苋菜红检测方法确认.doc

酒类中种合成着色剂（苋菜红）检测方法确认一、用于合成着色剂（苋菜红）检测方法确认的标液配制记录序号标准物质名称色谱校正标准母液色谱校正标准使用液配制人及时间标准确认人及时间备注W1取用单体量（ml）W2M(g)配制体积（ml）浓度 (v/v)浓度 (mg/ml)容器编号母液取用量（ml）配制体积（ml）浓度（v/v）浓度 (mg/ml)容器编号12345678910111213二、选择一个空白样品（经检测不含待测物质），添加一定量的苋菜红标液到空白样品中，同时求出标准曲线回归方程，求算检测方法的方法检测限、回收率、精密度、准确度，评价检测方法是否可靠实用。三、用于苋菜红检测方法确认的校正曲线 1、area=18.1557*amount3.3033,相关系数0.999900.99，满足要求。一、 方法检出限的求算1、依据GB/T 5009.1-2003,色谱法的检测限： 检出限最低响应值/b=S/b式中，b为标准曲线回归方程的斜率，为仪器噪音3倍时的响应值。2、求3S/N的信号值时，采用空白样品加标求算，即在不含待测物的样品中，加入一定量的苋菜红标准物质，当加入的量恰好使信号的峰高为基线噪音的3倍时的峰面积为最低响应值。3、标准曲线回归方程的斜率，采用接近定量限以上的浓度，至少个点，作曲线方程，求出曲线的斜率，上面已求出，斜率b=18.1557。4、经实验测定，在空白样品中添加标准物质，使空白溶液中苋菜红的浓度0.12ug/ml时，按照检测方法进行样品处理，取10ul进样，此时产生的信号恰为仪器噪音的3倍，如下图，此时的峰面积为3.1。空白加标样品谱图 图1：5、在此，直接采用峰强度为噪声水平3倍时的空白样品加标浓度作为方法检出限（方法检出浓度），如上图，h1= 0.27 mAu,h2= 0.08 mAu, h1/h23,此时的空白加标样品浓度为0.12ug/ml，按照检测方法进行样品处理后（取20g样品，经处理，然后浓缩到5ml,取10uL进样），此时，进样液中的待测物浓度为0.12ug/ml4=0.48ug/ml。6、此时，进样10ul,方法检出限为10ul0.481000ng/1000ul=4.8ng,满足GB/T 5009.35标准要求的方法检出限6ng。当取样量为20g,按检测方法操作步骤制样后定容至5ml，取10ul进样，此时方法检出限：x样品中待测物含量，单位为克每千克(g/kg)；A-进样液中待测物质量,单位为微克(ug);进样体积,单位为毫升(ml);试样稀释总体积, ,单位为毫升(ml);m试样质量,单位为克(g);二、 回收率、精密度、准确度的计算回收率、精密度、准确度的计算应在方法测定低限（定量限）、2倍方法测定低限、10方法测定低限三个水平进行试验，本方法的方法检测限已确定，为0.12mg/kg,即0.12ug/g；方法测定低限等于3倍于方法检出限，即方法测定低限3方法检出限,则最低设计浓度为0.12ug/g3=0.36ug/g,同理2倍方法测定低限的浓度为0.72ug/g,10倍方法测定低限的浓度为3.6ug/g,选择一个空白样品，在其中添加一定量的标准物质，设计成含量分别为0.36ug/g、0.72ug/g，3.6ug/g的三个空白样品，然后按检测方法制样，每个空白加标样品平行进样6次，计算其浓度，然后计算回收率、精密度、准确度。计算回收率、精密度、准确度在空白样品中添加苋菜红标准物质浓度表:序号试验水平标液浓度(ug/ml)加入量(ml)定容体积(ml)空白样中苋菜红含量1方法测定低限300.6500.36ug/g22倍方法测定低限301.2500.72ug/g310倍方法测定低限5000.36503.6ug/g合成着色剂检测方法（苋菜红）回收率、精密度、准确度的计算序号试验水平空白样品添加浓度（ug/g）或mg/kg平行测定浓度（ug/g）平均回收浓度（ug/g）回收率/%精密度/变异系数CV%准确度/偏差范围/%1234561方法测定低限0.360.3060.3200.3290.3080.3080.3080.31387.03.0-13.122倍方法测定低限0.720.5880.5920.5910.5940.5930.5930.59282.20.36-17.8310方法测定低限3.63.6723.6903.6943.6953.6923.6913.689102.40.23+2.4计算公式1 、2、3、检测方法确认的技术要求1、回收率范围被测组分含量（mg/kg）回收率范围(%)1-10090-1100.1-180-1100.160-1202、实验室内变异系数范围被测组分含量（mg/kg）变异系数范围(%)0.115111107.53、测定值与真实值的偏差指导范围被测组分含量（mg/kg）偏差范围(%)0.001-0.01-30 +100.010-10-20 +1010-1000154、检测方法确认的技术要求评价试验水平空白样品添加浓度（ug/g）或mg/kg回收率