多肽和蛋白质类药物的发展过程.doc

多肽和蛋白质类药物的发展过程悬赏分：30 - 解决时间：2007-10-28 21:16各位学识之士帮帮手啊,要写论文啊提问者： 5TY67J - 魔法学徒 一级 最佳答案随着蛋白组学计划的逐步深入，蛋白质结构与功能关系逐渐被*，近年来越来越多的多肽及蛋白质类物质在诊断、治疗或作为疫苗预防各种疾病方面发挥着重要作用。与小分子药物相比，多肽及蛋白质类大分子药物稳定性差、易于被酶降解、故生物半衰期短；而扩散差、分配系数小，又使其难以通过生物屏障及脂质膜1，所以，如何将这些生物技术类物质有效地送达人体相应部位，一直是制剂研究面临的重大课题。 /iekww54 目前，生物技术类药物大多以注射用溶液或冻干粉针剂应用于临床，但常需要频繁给药，致使病人的顺应性较差，且治疗费用较高。而将大分子药物通过可生物降解微球系统给药，不仅能有效防止生物大分子在体内很快被降解，还能将药物定向送达体内有效部位，并通过可生物降解聚合物的降解达到缓释长效目的。现已有的多肽及蛋白质类药物微球制剂主要有：注射用缓释制剂，口服及鼻腔吸入剂等。随着对这类微球制剂研究的深入，制备过程中蛋白质的稳定性差、包封率低、载药量小、且易于产生聚集而使其生物活性降低并可能引起免疫反应、体外释放时具有明显突释效应等问题严重影响着这类制剂的发展。本文将就目前多肽及蛋白质类微球制剂的应用、制备方法、出现的问题及常用的各种增加稳定性、减少其突释效应的物理化学方法进行综述。 ?sBbeOC? AmmUoS 1、 多肽及蛋白质微球制剂的主要类型 BVpRkUC 1.1 注射剂 ?YO$NYwE 采用可生物降解聚合物为骨架材料，将多肽及蛋白质药物制成微球制剂用于肌肉或皮下注射，给药后随着聚合物的降解，药物以扩散、溶蚀方式释放，可达到缓释长效的目的2。 tu6Q7CjW8 ），肌肉注射后可缓释1或2个月。这类制剂中，只有10个氨基酸的LHRH类似物微球的研究最为成功，第一个多肽微球产品曲普瑞林于1986年问世，随后亮丙瑞林、布舍瑞林、高舍瑞林、那法瑞林等长效微球制剂相继上市。2000年美国Genentech公司推出了重组人生长激素（rhGH）PLGA微球（Nutropin p; VHg 1.2 口服制剂 a:(.z?nM 多肽及蛋白质类药物应用于口服须克服两大障碍，一是抑制胃肠道各种酶对其降解，二是选用合适的制剂形式及载体材料使药物透过生物屏障。粒径范围处于11000nm的毫微粒制剂是目前研究最多的口服多肽制剂，但毫微粒的表面带电荷情况及聚合物疏水性能均影响多肽在小肠部位的吸收。 s-He 近年来的研究主要在对毫微粒表面进行修饰，如在毫微粒表面连接各种生物粘附材料，如脱乙酰壳多糖、Carbopol等。Kawashima等研究者 3采用乳化溶剂扩散法在降钙素的PLGA毫微粒表面覆盖一层粘附材料脱乙酰壳多糖后，与原PLGA毫微粒相比，虽然药物扩散形式没有显著改变，但能明显降低血钙水平，且能维持48小时。Lubben等报道1，脱乙酰壳多糖及其衍生物能有效提高亲水性大分子物质的吸收，因其能增加细胞间的紧密连接的开放而有利于药物的细胞旁转运。 P K?ks1R t6u01r 2、 多肽及蛋白质类药物微球的制备 P2S$Dk_X 2.1 常用材料 X=-ag 3、 存在问题 %ec904S 3.1 多肽及蛋白质稳定性 PDe*zZ 复乳溶媒蒸发/萃取法制备微球时，蛋白质易于在油水界面聚集而变性。傅立叶变换红外光谱（FTIR）显示，蛋白质均匀分散在微球空穴内，其中大部分分布在微球内部孔穴壁上，这可能是在形成w/o型初乳时蛋白质聚集在油水界面层所造成的12。所以，形成稳定的w/o型初乳、减少多肽或蛋白质在油水界面间的聚集是将这类药物成功包封在微球中的关键。抑制蛋白质聚集、提高蛋白质在制备过程中稳定性的方法有：在内水相加入各种稳定剂（如表面活性剂、多元醇、PEG等）、改进制备工艺、改善内水相pH和在外水相加入附加剂等。 b_&;i4 3.1.1加入稳定剂 h &3*O 在内水相加入一定的非离子型表面活性剂（如PVA、Pluronic F68、Poloxamer 188和311、土温20、司盘80等）能提高初乳的稳定性，防止乳滴合并，同时能抑制多肽或蛋白质在油水界面聚集，并减少突释效应。但这种稳定作用具有浓度依赖性：即减少内水相PVA浓度，药物包封率减小，突释效应增大。这可能是由于药物与PVA的相互作用增加，从而防止了药物溶解和扩散至外水相13。 sp4J%2b 土温20或土温80在喷雾过程中，不仅占据雾滴的气液界面，减小气液界面张力，而且减慢液体流向雾滴的速度，进而减少蛋白质与疏水界面接触的时间，抑制了不溶性蛋白质的聚集，同时干燥和再水化时又起到了保护作用，致使蛋白质稳定性提高 14，15。 -jc8ku3* 多元醇或糖类（如海藻糖、甘露醇、果糖、乳果糖、蔗糖等）在一定浓度下能抑制多肽或蛋白质在油水界面的聚集，有效防止其结构和功能方面的变化和进一步失活16。将这类物质分散在蛋白质表面，通过其与水相互作用，增加水的表面张力，提高体系自由能，蛋白质变性则会进一步增加这种热力学的不稳定性，因而蛋白质溶液在糖类存在下能保持稳定17。 3:Aw.-,i 海藻糖即使在很低的浓度下也能显著提高蛋白质的稳定性，甘露醇能减少蛋白质单体的损失，但要求其最好以非结晶形式存在，并与相同的蛋白质固态相结合，防止其与蛋白质相分离而不能提高蛋白质的稳定性14。 gU7P 吸附动力学研究表明18，在制备微球时，一旦初乳形成，PLGA和PEG就能马上吸附在油水界面。在内水相中加入PEG400，能在形成初乳时置换油水界面的多肽或蛋白质，减少与有机相的接触，从而提高其在制备过程中的稳定性，且不影响微球形态结构。然而在微球固化时，PEG又会影响多肽或蛋白质与PLGA聚合物层的结合，相对增加了其在微球表面的含量，同时由于PEG的亲水性特征，加大了多肽或蛋白质微球在释放初期的释放量。 ;P9P2&c8c 3.1.2改进制备工艺 &uwj&-u? 多肽或蛋白质通过高速搅拌包合在海藻酸钙盐中而形成含药微芯，再以可生物降解聚合物用复乳溶媒萃取法制备微球。Zhou等利用该法制得的人血清白蛋白PELA微球的包封率高、表面光滑、稳定性高，第