谢产物。这种中间产物叫做“分叉中间体”;催化次级代谢途径中各步反应的酶或酶系,既有初级代谢途径中的酶,如还原型辅酶等,又有次级代谢特有的酶,如青霉素合成的酰基转移酶;(2)从遗传控制看,级代谢与次级代谢都受到核内遗传物质的控制,次级代谢产物合成同时受到核外遗传物质质粒的控制,因此,有人将受到质粒控制的代谢产物称为“质粒产物”。9、初级代谢中影响酶活性的因素:(1)环境条件;(2)基质种类和浓度;(3)代谢中间产物性质;(4)中间产物在总代谢中的作用的调节和控制。10、初级代谢产物合成中的主要调控机制:酶活性的调节,包括酶的激活和抑制作用酶合成的调节,分为诱导和阻遏调节能荷调节。11、菌种选育的基本内容:根据菌种自然变异而进行的自然选育,以及用人工方法引起菌种变异或形成新的杂种,再按照工业生产的要求进行筛选采获得新的变种或杂种,这是当前菌种选育的基本内容。12、菌种选育在生产常用的方法:生产上广泛应用的自然选育、诱变育种等方法属于经验育种的范畴,主要是通过突变和筛选来获得优良的菌株。此外还有杂交育种(主要是原生质体融合)、分子育种等定向育种方法 ,分子育种主要是通过DNA重组来获得优良菌株。13、菌种遗传特性改变主要原因:(1)异核现象导致菌种这一微生物群体发生变异; (2)自发突变导致菌种遗传特性改变。由于DNA在复制过程中会出现偶然的差错,以及环境中某些物质和某些微生物自身的代谢产物对微生物有微弱的诱变作用,菌种以很低的频率发生自发突变;(3)突变所产生的变种或杂交重组所形成的杂种往往不稳定,容易发生回复突变或产生分离子,以致在菌种这一群体中形成具有不同基因型的个体。14、菌种处于不利于发酵的生理状况的原因:(1)一个菌种不是纯一的群体,而是由一些变株混合组成,这些变株所占的比例决定该菌种的特性;(2)菌种培养基可通过影响菌种的生理状况而影响发酵产量。菌种培养基营养过于丰富不利于孢于形成而不利于发酵。菌种培养基营养贫乏也同样不利于发酵。因为菌种在营养贫乏的培养基中多次传代,会使菌体细胞内缺乏某些生长因子而衰老甚至死亡;(3)在某些培养条件下,菌体的某些基因处于活化状态或阻遏状态,而使得菌种的生理状态改变。这种改变可能以类似于生理性迟延或细胞分化的机制保持较长一段时间。15、制定诱变育种筛选目标时应考虑以下几个问题:诱发突变是随机而不定向的,有可能出现多种多样变异性状的突变株。除了高产性状外,还要考虑其它有利性状。例如:生长速度快、产孢子多;消除某些色素或无益组分;能有效利用廉价发酵原材料;改善发酵工艺中某些缺陷(如泡沫过多、对温度波动敏感、菌丝量太多、自溶早、过滤困难等)等等。但是所定的筛选目标不可太多,要充分估计本实验室的人力、物力和测试能力等,要考虑实现这些目标的可能性。16、次级代谢产物高产菌株的筛选方法:(1)利用营养缺陷型筛选;(2)筛选负变株的回复突变株;(3)筛选去磷酸盐调节突变株;(4)筛选去碳源分解代谢调节突变株;(5)筛选氨基酸结构类似物抗性突变株;(6)筛选二价金属离子抗性突变株;(7)筛选前体或前体结构似物抗性突变株;(8)筛选自身所产生的抗生素抗性突变株。17、影响原生质体制备的因素:(1)菌体的预处理;菌体的培养时间;(3)酶浓度;(4)酶解温度;(5)酶解时间;(6)渗透压稳定剂。18、培养基的种类:按培养基的组成成分可分为合成培养基和复合培养基(即称有机培养基或天然培养基);(2)依据在生产中的用途(或作用),可将大生产上应用的培养蓦分成孢子培养基、种子培养基和发酵培养基;(3)另外生产中还用某些特殊用途的培养基,如菌种选育用的分离纯化培养基、原生质体再生培养基、鉴别培养基、抗生素生物效价检测用的生物检测培养基等。19、连续灭菌的形式:(1)由热交换器组成的连续灭菌系统;(2)蒸汽直接加热培养基的连续灭菌系统;(3)由连消塔、维持罐和冷却器组成的连消系统。20、提高空气洁净度的两种措施:(1)提高吸气口的高度。一般以距地面5-10m高为好,并吸气口处装置防止杂物吸入的筛网;(2)空气进入空压机之前先经粗效过滤器,以减少进入空压机的大颗粒灰尘,保证空压机的效率。21、培养液是否污染杂菌的分析方法有:无菌试验、培养液的显微镜检查、培养液的生化指标变化情况。其中无菌试验是判断染菌的主要依据。22、培养液染菌的判断方法:以无菌试验中的酚红肉汤培养和双碟培养的反应为主,以镜检为辅。每个无菌样品的无菌试验,至少用2只酚红肉汤和1只双碟同时取样培养。