HBV宫内感染与孕期使用乙肝免疫球蛋白关系.doc

HBV宫内感染与孕期使用乙肝免疫球蛋白关系【摘要】目的探讨孕期使用乙肝免疫球蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的保护作用及其对孕妇病毒滴度的影响。方法以HBsAg阳性孕妇及其新生儿为研究对象，以孕期使用过乙肝免疫球蛋白的孕妇为干预组，其余为对照组，比较2组乙型肝炎病毒(HBV)宫内传播发生率、病毒载量的差异，探讨乙肝免疫球蛋白的保护作用及其机制。结果干预组孕妇210例，有10例新生儿发生宫内感染；对照组402例，有15例发生宫内感染，差异无统计学意义。相关分析显示，乙肝免疫球蛋白使用剂量与HBV DNA拷贝数、HBsAg滴度无关。结论孕期使用乙肝免疫球蛋白不能降低孕妇病毒载量，对HBV宫内传播也无保护作用。 【关键词】 肝免疫球蛋白 宫内传播 乙型肝炎Association of administration of hepatitis B immunoglobulin during pregnancy with intrauterine infection of HBVSHAO Zhong-jun,LI Jing-hua,XU De-zhong,et al.Department of Epidemiology,School of Public Health,Fudan University (Shanghai 200032,China) Abstract： Objective To explore the protective effect of HBIG administrated during pregnancy against HBV intrauterine infection and its candidate mechanism.Methods 210 HBsAg positive pregnant women who were consecutively collected and were administered with HBIG were selected as intervention group.402 consecutively collected HBsAg positive pregnant women who were not administered with HBIG were selected as controls.Incidence of HBV intrauterine transmission was compared between 2 groups.Titer of HBsAg and copies of HBV DNA in maternal sera of intervention group were detected for explorating its considerate mechanism.Results Ten neonates in intervention group and 15 in control group were detected as occurrence of HBV intrauterine infection and the difference was non significant by Chi-square test.There were no significant relation between titer of HBsAg or copies of HBV DNA and frequency of HBIG administration with R-value 0.039 or 0.012 respectively (P0.05).Conclusion HBIG administration during pregnancy didnt decrease the titer of HBsAg and copies ofHBV DNA,and the protective effect on HBV intrauterine infection was not found. Key words： hepatitis B immunoglobulin;intrauterine transmission;hepatitis B孕妇孕期使用乙肝免疫球蛋白(Hepatitis B immunoglobulin，HBIG)是阻断乙型肝炎病毒(Hepatitis Bvirus，HBV)宫内传播的主要方法之一。有研究认为,HBIG能降低孕妇体内HBV病毒载量，从而达到预防HBV宫内传播的效果1,2。然而其保护作用及预防机制都存有争议3。本研究对HBIG的保护作用及其对孕妇体内HBV病毒载量、HBsAg滴度的影响机制进行探讨，为HBIG的应用提供进一步证据。1 对象与方法1.1 对象 选取2002年10月2004年10月在陕西省妇幼保健院待产、HBsAg阳性孕妇及其所产新生儿210名为干预组，孕妇平均年龄(27.22.3)岁；选取19931997年HBsAg阳性孕妇402例及其所产新生儿为对照组，孕妇平均年龄(24.43.6)岁。干预组于孕晚期使用HBIG，每月1次(200U/次)，使用35次；具体剂量依据检测HBeAg状态、孕妇主观要求而定；对照组孕妇孕期不采取任何干预措施。1.2 血清标本收集 产前采集孕妇肘静脉血；采集新生儿出生24h内，未接受主、被动联合免疫前的股静脉血，1500r/min离心分离血清，-20保存备用。1.3 孕妇乙肝标志物检测 孕妇血清HBsAg、HBeAg采用酶联免疫试剂盒(ELISA)检测(上海科华生物工程股份有限公司)，采用倍比稀释方法检测孕妇HBsAg滴度，然后用ELISA方法进行检测。