第四章--动物检疫技术

流行病学调查 动物检疫技术 临诊检疫技术 病理学检查技术 病料的采集 病原学检查技术 免疫学检查技术 内容提要 第一节流行病学调查 概念 俗称疫情调查 是对动物群体中疫病发生和流行的情况以及有关因素进行调查了解 可通过询问 现场查看 实验室检查 查验资料等多种方式 全面掌握相关资料 主要目的 监测疫情动态和突发疫情诊断 科学制定防控对策 一 日常调查 在动物群体未爆发疫情时开展的调查工作 以了解和掌握某区域 某时间内动物疫情动态 一 调查的分类和内容 如 某地区绵羊寄生虫区系分布调查 意在了解绵羊寄生虫感染情况 并证实当地存在的寄生虫虫种 针对性的采取驱虫措施 主动调查 预先设定方案 确定专题和范围 畜禽保健的重要工作 1 普查 对某区域或某特定动物群体中全部动物进行的调查 如每年春季或秋季进行牛结核病和布氏杆菌病的普查 在多雨年份的秋季对全部奶牛进行肝片吸虫病的检查 2 抽样调查 是从全部研究对象中随机抽选一部分动物个体或群体 即样本 进行调查 并据此对该区域疫情作出估计和推断 以少窥多 是经常应用的调查方法 二 暴发 应急 调查 应急调查 是指动物群体突发某种疫病时所开展的调查 这种调查时被动调查 是必须进行的工作 其目的是诊断疫情和查明原因 目的 了解疫病流行全过程以及与流行有关的因素 获取相关疫病的第一手感性材料 并对材料进行统计 分析 做出诊断性推理 暴发调查是诊断性调查和病因调查 应急调查的内容 本次发病情况调查 病史调查 养殖场基本情况调查和环境因素调查 重点 要查明疫病在蓄间 时间和空间的分布情况 即调查发病畜群的情况 发生的时间和发生的地区 初步得出诊断印象 提出防控对策 调查过程 二 调查方式和方法 1 询问调查 最简单 最重要的方法 了解发病经过 病史 饲养管理 防疫 生产性能等因素 2 现场观察 根据可能的疫病倾向 有重点的实地检查 如 疑似胃肠道消化系统时 应侧重注意观察饲料品质 水源卫生 粪便形状和尸体等 疑似呼吸系统疾病时 应注意观察畜舍环境卫生 饲养密度 通风换气等情况 3 查验有关资料 查验养殖档案 用药记录 畜禽标识等 4 实验室检查 采取病料送实验室检查 以发现病原 确定动物群体免疫水平或有关病因因素 确定传染源或传播媒介 5 生物统计 在疫情调查时可以应用生物统计学的方法 统计 整理和分析收集到的各种数据如发病数 死亡数 屠宰量及预防接种头数等 进一步比较 总结得出相应结论 三 流行病学调查常用的数 率 比 数 即数量 指绝对数 在疫情调查过程中 常用一些具体数据来描述疫情现状 如存栏数 发病数 死亡数等 率 指一定时间 范围及群体内 事件发生的频率 如发病率 致死率 患病率等 常用百分率来表示 比 是表示事件发生过程中 两个变数之间的对比 常用倍数或百分数表示 与率不同的是分母不包括分子 注意 比和率 1 发病率 在一定时间内 某动物群体中某病的发病动物数占该群体动物总数的百分率 常用的率 比 2 感染率 所有畜禽感染数量 包括隐性感染畜禽 占所有被检查的畜禽总数的百分比 调查统计感染率能客观反映动物群体被病原污染情况 特别是在发生某些慢性疫病 如结核 布病等 时 做感染率调查统计对疫病净化有实际意义 3 患病率 在一定时间内 某动物群体中某病的患病动物数占该群体动物总数的百分率 患病率和发病率的区别 发病率的分子包括某病新病例正在发病的数 已经死亡数及痊愈数 患病率的分子只含正在患病的数量 不包括死亡数及痊愈数 4 死亡率 在一定时间内 