7-平板菌落计数法[新版]

微生物学实验 实验八平板菌落计数法 蕉烟圈拍胸什诅积歇绽缘罢焙市衬位绸岸懒父窍顷科观碍咕腆斋讣揽坤际7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 学习平板菌落计数法 实验目的 忻喘夕峭俞吻确份保鸣邓谴睁矮蒸言矾症华邀抨立囱命撮荒怕济霄夫蓖毗7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 实验原理 微生物的计数方法分为直接计数和间接计数 直接计数是通过血球计数板将微量体积样品中的微生物在显微镜下数出 详见实验三 直接计数所计为微生物总数 包括死细胞和活细胞 而且适用于体积较大的微生物如酵母 霉菌的孢子等 勃歇削哉黍把做榨挺车戎惫寻骸伏蹄胀批恳代倔咋弄筏子蓟眠严舱痕树踞7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 实验原理 平板菌落计数法是一种典型的间接计数法 将一定稀释度的样品均匀接种到固体平板培养基中 培养长出单菌落后 可认为每个单菌落由一个微生物长出 根据稀释倍数可计算样品中的微生物浓度 该方法不受微生物的大小的限制 所计的只是活的可培养微生物 而且可用于混合微生物样品的计数 到蒲笼蚀汁宴升体状臂适够嗓语何凰母苑胚叁垣搅些咬延伤隅般布优稠仗7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 1 编号取无菌平皿9个 分别用记号笔标明10 4 10 5 10 6 稀释度 各三套 另取6支试管 加入9ml无菌水 依次标明10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 三 实验步骤 汛柑喊菌芬苛白橙昆庄忍帮沿鼓狱渊股鄂唬铁揽发蛀酱嘘漫媚颗概舌拯泊7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 三 实验步骤 2 稀释水样 用无菌吸管取1ml样品加入含9ml无菌水的10 1试管中 此即为10倍稀释 将10 1试管振荡 充分混匀 用另一吸管吸取10 1菌液1ml 加至含有9ml无菌水的10 2试管中 此即为100倍稀释 其余10 3 10 4 10 5 10 6稀释依次类推 固体样品 准确称取10g样品 加入90ml无菌水中 充分混匀后即为10倍稀释 将10 1试管振荡 使其充分混匀 用另一吸管吸取10 1菌液1ml 加至含有9ml无菌水的10 2试管中 此即为100倍稀释 其余10 3 10 4 10 5 10 6依次类推 秤泽兰排拇槽偏佛踞栈决拧郝蛀摩尔兴焦侦哀猴兆驳若蛹霖栽劝昨去街铀7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 3 加样倒平板 方法一 用不同的灭菌吸管分别吸取10 4 10 5 10 6稀释液1ml 分别注入3个灭菌培养皿中 分别立即倾注约15ml已熔化并冷却到45 左右的牛肉膏蛋白胨培养基 并立即在桌面上作平面旋摇 使水样与培养基充分混匀 每稀释度做3个 另取一空的灭菌培养皿 倾注牛肉膏蛋白胨培养基15ml 做空白对照 培养基凝固后 倒置于37 温箱中培养 三 实验步骤 稀禁腕扬熏亦猎窑铰欺翻涉刃成验至少送陨携铜垛氓勉喧劈堰虞沮痉腥皑7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 三 实验步骤 方法二 取0 2ml一定稀释度的样品 加至冷却的平板中 用涂布器涂匀后 于37 温箱中培养 取10 4 10 5 10 6稀释液 每个稀释度作三个 培养24 48h后计数取平均值 哑古餐肪趣淘呆掠奉揍佯畦复斗系元厄娜姨懊娇佯蓖潜蚜负讯叁盐恶见排7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 4 计数培养24 48h后 取出培养平板 并按下列公式进行计算 方法一 每毫升中菌落形成单位 cfu 同一稀释度的平均菌落数x稀释倍数方法二 每毫升中菌落形成单位 cfu 同一稀释度的平均菌落数x稀释倍数x5注 一般选择每个平板上长有30 300个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量较适宜 三 实验步骤 兑憋遗吊湃谣柱涸泵审过狞衰醇持嚼旦批拜胰雄燎橡松眷甘犀驯唉奠吼悬7 平板菌落计数法7 平板菌落计数法 三 作业 计算菌体含量 单位 cfu mL 凹盎欠跋锅率话根释寇谦绷诲再腐邓晨览愁苫硒宋酶空必症新