喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析 一 基本结构与化学性质1 典型药物的结构硫酸奎宁硫酸奎尼丁盐酸环丙沙星2 主要化学性质 1 碱性 2 旋光性硫酸奎宁为左旋体 其比旋度为 237 至 244 硫酸奎尼丁为右旋体 其比旋度为 275 至 290 而盐酸环丙沙星无旋光性 3 荧光特性硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光 而盐酸环丙沙星则无荧光 二 鉴别试验1 绿奎宁反应 Thalleioquin 奎宁和奎尼丁为6位含氧喹啉衍生物 可以发生绿奎宁反应 以6 羟基喹啉为例 经氯水的氯化反应 再以氨水处理 生成绿色的二醌基吲胺的铵盐 即为绿奎宁反应的基本机制 2 光谱特征 1 紫外吸收光谱特征中国药典采用本法鉴别盐酸环丙沙星 2 荧光光谱特征利用硫酸奎宁和硫酸奎尼丁 在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光 而盐酸环丙沙星则无荧光的特性 可用于本类药物的鉴别或区别 3 红外吸收光谱特征硫酸奎宁和盐酸环丙沙星在中国药典在均采用红外光谱的方法进行鉴别 而硫酸奎尼丁未采用此法 3 无机酸盐利用硫酸奎宁和硫酸奎尼丁中的硫酸根 在酸性条件下与氯化钡反应生成白色的沉淀 即显硫酸盐的鉴别反应进行鉴别 盐酸环丙沙星中具有盐酸根 在酸性条件下与硝酸银反应生成白色的沉淀 即显氯化物的鉴别反应 进行鉴别 三 特殊杂质检查1 硫酸奎宁中特殊杂质检查 根据硫酸奎宁的合成工艺 产品中特殊杂质主要是合成中产生的中间体以及副反应产物 通过检查酸度 氯仿 乙醇中不溶物和其他金鸡纳碱等加以控制 2 盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查盐酸环丙沙星在生产和贮藏过程中引入的特殊杂质 通过酸度 溶液的澄清度与颜色 有关物质等项目的检查进行控制 分子式 C15H22O5分子量 282 33物理性状 无色针状晶体 味苦 溶解性 在丙酮 醋酸乙酯 氯仿 苯及冰醋酸中易溶 在乙醇和甲醇 乙醚及石油醚中可溶解 在水中几乎不溶 熔点 156 157 水煎后分解 青蒿素结构式 青蒿素空间结构示意图 一 呈色反应1 过氧桥的反应 碘化钾试液 淀粉 因其具有氧化性 在酸性条件下能将I 氧化成I2与淀粉指示液生成蓝紫色示例1 ChP青蒿素的鉴别 取本品越5mg 加无水乙醇0 5ml溶解后 加碘化钾试液0 4ml 稀硫酸2 5ml与淀粉指示液4ml 立即显紫色 2 羟肟酸铁反应 含有内酯的化合物 羧酸衍生物和一些酯类化合物 在碱性条件与羟胺作用 生成羟肟酸 在稀酸中与高铁离子呈色 3 香草醛 硫酸反应 香草醛硫酸溶液又称硫酸香兰素显色剂 很多物质 如有机酸 挥发油 甾醇 萜类等 都可与之产生显色反应 三 色谱法 利用比较供试品溶液主峰的保留时间 tR 是否一致或比较供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液主斑点的位置和颜色是否相同进行鉴别 青蒿素类抗疟原料药在ChP2010中均采用HPLC法进行鉴别 但部分制剂中也采用TLC进行鉴别 HPLC法一般都规定在含量测定项下记录的色谱图中 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 1 TLC法 2 HPLC法 采用杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法 分离效能高 专属性强 检测灵敏性好 可以准确的测定各组分的峰面积 分为外标法 加校正因子的主成分自身对照测定法 不加校正因子的主成分自身对照法 面积归一法 有关青蒿素含量测定的方法有紫外分光光度法 薄层扫描法 HPLC等 高效液相色谱法在测定实际样品时 色谱柱易被污染 并且对前处理要求严格 分析时间长 毛细管电泳法测定青蒿素的应用较少 且都为紫外吸收检测 由于青蒿素没有紫外吸收 需要对青蒿素进行一定的处理 紫外分光光度检测方法 为筛选收购优质青蒿提供快速检测的方法方法 外分光光度计对青蒿素标准溶液进行波长扫描 确定最适吸收波长 在最适吸收波长下建立青蒿素标准品的吸光度一浓度曲线 根据标准曲线测定青蒿样品中青蒿素的含量 结果 青蒿素的最适吸收波长为290nm 吸光度一浓度回归方程为 Y 0 043X 0 006 不同青蒿样品中青蒿素含量有差异 紫外分光光度法 碘量法 滴定分析法 高效毛细管电泳一电导法 HPLC ELSD法 SFE HPLC法高效毛细管电泳一电导法 以Tris H3BO3 H3BO3 浓度为1 5mmol L 为电泳介质 乙醇为有机添加剂 在15kV高压 pH9 0的碱性条件下柱端电导法检测了青蒿中的青蒿素含量 着重探讨了缓冲溶液种类 浓度 酸碱度及其操作电压 进样时间对检测的