利尿实验

利尿药对麻醉家兔尿量及尿中钠、钾、氯离子含量的影响,药理教研室,1.1 实验目的： 学习学习利尿的实验方法. 观察利尿药对尿量的影响。 学习测定尿液中钠离子,钾离子和氯离子的方法。1.2 实验原理： 呋噻米属高效利尿药，通过抑制髓袢升枝粗段对氯化钠的重吸收而达到利尿作用 。,1,实验目的及原理,肾单位结构,肾单位,肾小体,肾小管,近端小管,肾小囊,肾小球,髓泮细段,远端小管,近曲小管,远曲小管,近端小管直段,髓泮降支细段,髓泮升支细段,髓泮升支粗段,高效利尿药的重要作用部位。 K+-Na+-2Cl-同向转运系统 钠泵是同向转运驱动力。 对水不通透，重吸收3035%Na+。 （1）尿的稀释： 管腔内呈低渗，肾髓质高渗。 直至形成无溶质的净水。（2）尿的浓缩： 当流经集合管高渗髓质段时， 在抗利尿激素的作用下，水被重吸 收，尿液被浓缩。,2. 髓袢升枝粗段：,利尿药(diuretics)是一类直接作用于肾脏,促进电解质和水从体内排出、增加尿量、消除水肿的药物 。 高效利尿剂（呋塞米） 中效利尿剂（噻嗪类） 低效利尿剂（螺内酯、乙酰唑胺）,主要实验材料,利尿部位 髓袢升支粗段。利尿机制 抑制髓袢升支粗段 Na+-K+-2Cl-同向转运系统， 干扰NaCl重吸收。 （1）抑制尿的稀释 （2）抑制尿的浓缩利尿特点 迅速、强大、短暂。,呋塞米 furosemide（速尿，呋喃苯胺酸）,【药理作用】,近等渗尿液,高效利尿药呋塞米（速尿）,药理作用1.利尿作用 迅速、强大、短暂利尿同时伴有K +,Na+,Cl-,HCO3- ,Ca2+ ,Mg2+排出明显增加。2. 扩张肾血管，增加肾血流量,临床应用,1. 严重水肿 2. 急性肺水肿和脑水肿 3. 预防急性肾衰 4.加速毒物排出,主要实验材料,实验动物：雄性家兔，体重2 3kg 实验药物： 25%乌拉坦、1%呋噻米、主要仪器：兔手术台、注射器、手术器械、膀胱漏斗、10 ml量筒。,1、用25%戊巴比妥钠 4 ml/kg经耳缘静脉注射麻醉,实验主要步骤1,4,2、 水负荷：取家兔1只，称重，灌胃给与自来水 40 ml/kg，避免灌至气管。,4,实验主要步骤2,3.手术：背位固定家兔，剪去下腹部被毛。家兔背位固定于兔台上。耻骨联合前正中切开腹部皮肤46 cm。,实验主要步骤3,4,于耻骨联合上方切开皮肤约45 cm，并沿腹白线剪开肌肉，暴露膀胱,实验主要步骤4,4,5、在膀胱游离部少血管区作荷包缝合，然后剪开小口插入膀胱漏斗并固定。,实验主要步骤5,4,在少血管区作荷包缝合后行膀胱插管,实验主要步骤6,4,1、每2分钟记录一次正常尿量，记录10分钟(每2min尿量) ；2、耳缘静脉注射1%呋塞米0.4ml/kg，记录给药后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20min的尿量。,实验主要步骤5,实验主要步骤7,4,-10 -8 -6 -4 -22 4 6 8 10 11 12 14 18 20min,给药前,给药後,呋塞米,1、测定2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 min的尿中Na和K离子的浓度。2、测定6、10、14、18min的尿中Cl离子的浓度。,1.用空白溶剂(蒸馏水)进样,调节“低标”旋钮,使仪器显示0.02.用K+0.04mmol/L+Na+1.4mmol/L混合液进样,调节“高 标”旋钮,使仪器均显示K4.0, Na140。3.反复几次,使读数基本不变,即可进行样品测试。4.将尿样稀释200倍进样,所显示的读数即为尿中K,Na浓度,火焰光度计主要操作步骤,4,尿中Na, K含量(mmol)=仪器读数(尿中Na, K浓度mmol/L)2分钟内尿量(L),5.火焰光度计是相对测定的仪器,在测定过程中,经标定后,可进行样品检测,但随着几个或更多个样品的测定,需要重新进行标准液的标定,这样才能保证测定的准确度,火焰光度计注意事项,【实验试剂】 1. 硝酸银标准液(每1 ml相当于氯化纳1 mg或氯离子0.606 mg)。 2. 20% 铬酸钾溶液,尿中氯离子的银滴定法,4,【实验器材】 滴定管、吸管、蒸发皿【实验方法】 用吸管准确吸取尿液1.0 ml, 置于蒸发皿中，加蒸镏水10 ml 和20%铬酸钾溶液2滴，慢慢滴入硝酸银标准液，随滴随摇，至呈不褪色的桔红色为止。记录所消耗硝酸银标准液的ml数。【计算】,4,尿中氯离子含量(mg)=滴定所消耗硝酸银标准液 (ml)0.6062分钟尿量(ml),尿中氯离子的银滴定法原理,用硝酸银试剂将尿液中的氯离子沉淀为氯化银。如硝酸银略有过量，便与铬酸银作用，成形桔红色的铬酸银。其反应式如下：NaCl + AgN03 AgCl+NaN03 2AgN03+K2Cr04 AgCrO4 +2KN03,AgCl沉淀溶解度小于AgCrO4沉淀，AgCl沉淀先生成,砖红色,实验结果,1.结果汇总，计算不同时间尿量的均值，以尿量毫 升数为纵坐标，给药后时间为横坐标作柱形图。 2.计算不同时间钠,钾和氯量的均值,以钠,钾和氯量 为纵坐标给药后时间为横坐标作折线图。,实验结果,4,髓泮升支粗端 （30-35Na+）,不良反应,1.水与电解质紊乱 低血容量、低血压 低血钾 低血钠 低氯碱血