挥发油测定法VIP

挥发油测定法测定用的供试品，除另有规定外，须粉碎使能通过二至三号筛，并混合均匀。仪器装置如图。A为1000ml(或500ml、2000ml)的硬质圆底烧瓶，上接挥发油测定器B,B的上端连接回流冷凝管C。以上各部均用玻璃磨口连接。测定器B应具有0.1ml的刻度。全部仪器应充分洗净, 并检查接合部分是否严密，以防油分逸出。（注：装置中挥发油测定器的支管分岔处应与基准线平行）。测定法甲法：本法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油。取供试品适量(约相当于含挥发油0.51.0ml)，称定重量(准确至0.01g), 置烧瓶中，加水300500ml（或适量）与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时,至测定器中油量不再增加，停止加热,放置片刻,开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，读取挥发油量，并计算供试品中含挥发油的百分数。紫苏为常用的辛温解表药，具有解表散寒、行气和胃等功效，用于风寒感冒，咳嗽呕恶，妊娠呕吐，鱼蟹中毒等症。其药源为一年生草本唇形科植物皱紫苏Perilla frutescens(L.) Britt 的干燥叶、茎、果1。传统认为紫苏以湖北为道地产区2。本实验采用湖北产紫苏，以水蒸气蒸馏法提取其有效成分挥发油，并利用气-质联用技术对其化学成分进行分析，通过计算机检索与标准图谱对照鉴定化合物，用归一法确定各化合物在挥发油中的相对含量，为进一步对紫苏挥发油进行成分分析提供科学依据。1 材料与方法1.1 材料与仪器紫苏全草购自湖北省药材公司，经本院生药教研室鉴定为赤紫苏Perilla frutescens（L.） Britt。HP5890气相色谱HP5972质谱联用仪。1.2 实验条件色谱条件：BP1（non polar）60 m0.22 mm025 m 石英毛细管柱； 柱温：80 保持3 min， 以5 /min 速率一阶升温至110 保持10 min， 以2 /min速率二阶升温至160 保持20 min，再以5 /min速率三阶升温至220 保持20 min；载气：氦气，流量1 mL/min；进样口温度：240 ；进样方式：1 L不分流进样；延时：7 min；电压：1 972 mV、质谱温度：173 ，扫描范围50550 m/z。2 实验与分析2.1 挥发油含量测定取干燥紫苏粉末（过40目筛）100 g，置圆底烧瓶中，照中国药典中挥发油测定甲法测定，得油率为05。2.2 挥发油成分分析取挥发油测定所得紫苏油适量，用（正己烷无水乙醇)=11制成10 mg/mL供试溶液，依法进行挥发油成分分析，所得图谱经计算机峰纯度检测，并将得到的质谱数据经Wiley138质谱数据库检索，结果见表1。紫苏挥发油中分离出34个色谱峰，鉴定出29种化合物，并用面积归一化法确定了各成分的相对百分含量。表1 紫苏挥发油化学成分GC/MS鉴定结果（略）紫苏叶油相对密度 0.83250.8625紫苏(一)概述紫苏，别名荏、赤苏、白苏、香苏等，学名 Perillafrutescens L.，为唇形科一年生草本植物。具有特异的芳香，原产中国，如今主要分布于印度、缅甸、中国、日本、朝鲜、韩国、印度尼西亚和俄罗斯等国家。我国华北、华中、华南、西南及台湾省均有野生种和栽培种。紫苏在我国种植应用约有近2000年的历史，主要用于药用、油用、香料、食用等方面，其叶 (苏叶)、梗 (苏梗)、果(苏子)均可入药，嫩叶可生食、作汤，茎叶可淹渍。近些年来，紫苏因其特有的活性物质及营养成分，成为一种倍受世界关注的多用途植物，经济价值很高。俄罗斯、日本、韩国、美国、加拿大等国对紫苏属植物进行了大量的商业性栽种，开发出了食用油、药品、淹渍品、化妆品等几十种紫苏产品。(二)特征特性1.植物学特征 紫苏属植物包括紫苏一种及其两个变种，变种皱叶紫苏 (P.frutescens(L.) Deane )又名鸡冠紫苏、回回苏；另一变种尖叶紫苏(P.frutescens（L.） (Thunb) Kudo.)，又名野生紫苏。紫苏为一年生草本植物，具有特异芳香，茎直立断面四棱，株高50200厘米，多分枝，密生细柔毛，绿色或紫色。叶对生，卵形或阔卵形，边缘具锯齿，顶端锐尖，叶两面全绿或全紫，或叶面绿色，叶背紫色。叶柄长35厘米，密被长柔毛；轮伞花序2花，白色、粉色至紫色，组成顶生及腋生偏向一侧的假总状花序。苞片卵形，全缘。花萼钟状，上唇3裂，宽大，下唇2裂。花冠管状，先端2唇形，上唇2裂微缺，下唇3裂。雄蕊4枚，子房4裂，花柱着生于子房基部，小坚果卵球形或球形，灰白色、灰褐色至深褐色，千粒重0.81.8克。2.对环境条件的要求 紫苏性喜温暖湿润的气候。种子在地温5以上时即可萌发，适宜的发芽温度1823。