某动物群体中因某病死亡的动物数占该群体动物总数的百分率 5 病死率 致死率 在一定时间内 某动物群体中因某病死亡的动物数占该病患病动物总数的百分率 6 死亡比 在一定时间内 某动物群体中因某病死亡的动物数与因其他病而死亡的动物总数之比 死亡比 因某病死亡动物数 因其他病死亡动物总数 7 发病比 指某时期某动物群体内 因患某病而死亡的动物数与因其他病而死亡的动物总数之比 发病比 某病动物数 因其他病死亡动物总数 练习题 1 2007年某养猪场爆发了猪高致病性蓝耳病 全场15000头瘦肉型仔猪发病11000头 其中因该病死亡9500头 请你分别计算出该养猪场2007年猪高致病性蓝耳病的发病率 死亡率 致死率各是多少 第二节临诊检疫技术 临诊检疫是动物检疫最基本的方法 利用人的感官或借助简单的器械如听诊器 体温计 对动物群体或个体进行视诊 触诊 叩诊 听诊和体温测定 群体检疫 是指对待检动物群体进行的现场检疫 目的 从群体中挑出患病动物和可疑患病动物 以便进一步做个体检疫 一 群体检疫的组织1 群体划分同场 同圈 舍 或同一产地来源的 划为一群 同车 同船 同机运输的划为一群 小动物如禽 兔还可按笼 箱划群 在畜群过大时 要适当分群 以利于检查 一 群体检疫 2 检疫顺序大群 小群 幼年 成年 种用畜群 其它用途的 健康 染病畜群3 检疫时间放牧的 跟群检疫 舍饲的 饲喂时检疫 反刍动物 饲后安静时检疫 乳牛 挤乳时检疫 产地和口岸隔离检疫 按规定在规定时间完成必检项目 二 群体检疫的方法和内容 1 静态观察 静态观察是在动物安静休息 完全保持自然状态下 观察其站立 睡卧姿势 精神状态 营养程度和呼吸 反刍等基本生理活动现象 注意有无异常站立 睡卧姿势 有无咳嗽 喘息 呻吟 流涎 嗜睡 孤立一隅等反常现象 2 动态观察 经静态观察之后 将被检动物驱赶起来 观察其自然活动和驱赶活动 重点看起立 运动的姿势与步态 精神状态 注意有无不愿起立 不能起立或起立困难以及跛行 步态蹒跚 转圈 共济失调 曲背弓腰 离群掉队及运动后咳嗽 喘气等病态 3 饮食观察 目的在于检查动物的食欲和口腔疾病 可以观察动物自然采食饮水动作 亦可有意少给食物看其抢食行为 从中发现不食不饮 少食少饮 吞咽困难和退槽 呕吐 流涎等可疑患病动物 通过以上群体检疫 从大群动物中挑拣出有病态的动物 隔离后进一步进行个体检疫 个体检疫 是对群体检疫时检出的可疑病态动物进行详细和系统的临诊检查 若群体检疫没有发现病态动物 亦应抽查5 20 的动物作个体检疫 若抽查发现检疫对象 再抽检10 必要时对全群动物逐一进行复查 二 个体检疫 一 视诊1 看精神状态 健康动物静止时安静 双眼有神 行动时灵活 动作协调 对各种外界刺激敏感 患病动物常常表现为精神兴奋或抑郁 精神兴奋 呼吸心跳加快 外界刺激反应强烈 如刨地挣缰 嚎叫反抗 乱冲乱撞 攻击人畜 多见于脑膜炎 精神抑郁 沉郁 离群呆立 头低耳耷 闭目缩颈 反应迟钝 二 个体检疫 个体检疫的方法和内容如下 2 检查被毛和皮肤 被毛检查 健康畜禽的被毛整齐柔顺 洁净而有光泽 不健康畜禽毛不洁 粗乱无光泽 容易脱落 如患有慢性消耗性疾病 如结核病 或外寄生虫病 如癬 时 被毛粗长 变脆 易脱落 皮肤检查 健康畜禽的皮肤温湿度 弹性 颜色正常且无其他病变 患病畜禽因疾病不同可能出现皮肤发绀 出血 坏死 痂皮 痘疹 水疱 脱毛等 如亚急性猪丹毒 皮肤出现圆形 方形 菱形有热感的红色疹块 指压褪色 冠 肉髯检查 健康鸡的冠 肉髯呈红色 表面光滑洁净 