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仪器分析实验论文 高效液相色谱测定麦麸中阿魏酸含量姓名:张雯 专业班级:食品质量与安全2010级1班 学号:20105858 高效液相色谱测定麦麸中阿魏酸含量 张雯 食品质量与安全2010级1班 20105858 摘要：应用HPLC法测定样品中阿魏酸的含量，以C18为色谱柱，以甲醇-水-冰乙酸（30：69：1）为流动相，在柱温为30，流速为1.0mL/min，320nm波长处检测。结果显示阿魏酸在进样量为40.4242.4ug间与峰面积有良好的线性关系（R =0.9959）。通过线性关系可以计算出麦麸中阿魏酸的含量。本方法简便快捷，重现性好，准确度高，对于麦麸中阿魏酸含量的定量分析比较适用。 关键词：麦麸、阿魏酸、高效液相色谱（RP-HPLC） HPLC ferulic acid in wheat bran ZhangWen Food Quality and Safety 2010 Class1 20105858Abstract:HPLC method for the determination of ferulicacid in the samples to C18 column using methanol-water- acetic acid(30:69:1)as mobile phase at column temper- ature was 30,the flow rate was 1.0ml/min,320nm wavel-ength detection.The results showed that ferulic acid injection volume and the peak area between40.4-242.4 ug good linear relationship(R=0.9959).It can be calc-ulated by the linear relationship of ferulic acid in wheat bran content.This method is simple,fast,reproducible,precise,and for ferulic acid in wheat bran compared for quantitative analysis. Key words:wheat bran,ferulic acid,high performance-liquid chromatography(RP-HPLC)阿魏酸（Ferulic Acid）的化学名称为4-羟基-3-甲氧基肉桂酸，是桂皮酸（又称肉桂酸，3-苯基-2-丙烯酸，分子结构略）的衍生物之一。阿魏酸（阿魏酸钠）具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素a2(txa2)的生成，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病以及白细胞减少等症状的药品的基本原料。如心血康，利脉胶囊，太太口服液等等，同时它在人体中可起到健美和保护皮肤的作用。1 材料与方法1.1 材料与试剂 甲醇为色谱纯，水为超纯水，冰醋酸，乙醇以及盐酸为分析纯等；16.16ppm阿魏酸标准液。1.2 仪器与设备 LC-10A高效液相色谱仪（7725i型手动进样器），C18色谱柱。1.3 样品处理 称取10g烘干至恒重的小麦籽粒用粉碎机粉碎后，浸入100ml蒸馏水中加淀粉酶0.2g,在55下，用4%NaOH溶液调pH=8.0,于恒温水浴锅水浴1h（每10min定期振荡），再用胃蛋白酶0.1g在37下，用6molL-1HCl溶液调pH=2,于恒温气浴摇床中再次振荡搅拌1h。之后再用四层纱布过滤，取滤渣于105下烘干2h灭酶，得到干沉淀，再次称重（记录实际称量质量）。干沉淀用体积比2：1的碱醇（质量分数4%的NaOH,无水乙醇）溶液按料液比1：12（w/v）浸润，在40下加入0.3g无水Na2SO3,超声0.5h。用6molL-1HCL溶液调节pH=2,6000rpmmin-1离心15min,去残渣。上清液于50旋转蒸发出其中的乙醇。将余液用流动相定容至50ml,摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过即可。1.4 HPLC测定 用精密注射器分别吸取2.5，5.0，7.5，10.0.15.0uL标准品进样。得到如下图的结果：标准品浓度16.16ug/ml进样体积ul保留时间进样量(ug)峰面积2.5 957440.4157278.95 978380.8573134.17.5 9.496121.2878585.510 9.581161.6117341915 9.609242.417820951.5 样品含量的测定取处理好的三种体积相同的麦麸5uL分别注入高效液相色谱仪中，记录好峰面积和保留时间，然后根据公式y=7892.5x-1O7445计算出阿魏酸的含量。1号样品保留时间峰高峰面积含量 9.19818942.95559540.684.67872号样品 保留时间 峰高 峰面积 含量 9.332 18907.03 500969.6 76.34013号样品 保留时间 峰高 峰面积 含量 9.265 24807.04 589257.5 88.90951.6 统计分析阿魏酸的含量为（88.6787+76.3401+88.9095）/3=84.6428ug2 结果与分析 根据实验结果可知，R2=0.9959，标准液在9.2min左右处开始出峰，计算出的三个样品的含量也应该在此时间段内，得出的结果84.6428ug符合实验要求，说明本次实验比较成功。同时也说明流动相在30下出峰最好，分离效果最佳。但是本次实验也存在一些误差，造成误差的原因可能是在进样的时候没有操作好，或实验过程中出现被测样品的流失等，导致了峰的漂移。值得注意的是阿魏酸的化学性质极不稳定，需避光保存并低温冷藏。本实验采用超声提取法，操作简便，灵敏度高，准确性好，提取效率高并有效地避免了高温高热对阿魏酸稳定性的影响。用HP-HPLC法测定麦麸中阿魏酸含量的优点表现在样品预处理简单、回收率较好重现性好、稳定性好、准确度高以及专属性强等方面。致谢：感谢张志清教授在平时对我们的谆谆教导，使我对仪器分析有了初步的认识，我会在以后的大学生涯中继续踏实努力地学习，并将张教授所教的仪器分析的知识运用到实际工作中，再次诚挚地感谢张教授的辛勤教育和指导!参考文献：【1】、张志清，蒙昭等。小麦苗中阿魏酸含量变化分析【J】.食品科学.2010(18)：271-274【2】、刘会荣。阿魏酸含量分析方法概述【J】.中国药业.2