苗期可耐12的低温。植株在较低的温度下生长缓慢。夏季生长旺盛。开花期适宜温度是2228，相对湿度75%80%。较耐湿，耐涝性较强，不耐干旱，尤其是在产品器官形成期，如空气过于干燥，茎叶粗硬、纤维多、品质差。对土壤的适应性较广，在较阴的地方也能生长。(三)栽培技术(1)栽培方式及栽培季节 长江流域及华北地区可于3月末至4月初露地播种，也可育苗移栽，69月可陆续采收，保护地9月至翌年2月均可播种或育苗栽种，11月至次年6月收获。(2)种子处理及催芽 紫苏种子属深休眠类型，采种后45个月才能逐步完全发芽，如果要进行反季节生长，进行低温及赤霉素处理均能有效地打破休眠，将刚采收的种子用100微升/升赤霉素处理并置于低温3及光照条件下510天，后置于1520光照条件下催芽12天，种子发芽可达80%以上。 (3)播种育苗 江南地区育苗以3月中旬用小拱棚播种育苗的方法最佳。每公顷用种量3千克。按种植面积的8%10%准备苗床，苗床播种量为1014克/平方米。播前苗床要浇足底水，种子均匀撒播于床面，盖一层见不到种子颗粒的薄土，再均匀撒些稻草，覆盖地膜，然后加小拱棚，以保温保湿，经710天即发芽出苗。注意及时揭除地膜，及时间苗，一般间苗3次，以达到不拥挤为标准，苗距约3厘米见方。为防止秧苗疯长成高脚苗，应注意及时通风、透气。进入4月份即可揭除小棚薄膜，促使植株粗壮，增强定植后对外界环境的适应性。(4)整地定植 土壤在定植前1015天进行深耕晒垡，每 公顷施复合肥1500千克，人粪尿45000千克，垃圾肥75000 千克作为基肥。整地做成1.2米毛垄，净垄面0.9米，要求垄面平整。在定植前喷洒除草剂都尔，用量1500克/公顷，喷药后除定植穴外，尽量做到不破坏土表除草剂液膜。2天后进行定植，这样可使整个生长季节没有草害发生。定植一般在4月中旬，秧苗有23对其叶时进行。每垄定植6行，株行距均为0.15米。除露地栽培，紫苏可根据不同食用目的，利用保护地进行栽培，如: 芽紫：:将种子播于用300毫克/升赤霉素溶液湿润过的苗床或一些简易的育苗盘，当紫苏长至具有4片真叶时，齐地面.剪断，收获芽紫苏。穗紫苏：北方冬季利用温室生产，由于日照短，可以促进花芽分化，南方地区可用黑.膜覆盖，使日照缩短至67小时琦当长至67片真叶时抽穗，穗长至68厘米时可以收获穗紫苏。 (5)田间管理 生产期间看长势及时追施尿素78次。在整个生长期，要求土壤保持湿润，利于植株快速生长。定植后2025天要摘除初茬叶，第四节以下的老叶要完全摘除。第五节以上达到12厘米宽的叶片摘下腌制。有效节位一般可达2023节，可采摘达出口标准的叶4046张。紫苏分枝力强。对所生分枝应及时摘除。在管理上，要特别注意及时打杈。由于紫苏的分枝力强，如果不摘除分杈枝，既消耗了养分，拖延了正品叶的生长，又减少了叶片总量而减产。打杈可与摘叶采收同时进行。对不留种田块的紫苏，可在9月初植株开始生长花序前，留3对叶进行打杈摘心，此3对叶片也能达到成品叶的标准。(6)病虫防治 病虫害很少出现，如出现锈病，可用50%托布津1500倍进行防治，连续喷药两次，每周一次。为害紫苏的害虫，主要是蚱蜢和小青虫，使叶片穿孔失去商品价值。在防治上，可采用敌敌畏、速灭杀丁等残效期短的强力杀虫剂喷治。喷药一定要在叶片采摘后立即进行，为降低农药残留量，可延后下一次采叶时间，2对叶片同时采摘。(7)叶片的采收 菜用嫩茎叶，可随时采摘。作出口商品的紫苏，需按标准采收，其采收标准是:叶片中间最宽处达到12厘米以上，无缺损、无洞孔、无病斑。一般于5月下旬或6月初，若秧苗壮健，从第四对至第五对其叶开始即能达到采摘标准。6月中、下旬及7月下旬至8月上旬，叶片生长迅速，是采收高峰期，平均34天可以采摘一对叶片，其他时间一般每隔67天采收一对叶片。从5月下旬至9月上旬，一般可采收2023对合格的商品叶，腌制后可达株产120克左右。作药用的苏叶，于秋季种子成熟时，即割下果穗，留下的叶和梗另放阴凉处阴干后收藏。(8)采种 以收获种子为目的时，应适当进行摘心处理，即摘除部分茎尖和叶片，以减少茎叶的养分消耗并能增加通透性。在花蕾形成前需追施速效氮肥一次，10千克，过磷酸钙一次，10千克。由于紫苏种子极易自然脱落和被鸟类采食，所以种子40%50%成熟时割下，在准备好的场地上晾晒数日，脱粒，晒干。如不及时采收，种子极易自然脱落或被鸟食。(四)营养价值紫苏全株均有很高的营养价值，它具有低糖、高纤维、高胡萝小时素、高矿质元素等。在嫩叶中每100克含还原糖0.681.26克，蛋白质3.84克，纤维素3.496.96克，脂肪1.3克，胡萝卜素7.949.09毫克，维生素B1 0.02毫克，维生素B2 0.35毫克，尼克酸1.3毫克，维生素C5568毫克，钾522毫克，钠4.24毫克，钙217毫克，镁70.4毫克，磷65.6毫克，铜0.34毫克，铁20.7毫克，锌