呈苍白颜色是贫血的表现 呈蓝紫颜色是败血症表现 如鸡新城疫和禽霍乱 表面有结痂 豆样凸起时 多见于鸡痘或皮肤型马立克氏病 营养状态检查 营养状况 肌肉的丰满度 皮下脂肪的蓄积量 营养良好 肌肉丰满 皮下脂肪肥厚 被毛平顺光亮 躯体轮廓丰圆 营养不良 消瘦 被毛蓬乱无光 骨骼表露 被毛状况三方面观察明显 3 检查姿态步态 健康动物姿态自然 步态稳健 灵活 协调 患病动物往往表现出一些异常的姿态与步态 如跛行 转圈 木马状 伏卧不起 头颈扭转 角弓反张 瘫痪 抽搐 站立不稳 犬坐姿势 两耳下垂等 4 看呼吸情况 健康动物呼吸动作匀称 呈胸腹式呼吸 呼吸次数正常 如果动物呼吸急促或微弱 腹式呼吸 张口伸舌 前肢外展 呼吸伴有咳嗽或其他异常音响 则为患病的标志 5 检查可视黏膜 一般检查眼结膜 家禽检査口腔黏膜和泄殖腔黏膜 观察黏膜颜色 黏膜其他病变和天然孔分泌物性状 健康动物眼结膜 猪 羊为粉红色 水牛鲜红色 黄牛 乳牛马淡红色 鸡口腔黏膜灰红色 患病动物可视黏膜可能有苍白 潮红 出血 发绀或黄染 亦或有溃疡 炎性肿胀等情况 如眼结膜潮红伴有眼眵增多可提示热性疾病 苍白见于各型贫血和慢性消耗性疾病 如马传染性贫血 寄生虫病 口腔黏膜有水疱或烂斑 提示口蹄疫或猪传染性水疱病 6 检查排泄动作及排泄物 动物在健康情况下 排泄动作及排泄物性状因其种类不同呈现一定的特征 如果排泄动作不正常 排泄物性状异常如血便 少尿等 都是异常信号说明动物在患某些疾病 一般讲 动物便秘多见于各种热性疾病如猪瘟 猪丹毒 腹泻多见于胃肠道的疾病如仔猪副伤寒 大肠杆菌病等 草食动物的血尿多见于原虫病或泌尿生殖道出血 7 反刍及逆呕检查 二 触诊 耳根 角根 鼻端 四肢末端 体表皮肤 体表淋巴结 嗉囊 通过手的触压来感知和判断被检动物体表局部组织变化情况 通过触诊初步了解动物体表的皮温 弹性 软硬度 敏感度以及浅表淋巴结的性状 三 听诊 叫声 判别动物异常声音 咳嗽 判别动物呼吸器官病变 干咳 见于上呼吸道炎症 咽喉炎 慢性支气管炎 湿咳 见于支气管和肺部炎症 3 听心音 呼吸音和胃肠音 利用听觉来判断被检动物身体各部位发出的声音是否正常 四 三数 检查 体温检查 早晨温度较低 午后略高 波动范围在0 5 1 之间 常根据体温升高程度 判断动物发热程度 进而推测疫病的严重性和可疑疫病范围 体温升高程度分为 微热 体温升高1 中等热 体温升高2 高热 体温升高3 最高热 体温升高3 以上 脉搏检查 呼吸数检查 个体检疫 群体检疫 群检正常 抽检5 20 群检异常 个体检查 动态观察 静态观察 食态观察 临床检疫 临床检疫 小结 站立平稳 不断走动拱食 并发出 吭吭 声 对外界刺激敏感 遇人接近表现警惕性凝视 睡卧常取侧卧 四肢伸展 头侧地 呼吸均匀 爬卧时后腿屈于腹下 排泄物正常 体温正常 被毛整齐光亮 起立敏捷 行动灵活 走跑时摇头摆尾或上卷尾 遇驱赶 随群前进 不断发出叫声 饿时叫唤 饮喂时抢食 大口吞咽有响声且响声清脆 全身鬃毛随吞食而颤动 三 各种动物临诊检疫特点 一 猪的临诊检疫特点 1 健康猪 健康猪 健康猪 健康猪 精神萎靡 离群独立 全身颤抖或头颈歪斜 蜷卧 不愿起立 被毛粗乱无光 鼻盘干燥 眼有分泌物 肷窝凹陷 行动迟缓 步态踉跄 跛行或出现神经症状 食欲下降 懒于上槽 或只吃几口就退槽 有些只闻而不食 亦有的食欲废绝 排泄物异常 多有体温异常 2 病猪 病猪 病猪 病猪 病猪 病猪 病猪 站立平稳 神态安静 睡卧时常呈膝卧姿势 四肢弯曲 