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采样面积(cm2). 2)致病菌检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次,按卫生部消毒技术规范204205页3.17.15原则检测致病菌。 4.结果判定: .&空气采样及检查方法:1.采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。2.采样方法:平板暴露法1)布点方法:室内面积30m2,设内、中、外对角线3点,内、外点布点部位距墙壁1m处;室内面积30m2,设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。2)采样方法:将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处,采样高度为距地面1.5m,采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5分钟,盖好立即送检。3.检测方法:将送检的平板置37温箱培养48h,计数菌落数。平板暴露法计算公式: 50000 N 50000N细菌总数(cfu/m3)= 158N AT 63.5855 A:为平板面积(cm2)。规定平板直径为9cm,平板面积为63.585cm2 T:为平板暴露时间(min)。规定暴露时间为5min。 N:为平均菌落数(cfu)4.结果判定:细菌总数(cfu/m3):标准见下表。致病菌检测:I、II、III类区域未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。5.注意事项:采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止10min后进行采样。采样时平板暴露时间为5min。手和皮肤粘膜采样及检查方法1.采样时间:在消毒后立即采样。2.采样方法:1)手:被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触部位,将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。2)皮肤粘膜:用5cm5cm标准灭菌规格板,放在备检皮肤处,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入10 ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。不规则粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。3.检测方法: 1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次,用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化的4548营养琼脂1518ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置361温箱培养48h,计数菌落数。计算公式: 平板上菌落数采样液稀释倍数 细菌总数(cfu/cm2) 采样面积(cm2) 2)致病菌检测:按卫生部消毒技术规范204205页3.17.15原则执行。4.结果判定:1)细菌总数(cfu/cm2):标准见下表2)致病菌检测:I、II类区域工作人员未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌为消毒合格,III、IV类区域工作人员未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上未检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。5.注意事项:皮肤粘膜采样处,若表面不足5cm5cm可用相应面积规格板采样。物品和环境表面采样及检查方法1.采样时间:在消毒处理后进行采样。2.采样方法:用5cm5cm标准灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面积100cm2,连续采样4个,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。3.检测方法:1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次,用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化的4548,营养琼脂1518ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置361温箱培养48h,计数菌落数。计算公式: 平板上菌落数采样液稀释倍数 细菌总数(cfu/cm2) 采样面积(cm2) 小型物体表面的结果计算,用cfu/件 表示2)致病菌检测:按卫生部消毒技术规范204205页3.17.15原则执行。4.结果判定:1)细菌总数(cfu/cm2):标准见下表2)致病菌检测:I、II、III、IV类区域均未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。5.注意事项:样本量及处理:见卫生部消毒技术规范197198页3.17.5.2(1)。内镜消毒灭菌效果采样及检查方法1.采样时间:在消毒灭菌后、使用前进行采样。2.采样方法:用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水棉拭子,在被检内镜上从镜头至镜身反复涂擦,剪去手接触部位,将棉拭子投入到5ml含相应中和剂的生理盐水采样管中,立即送检。3.检测方法:1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次,用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化的4548营养琼脂1518ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置361温箱培养48h,计数菌落数。计算公式: 平板上菌落数采样液稀释倍数 细菌总数(cfu/cm2) 采样面积(cm2)2)致病菌检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次,按卫生部消毒技术规范204205页3.17.15原则检测致病菌。4.结果判定:灭菌后内镜,未检出任何微生物为合格。消毒后的内镜,细菌总数20cfu/件,未检出致病菌为合格。附表:各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落数卫生标准环境类别范围标准空气cfu/m3物体表面cfu/m2医护人员手cfu/m2I类层流洁净手术室、层流洁净病房10 5 5类普通

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