1.病 理学

病理学 广东药学院基础学院病理教研室杨星 What Whatisdisease 疾病 狭义 身体的结构 功能异常广义 身体 心理 社会Whatispathology 病理学 研究疾病 病因 etiology发病机制 pathogenesis病理变化 代谢功能 临床症状形态结构临床病理联系表现体征转归和结局 What 人体病理学尸体剖检 autopsy 活体组织检查 biopsy 临床诊断最重要细胞学检查 cytology 实验病理学 病理生理学动物实验组织和细胞培养 外科病理学 诊断病理学 尸体剖检 Autopsy 对死者遗体病理解剖和显微镜观察意义 1 查明死因 明确诊断 2 及时发现确诊流行病 传染病 地方病 新发病 3 积累疾病病理标本 材料 Autopsy 活体组织检查 Biopsy 局部切取 钳取 搔刮 摘取等手术 从活体内获取病变组织意义 1 术后病理切片 准确诊断 2 术中冰冻切片 快速诊断 3 免疫组化 特殊染色 电镜 进一步诊断 细胞学检查Cytology 采集病变处细胞 涂片染色诊断 1 脱落细胞 鼻咽 口腔 食管 女性生殖道 2 分泌物 痰 乳腺溢液 前列腺液 3 排泄物 尿液 4 体液 胸腹腔积液 心包积液 脑脊液 5 细针穿刺 FNA 乳腺 肝 肾 前列腺 甲状腺 淋巴结只能完整切除 穿刺意义不大 细胞学检查 返回 脱落细胞 Shedcellfromuterinecervix normal Cancer 动物实验 AnimalExperiment 实验动物标本 实验动物标本取材 组织与细胞培养 CellCulcure 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 免疫组化原理 免疫组织化学技术应用抗原 抗体特异性结合的原理 化学反应使标记抗体的显色剂 荧光素 酶 金属离子 同位素 显色 确定组织细胞内抗原 多肽和蛋白质 常用显色剂DAB含Ag 显示为棕黄色颗粒 免疫组化乳腺 雌 孕激素靶器官 正常乳腺具有雌激素受体 ER 孕激素受体 PR 乳腺癌可有可无 临床常规检测 免疫组化 乳腺癌 c erbB 2 HER 2 neu 表达 常规检测 原癌基因突变 编码人表皮生长因子受体 免疫组化 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 电镜 光学显微镜 无法看清小于0 2 m的细微结构 电镜 分辨力可达0 2nm 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 组织芯片 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交 ISH 原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 用已知的标记单链核酸为探针 按照碱基互补的原则 与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合 形成可被检测的杂交双链核酸 由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列 因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位 原理 核酸原位杂交 ISH 乳腺癌Her 2基因 致癌基因 Her 2基因 位点 17q11 2 q12 编码蛋白 跨膜蛋白 与表皮生长因子受体部分同源 25 30 乳腺癌病人都有HER 2的扩增 HER 2基因扩增是决定Herceptin治疗是否有效的关键性指标 核酸原位杂交 ISH 荧光核酸原位杂交 甲状腺滤泡 荧光原位杂交 FluorescenceinsituHybridization FISH是原位杂交技术大家族中的一员 因其所用探针被荧光物质标记 基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性 通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象 即维持其原位 的前提下对靶核酸进行分析 荧光核酸原位杂交 荧光核酸原位杂交 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交 ISH 原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 宫颈鳞癌中HPV16CTSE增强子原位PCR检测结果 原位PCR 原位PCR 是在组织细胞里进行PCR反应 既能分辩鉴定带有靶序列的细胞 又能标出靶序列在细胞内的位置 材料 实验用的标本是新鲜组织 石蜡包埋组织 脱落细胞 血细胞等 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交 ISH 原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 激光共聚焦显微镜 1 在不损伤细胞的前提下观察活细胞 活组织 最大优势 2 可定位到亚细胞水平和分子水平 3 扫描限制在样品的一个平面内 调节调焦深度 可以获得样品不同深度层次的图像 计算机分析和模拟 三维图像重建 激光共聚焦显微镜 激光共聚焦 激光扫描共聚焦显微镜动态观察观察活细胞 活组织 精子与受精卵 激光共聚焦显微镜测细胞内Ca2 的同时利用非损伤微侧技术测量外部的Ca2 病理技术 大体观察组织细胞学观察免疫组化电镜组织芯片核酸原位杂交 ISH 原位PCR激光共聚焦显微切割流式细胞技术 显微切割 病理技术 大体观察组织细胞学观察