全身被毛平整有光泽 鼻镜湿润 眼 嘴及肛门周围干净 反刍有力 正常嗳气 呼吸平稳 肉用牛垂肉高度发育 乳用牛乳房清洁 泌乳正常 排泄物 体温正常 健康牛走起路来精力充沛 腰背灵活 四肢有力 摇耳甩尾 自由自在 饮食中争抢饲料 咀嚼有力 采食时间长 采食量大 放牧中喜采食高草 常甩头用力扯断 运动后饮水不咳嗽 二 牛的临诊检疫特点 1 健康牛 健康牛 精神沉郁 头颈低伸 拱背弯腰或有异常体态 睡卧时四肢伸开 横卧或曲颈侧卧 嗜睡 久卧不起或起立困难 被毛粗乱 反刍迟缓或停止 排泄物异常 体温 呼吸多异常 运动时常跛行掉队或不愿行走 饮食时表现厌食或不食 或采食缓慢 咀嚼无力 出现运动后饮水咳嗽 2 病牛 病牛 头 背 肩皮表大量结节 病牛 站立平稳 乖顺 被毛整洁 呼吸平稳 常于饱腹后合群卧地休息 反刍 遇炎热相互把头藏于对方腹下避暑 走起路来精神活泼 合群不掉队 放牧中虽很分散 但不离群 山羊活泼机敏 喜攀登 善跳跃 好争斗 尤其是羔羊和幼龄羊 饲喂时互相争食 放牧时常边走边吃草 边走边排粪 排泄物正常 食后肷窝臌起 三 羊的临诊检疫特点 1 健康羊 都安山羊 公羊 都安山羊 健康羊 隆林山羊 健康羊 健康羊 精神萎靡不振 常独卧一隅 遇人接近不起不走 不反刍 排泄物异常 呼吸异常 被毛粗乱 脱毛 皮肤干裂 行走摇摆 或出现异常运动 异常姿势 食欲不振或停食 食后肷窝仍下陷 山羊喜卧懒动 多有体温异常 2 病羊 四 家禽的临诊检疫特点 1 健康家禽 神态活泼 反应敏锐 站立时伸颈昂首翘尾 且常高收一肢 目光伶俐 时常侧视 卧时头叠放在翅内 冠 髯红润 羽绒丰满光亮 排列匀称 口鼻洁净 呼吸正常 排泄物正常 体温正常 平养鸡行动敏捷 步态稳健 鸭 鹅陆地行走稳健 水中游牧自如 放牧时不掉队 健康家禽啄食连续 食欲旺盛 食量大 嗉囊饱满 2 病家禽 精神萎靡 缩颈垂翅 闭目似睡 冠 髯苍白或紫黑 喙 蹼色泽变暗 有的头颈部肿胀 眼 鼻等天然孔有异常分泌物 羽绒蓬乱无光 行动迟缓 跛行或有肢翅麻痹及其它神经症状 食欲减退或废绝 嗉囊空虚 排泄物异常 多有体温异常 细检查尸体体表特征及天然孔有无异常 以排除炭疽等恶性传染病 患炭疽病的动物及其尸体 禁止剖检 若怀疑动物死于炭疽 先采取耳尖血液涂片镜检 排除炭疽后方可剖检 第三节病理学检查技术 一 病理剖检检查技术 一 对动物尸体剖检的要求 1 剖检前检查 第三节病理学检查技术 一 病理剖检检查技术 一 对动物尸体剖检的要求 1 剖检前检查 2 剖检时间 3 剖检地点 4 剖检数量 5 剖检术式 6 安全防护 剖检进行的越早越好 最好在白天进行剖检 病理解剖室或 在野外或其它检疫现场剖检时 应选地势高燥并远离居民区 畜舍及交通要道的地方进行 家禽 5只以上 大中动物至少剖检3头 工作人员的安全防护工作 防止环境污染 常用的消毒液有 1 2 硼酸 0 1 新洁尔灭 5 碘酊 70 酒精等 第三节病理学检查技术 一 病理剖检检查技术 一 对动物尸体剖检的要求 二 外部检查 1 检查尸体变化 尸僵 尸斑 尸腐 血液凝固2 检查营养状况3 检查可视黏膜4 体表的检查 三 内部检查 1 皮下检查 皮下脂肪性状 色泽 2 体腔剖检 检查胸腔 腹腔液体的数量 性状 观察胸膜 腹膜 心包膜的色泽 3 内脏器官的检查 检查各器官大小 形态 色泽 有无出血 黏连 肿大 坏死 包囊等 4 口腔 鼻腔和颈部器官的检查 看呼吸道有无感染等 四 剖检记录 1 基本情况 种类 性别 年龄 症状 死亡时间 