采用PCR方法检测孕妇血清HBV DNA，引物、PCR反应条件见参考文献4；PCR阳性标本再行荧光定量PCR检测(上海轩吴科技发展有限公司)。HBVDNA滴度103拷贝/ml判为阳性，否则判为阴性;判为阳性者进一步量化。1.4 宫内感染诊断标准 干预组孕妇所产婴儿股静脉血HBsAg检测采用HBsAg诊断试剂(美国雅培公司)，检测程序及结果判读由Abbott System自动完成，以信噪比(Signal/Noiseratio，S/N)≥5为宫内感染诊断标准。对照组宫内感染病例的诊断标准以Western杂交方法检测新生儿外周血HBsAg(美国雅培公司)。1.5 统计分析 采用SPSS 10.0软件进行分析。2 结果2.1 孕期使用HBIG的保护作用(表1) 干预组210例孕妇中，HBeAg阳性47例，HBVDNA阳性40例；10例新生儿发生宫内感染。HBeAg阳性孕妇平均使用HBIG(3.851.25)次，HBeAg阴性孕妇平均注射(3.130.83)次。对照组HBsAg阳性孕妇402例中，HBeAg阳性133例；15例新生儿发生宫内感染。对照组和干预组孕妇HBeAg状态经χ2检验差异有统计学意义(χ2=7.98,P0.01)。对孕妇HBeAg状态进行分层分析，分层后2组宫内感染率差异均无统计学意义，合并OR=1.06，说明孕期使用HBIG的保护作用有限。表1 HBIG干预组与历史对照组宫内感染率比较（略）2.2 HBIG使用剂量对孕妇病毒载量的影响2.2.1 HBIG使用剂量与孕妇HBsAg滴度的关系 受血清标本量影响，本次共检测干预组孕妇血清HBsAg滴度179例，其中孕妇HBeAg状态、孕期HBIG注射剂量、宫内感染率等方面经统计学检验，与其余31例比较，差异均无统计学意义。46例孕妇血清HBsAg滴度1：2000；26例为1：4000，51例为1：8000，26例为1：16000，18例为1：32000，8例为1：64000，2例孕妇滴度为l：1280000，2例孕妇滴度为1：2560000。HBIG注射剂量与HBsAg滴度相关系数：r=0.012(P=0.866)。2.2.2 HBIG使用剂量与孕妇HBV DNA拷贝数的关系 210例HBsAg阳性孕妇经过PCR检测，HBVDNA阳性40例；定量分析显示6例孕妇HBVDNA拷贝数为109个，有1例为108个，有10例为107个，有14例为106个，有2例为104个，103个0例，103个3例。HBIG使用剂量与孕妇HBVDNA拷贝数相关系数r=0.039(P=0.836)。3 讨论 孕期使用HBIG是目前预防HBV宫内感染的常用措施，其主要依据是HBIG能中和病毒，降低孕妇体内的病毒载量，从而达到预防目的。然而HBIG的作用机制、预防效果都存有争议。高结坤等对HBsAg阳性孕妇使用HBIG，发现孕妇使用HBIG后新生儿血清HBsAg和HBVDNA检出率明显低于对照组，新生儿抗HBs阳性率显著高于对照组，其结论为孕期使用HBIG可预防宫内感染4。然而，Yuan等对HBsAg母亲及其新生儿进行长期随访，并持续监测孩子的外周血乙肝标志物，并没有发现HBIG保护作用3。本次研究未发现HBV DNA拷贝数、HBsAg滴度与孕期使用HBIG剂量的相关性，也未发现孕期使用HBIG对宫内传播具有保护作用。尽管没有收集到使用HBIG前HBVDNA拷贝数、HBsAg滴度等基线资料，但如此低的相关系数(接近于0)，说明孕期使用HBIG对孕妇体内的病毒载量无影响。 预防HBV宫内感染，干预措施必须满足以下条件：(1)干预时机一定要在宫内传播发生时或之前，而目前关于宫内感染的时机还不确定5,6。(2)HBIG对外周血HBV中和达到100，而目前孕期使用剂量还远达不到6。本次研究发现，HBIG干预后宫内感染发生率为4.7，与对照组比较差异无统计学意义，提示孕期使用HBIG不具保护作用。本次调查结果表明，孕期使用HBIG对HBV宫内传播保护作用有限；孕期使用HBIG对孕妇HBsAg滴度、HBVDNA含量无影响。【参考文献】 1Xiao XM,Li AZ,Chen X,et al.Prevention of vertical hepatitis B transmission by hepatitis B immunoglobulinin the third trimester of pregnancyJ.Int J Gynaecol Obstet,2007,96(3):167-170.2高结坤，胡先.乙肝免疫球蛋白阻断乙肝病毒母婴垂直传播的研究J.中国优生与遗传杂志，2006，14(10)：45-46.3Yuan J,Lin J,Xu A,et al.Antepartum immunoprophylaxis of three doses of hepatitis B immunoglobulin is no effective: a single-centre randomized study J.J Viral Hepat,2006,13(9):597-604.4Shao ZJ,Xu DZ,Xu JQ,et al.Maternal hepatitis B virus (HBV) DNA positivity and sexual intercourse arcassociated with HBV intrauterine transmission in China: a prospective case-control studyJ.J Gastroentero Hepatol,2007,22(2): 165-.70.5Ranger RS,Alain S.Denis F,et al.Hepatitis viruses:mother to child transmis