要定量或用接种环蘸取法取样,不宜从发酵罐直接取样。因取样量不同,影响颜色反应和浑浊程度的观察。如果连续3个时间的酚红肉汤无菌样发生颜色变化或产生浑浊,或双碟上连续3个时间样品长出杂菌,即判断为染菌。有时酚红肉汤反应不明显,要结合镜检查确认连续3个时间样品染菌,即判为染菌。23、细菌孢子的制备:细菌的斜面培养基多采用碳源发量而氮源丰富的配方,牛肉膏、蛋白胨等常用作有机氮源。细菌培养温度大多数为37,少数为28,细菌菌体培养时间一般为1-2day,产芽孢的细菌则需培养5-10day。24、摇瓶种子制备中对培养基的要求:种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各中种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更近种子罐的培养基配方。25、菌种保藏的原理:菌种保藏主要是根据菌种的生理、生化特性,人工创造条件使菌体的代谢活动处于休眠状态。保藏时,一般利用菌种的休眠体(孢子、芽孢等),创造最有利于休眠状态的环境条件下,如低温、干燥、隔绝空气或氧气、缺乏营养物质等,以降、低菌种的代谢活动,减少菌种变异,达到长期保存的目的。26、菌种保藏的方法:(1)斜面低温保藏法;(2)液体石蜡封存保藏法;(3)固体曲保藏法;(4)砂土管保藏法;(5)冷冻干燥保藏法;(6)液氮超低温保藏法。27、衰退菌种复状的措施:(1)纯种分离:采用自然分离的方法,衰退菌种的细胞群体中一部分仍保持原有典型性状的单细胞分离出来,通过扩大培养可以恢复菌种的原有性状;(2)淘汰衰退的个体:芽孢产生菌经高温(80)处理,则不产芽孢的个体被淘汰;(3)选择合适的培养条件:一般来说将保藏后的菌种接种在保藏前所用的同一培养基上,有利于菌种原有性的恢复。但是应该认识到,菌种经过多次传代培养或菌种保藏后,菌种的生理状态可能发生较大的变化,特别是可能出现某些生长因子的缺乏。由于菌种分离培养基和菌种斜面培养基要求营养成分相对贫乏,在这样的培养基上连续传代很可能导致菌种群体的生理特性衰退。应根据具体情况适当补加生长因子。28、在次级代谢产物发酵过程中,C长临和C合临随菌种的生理特性而变化情况的3种情况:(1)C长临和C合临大至相同;(2)C长临大于C合临;(3)C长临小于C合临。29、影响微生物需氧量的因素:(1)微生物种类和生长阶段;(2)培养基的组成(3)培养液中溶解氧浓度CL的影响;(4)培养条件;(5)C02的影响。30、影液相体积氧传递系统KLA的主要因素有:搅拌效率;空气流速;发酵液的理化学性质;泡沫状态;空气分布器形状;发酵罐的结构。 31、在初级代谢过程中,发酵中的菌体、基质和产物三者变化的基本过程是:(1)菌体进入发酵罐后就开始生长、繁殖,直达一定的菌浓。工业发酵中往往要接入处于对数期(特别是中期)的菌体,以尽量缩短期;(2)基质(如葡萄糖)浓度的变化,一般是随发酵时间的延长而不断下降,被用于菌体生长繁殖和产物的形成。溶氧浓度也随发酵过程的代谢而发生变化;(3)至于产物的形成,因为没有明显的产物形成期,所以它是随菌体生长在不断地进行的,有的与菌体生长成平行关系。32、初级代谢产物抗生素发酵过程的代谢变化过程:分为菌体生长期、产物合成期和菌体自溶三个阶段。33、氨基酸发酵生产中,根据发酵需氧要求不同可分为三类:(1)含谷氨酸、精氨酸和脯氨酸,它们在供氧充足的条件下,产量才最大,如果供氧不足,氨基酸合成就会受到强烈的抑制;(2)包括异亮氨酸、赖氨酸和苏氨酸,供氧充足可得最高产量,但供氧受限,产量受的影响并不明显;(3)有亮氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸,仅在供氧受限、细胞呼吸受抑制时,才能获得最大量的氨基酸,如果供氧充足,产物形成反而受到抑制。34、引起溶氧异常下降的原因:污染好气性杂菌,大量的溶氧被消耗掉,可能是溶氧在较短时间内下降到零附近,如果杂菌本身耗氧能力不强,溶氧变化就可能不明显;菌体代谢发生异常现象,需氧要求增加,使溶氧下降;某些设备或工艺控制发生故障或变化,也可以引起溶氧下降,如搅拌功率消耗变小或搅拌速度变慢、影响供氧能力,使溶氧降低。又如消沫油因自动加油器失灵或人为加量太多,也会引起溶氧迅速下降。其它影响供养的工艺

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