剖检地点等 2 病理变化 外部及内脏器官的眼观病变 3 剖检诊断 诊断病名和死亡原因 第四节病料的采集 采集原则 供病原学检查材料的采集 处理 供病理组织检查材料的采集 处理 供血清学检查材料的采集 处理 检疫材料的包装和运送 内容提要 一 采集原则 一 适时采集根据检疫要求 严格规定采集时间 若检疫病原 发热或典型症状时采集 若制备血清 空腹采血 患病动物死后立即采血 二 典型采样典型采样要求样品具有代表性 选择典型动物 即未经药物治疗 病状典型的动物 这对细菌性传染病的检查尤其重要 选择典型材料 采集病原体可能在其中含量最高的材料 在采取病料前 对动物可能患某种疫病作出初步诊断 侧重采集该病原体常侵害的部位 采集有病变的组织 器官或病变最明显 最典型的部位 供病理组织切片的样品 应连带部分健康组织 淋巴结 心 肝 脾 肺 肾 不论有无病变 一般均应采取 动物群体发病 至少采取5头 只 动物的病料 每一种样品应有足够的数量 除确保本次实验用量外 以备必要的复检用 三 合理采样 四 无菌采样 样品采集全过程应无菌操作 尤其是供微生物学检查和血清学实验的样品 采样部位 采样用具 盛放样品的容器均需灭菌处理 五 安全采样 在采样过程中 采样人员要注意安全 防止感染 同时防止病原扩散而造成环境污染 采集前的准备 对采集人员的要求 具备相应专业知识水平应用器械及其消毒 采集病料用具 外科刀 采血管 剪刀 镊子等盛放病料容器 试管 病料袋等包装用具 铁盒 塑料罐等 消毒 煮沸 火焰 高压蒸汽灭菌药品 生理盐水 新洁尔灭 碘酊 酒精等 防护用品 防护服 乳胶手套 口罩等 记录材料 送检单 记号笔 记录本等 二 供病原学检查材料的采集 处理 一 供微生物学检查材料的采集 处理 1 血液 采血部位 颈静脉或尾静脉或耳静脉 家禽从翅静脉或心脏 死亡动物从右心房采血 采血量 10ml 大 中动物 3 5ml 小动物和家禽 全血抗凝 EDTA Na2 枸橼酸钠 肝素 枸橼酸钠不宜用于病毒血样 10ml血液 4 枸橼酸钠溶液1ml或0 1 肝素1ml或EDTA Na215 20 病毒样品 1ml血样 青霉素 链霉素各500 1000IU 以抑制血源性或在采血过程中污染的细菌 2 分泌物和渗出液 口腔 鼻腔 喉气管 泄殖腔及阴道分泌物 用灭菌的棉球蘸取 咽食道分泌物 采前禁食12h 食道探子刮取 乳汁 清洗乳房并消毒 弃去最初挤出的几把乳汁 挤出的10 20ml乳汁 尿液 排尿时采集或用导尿管采取 常取30 50ml 水泡液 水肿液 关节囊液 胸腹腔渗出液 用注射器抽取 至少采取1ml 脓汁 已破口的脓疱 用棉球蘸取 未破口的用注射器吸取 过于浓稠不好抽取时 可切开脓疱 用棉球蘸取 3 淋巴结 内脏器官 肌肉 淋巴结 淋巴结连带周围脂肪整体采集 内脏器官和肌肉 取病变最明显的部位 注意 采集的淋巴结 内脏器官 肌肉分别置于灭菌容器 4 水泡皮 先用清水清洗病变部 再剪取新鲜水泡皮3 5g放入灭菌小瓶 棉拭子插入泄殖腔或气管轻轻擦拭旋转 粘上分泌物即可 8 拭子样品 用不透水塑料袋包紧 装入木箱送检 7 流产胎儿 家禽及其它小动物尸体 6 长骨及肋骨 整根采集 不要损伤其两端 用5 石炭酸水容液浸透的纱布或麻袋片包裹 5 肠管 选取要采集的肠管至少6cm 两端结扎 剪断 置灭菌玻璃容器或塑料袋中 分泌物和渗出液采集 放入灭菌容器 密封 外贴标签 冷藏 送检 病毒性病料的保存 含抗生素的PH7 2 7 4磷酸盐缓冲液 50 甘油磷酸盐缓冲液 50 甘油生理盐水 细菌性病料的保存 30 甘油磷酸盐缓冲液 30 甘油生理盐水 灭菌液体石蜡 液体材料 血液 胆汁 分泌物 涂片 灭菌接种环取一滴 载玻片中央均匀涂布成适当大小的薄层 自然干燥 包扎固定 送检组织器官涂片 无菌方法剪取新鲜切面 在玻片上压印 触片 或涂抹成一薄层 自然干燥 包扎固定 送检 材料保存与送检 1 血液 多从耳静脉采集 立即制成涂片标本 2 阴道分泌物 用棉拭子擦拭采取3 粪便 直肠采集或采集新排出的粪便 4 被寄生虫寄生的组织 器官 组织 器官常连带寄生虫一并采集 放入5 10 福尔马林溶液中 5 皮肤刮下物螨病病料 在病变皮肤和健康皮肤交界处采集 二 供寄生虫检查材料的采集 处理 1 血液 多从耳静脉采集 立即制成涂片标本 2 阴道分泌物 用棉拭子擦拭采取3 粪便 直肠采集或采集新排出的粪便 4 被寄生虫寄生的组织 器官 5 皮肤刮下物6 寄生虫 体表寄生虫 用手或镊子捏取或把附有虫体的羽毛剪下 70 酒精 甘油酒精或5 福尔马林容液中 体内寄生虫 小型线虫 用毛笔将虫体挑出 生理盐水洗净 70 酒精 甘油酒精或巴氏夜固定 大型蠕虫像蛔虫 棘头虫 绦虫用5 10 福尔马林溶液固定 二 供寄生虫检查材料的采集 处理 一 血清1 采血 一次采血量大中动物每头不少于10ml 家禽不少于3ml 2 制备血清 自然析出或离心分离血清 3 血清保存 制备的血清若能在一周内检测 4 冷藏 若需保存较长时间 30 冻结 二 抗原抗原材料的采集 处理方法同微生物学检查材料的采集和处理 三 供血清学检查材料的采集 处理 一 选材应选择病变部位与健康部位交界处的组织作为检材 较重要的病变要多取几块 以展示病变的发展过程 若同一器官有不同的病变 分别采取 二 采集供切片时用的组织块大小为1 5cm 1 5cm 0 5cm 三 固定1 供石蜡切片用的组织块切好后 用清水轻轻冲洗血污 立即浸入固定液中 但胃肠 胆囊 膀胱等组织不要用水冲洗 四 供病理组织学检查材料的采集 处理 2 常用的固定液有10 福尔马林溶液 95 酒精 鲍因氏液 Bouni氏液 等 用量应是病料体积的5 10倍 固定时间通常为12 24h 3 若需长期保存 经12 24h固定以后更换一次固定液 4 固定时在容器底部垫以脱脂棉 以防组织粘底而固定不良 若有几个病例的组织固定在同一容器时 应把每一病例的组织块用纱布包好 附上标签再投入固定液中 5 供快速冰冻切片检查用的组织常不经固定 采样后尽快送检 如当天不能送出或检查 必须冻结保存 以免组织腐败和自溶 五 检疫材料的包装和运送 一 包装 1 包装容器 直接包装检疫材料的容器可选择玻璃或塑料制品 运输时的外包装常用木箱 保温瓶 保温箱 所有容器必须完整无损 密封性能良好 清洁无污染 供病原学检查的容器 清洗后经干热灭菌或高压灭菌并烘干 塑料制品耐高压的高压灭菌 不耐高压的紫外线消毒或熏蒸消毒 标签 样品名称 动物种类 采集时间 采集地点 样品编号等内容 3 贴标签 一种材料一个容器 不可将多种病料或多头家畜的病料混装在一起 一个容器装量不能过满 液体样品不能超过总容量的70 装入样品的容器必须加塞 加盖 塞子和盖子用胶布封固 液体病料在胶布外还需用溶化石蜡加封 选用塑料袋作容器 需用两层包装 分别用线结扎袋口 防止液体露出或水进入袋中 2 包装 二 运送 1 供病毒学检查的样品 置于保温容器 保温瓶或保温箱 中运输 血液样品要单独存放在保温瓶中 不能和其它样品混合 对冷藏样品 若能在4h内送到实验室 在保温瓶中加入冰块或冰袋 冷藏运输 否则 先将样品进行冷冻处理 对冻结的样品 必须在24h内冷藏送到实验室 若在24h内不能送到实验室 要冷冻运输 即在运输过程中样品的环境温度应保持在 20 以下 各种样品到达实验室后 若暂时不进行实验 则应在 70 或 70 以下保存 不要反复冻融 经冷藏处理的血清 在24h内能送到实验室 冷藏运送 否则 先将血清冷冻 经冷冻处理的血清 在保温箱内加大量冰袋运送 在48h内到达实验室 4 玻片标本和病理组织学样品 常温运送 3 血清样品 经冷藏的材料并在24h内能送到 以冷藏运输或常温运输 否则必须冷藏运输 2 供细菌学和寄生虫学检查的样品 每一份样品或每一批样品均要有采样单 采样单一式三 第一联 采样单位保存 第二联 跟随样品 第三联 由被采样单位保存 三 填写采样单 五 检疫材料的包装和运送 一 包装 1 包装容器 2 包装 3 贴标签 二 运送 1 供病毒学检查的样品 2 供细菌学和寄生虫学检查的样品 3 血清样品 4 玻片标本和病理组织学样品 常温运送 附 样单式样 第五节病原学检查技术 一 细菌性传染病病原检查 一 显微镜检查法 1 病料处理 将病料涂成薄而均匀的涂片 室温下自然干燥 若为细菌培养物涂片火焰固定常用的染色方法有 革兰氏染色法 美蓝染色法 瑞氏染色法和姬姆萨染色法 2 显微镜检查 染色水洗后的涂片标本 吸水纸吸干 切勿磨擦 或在酒精灯火焰的远端烘干 滴加香柏油 用油浸镜观察细菌的形态结构和染色特性 二 培养检查法 1 固体培养基上菌落性状的检查 其菌落的大小 形状 色泽 表面性状 透明度 边缘性状等因菌种而异 因此 菌落特征是鉴别细菌的重要依据 2 液体培养基上液体性状的观察 细菌在液体培养基中生长可使液体出现混浊 沉淀 液面形成菌膜以及液体变色 产气等现象 三 生化试验 生化实验是利用生物化学的方法 检测细菌在人工培养繁殖过程中所产生的某种新陈代谢产物是否存在 是一种定性检测 常用的生化反应有糖发酵试验 靛基质试验 V P试验 甲基红试验 硫化氢试验 四 动物试验 最常用的实验动物有 小鼠 大鼠 豚鼠和家兔 二 病毒性传染病病原检查 一 病毒分离培养 1 样品处理2 病毒分离培养 鸡胚接种 痘病毒 绒毛尿囊膜接种 用9 12日龄鸡胚 鸡新城疫病毒 绒毛尿囊腔接种 用9 10日龄鸡胚 流行性乙型脑炎病毒 卵黄囊内接种 用6 8日龄鸡胚 动物接种 动物组织培养 在病毒分离培养中广泛采用的是细胞培养技术 单层细胞培养使细胞在器皿的表面生长出一层或数层细胞 常用于病毒的分离繁殖 悬浮细胞培养是把细胞悬浮在营养液中进行培养 这中方法可连续进行 因而用于疫苗生产 二 病毒性传染病病原检查 一 病毒分离培养 样品处理 病毒分离培养 二 病毒检查方法 1 包涵体检查 2 病毒培养性状观察 狂犬病 伪狂犬病 犬瘟热病毒病毒的包涵体 3 病毒形态学观察 有直接电镜观察和免疫电镜技术 4 病毒核酸检测 最常用的检测方法是聚合酶链式反应 三 寄生虫病病原检查 一 虫卵检查法 1 直接涂片镜检 2 饱和盐水漂浮 3 水洗沉淀 二 虫体检查法 1 蠕虫虫体检查法 2 蜘蛛昆虫虫体检查法 3 原虫虫体检查法 四 PCR技术简介 一 PCR技术的主要用途 聚合酶链式反应 PCR 将生物材料中微量的目的DNA片段在体外扩增上百万倍 从而获得大量特异性核酸 目前 PCR技术已广泛应用于病原微生物的微量检测 突变基因筛选 法医学鉴定等与生命有关的各个领域 在动物检疫中 它主要用于微量样品和不完