医学微生物学分支杆菌属嗜血杆菌属

第十四章 分枝杆菌属,1,2,细长略弯曲的杆菌,有分枝生长的趋势细胞壁含有大量的脂质抗酸染色（+）致病性与菌体成分有关，引起的疾病都呈慢性，并伴有肉芽肿。,分枝杆菌共同特点,分枝杆菌的分类,态生两靥之愁，娇袭一身之病。泪光点点，娇喘微微。闲静时如姣花照水，行动时如弱柳扶风。,林黛玉,林黛玉到底得的是什么病？,肺结核,结核病是由哪个 引起的呢？,结核分枝杆菌,致病菌,第一节 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis),第二节 麻风分枝杆菌 (Mycobacterium leprae),一、生物学性状 二、致病性 三、免疫性 四、微生物学检查法 五、防治原则,主线,中国医史中，结核病最早记载于内经并形容为“虚痨”之症。古代文献有提及肺痨为痨虫于肺所致，但未能确定致病的成因。,结核分枝杆菌是引起结核病的病原体,19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，生活困顿的人群成了结核病的温床。是造成死亡的主要原因，被人们称为“巨大的白色瘟疫”。,鲁迅,李叔同,林徽音,林黛玉,结核病的病原菌1882年德国细菌学家 Koch 证明全球性卫生问题是艾滋病高发区人群的首要死因世界防治结核病日3月24日,Mycobacterium tuberculosis,TB,1982年将每年的3月24日定为“世界防治结核病日”。,我国是世界上22个结核病高负担国家之一,具有强烈传染性的慢性消耗性疾病,迄今因结核病死亡人数已达2亿,形态与染色,细长略弯，有时呈分枝状；无芽胞、鞭毛和荚膜抗酸染色阳性,一、生物学性状,Mycobacterium tuberculosis,罗氏培养基：乳白色或米黄色，干燥、表面粗糙呈颗粒样或菜花状菌落。,培养特性,专性需氧生长缓慢(18-24h/代)营养要求高,1,16,馋：营养要求较高,懒：生长缓慢,丑：菌落呈菜花状,顽：抵抗力强,抵抗力,巴氏消毒法能杀灭结核分枝杆菌吗？,四怕乙醇湿热紫外线抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）,四不怕干燥酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗力碱性染料青霉素等抗生素,生化反应,糖类发酵试验（）触酶试验（+）热触酶试验（）,与非结核分枝杆菌鉴别试验,一、生物学性状,Mycobacterium tuberculosis,毒力变异：卡介苗（BCG）：1908年，Calmette和Guerin将有毒的牛分枝杆菌培养在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株，用于预防结核病。,Mycobacterium tuberculosis,变异性,一、生物学性状,L型变异： 结核杆菌经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、异烟肼作用变成L型结核菌。耐药性变异： MDR-TB,Mycobacterium tuberculosis,变异性,一、生物学性状,致病因素,脂质：磷脂 脂肪酸:索状因子 蜡质D 硫酸脑苷脂/硫酸多酰基化海藻糖蛋白质：结核菌素多糖,二、致病性与免疫性,Mycobacterium tuberculosis,结核分枝杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成分，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核分枝杆菌的毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈强。,索状因子（cord factor） ：是分枝菌酸与海藻糖结合的一种糖脂。使结核分枝杆菌在液体培养基相互黏连平行排列呈索状，破坏线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。,Mycobacterium tuberculosis,二、致病性与免疫性,结核分枝杆菌菌落,结核分枝杆菌索状生长,磷脂：促进单核细胞增生，引起结核结节、 干酪样坏死蜡质D：是一种肽糖脂与分枝菌酸的复合物， 佐剂，激发机体产生迟发性变态反应硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶 体的融合,Mycobacterium tuberculosis,二、致病性与免疫性,蛋白质:结核分枝杆菌菌体内含有多种蛋白质，其中重要的是结核菌素。结核菌素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型超敏反应。,Mycobacterium tuberculosis,二、致病性与免疫性,多糖：多糖可使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。核酸：核糖体核糖核酸是本菌的免疫原之一，能刺激机体产生特异性细胞免疫。,Mycobacterium tuberculosis,二、致病性与免疫性,感染途径：呼吸道、消化道、破损皮肤黏膜侵犯多种组织器官，肺部最常见,发热盗汗咳嗽咳痰胸痛咯血其他：乏力，易疲劳，心烦意乱，食欲差,1,30,临床表现,黛玉一翻身，却原来是一场恶梦。喉间犹是哽咽，心头还是乱跳，枕头上已经湿透，肩背身心，但觉冰冷。一回儿咳嗽起来。紫鹃开了屋门去倒那痰盒时，只见满盒子痰，痰中好些血星,1,31,紫鹃一手搂着黛玉坐起，一手端着汤送到唇边。黛玉微微睁眼喝了两三口，便摇摇头儿不喝了。 “林姑娘脸上一点血色也没有，摸了摸身上，只剩得一把骨头”,1,32,肺部感染原发感染,首次感染多发生于儿童原发综合征形成结核结节转归,原发感染,肺部感染原发后感染,多由原发病灶潜伏的结核菌引起多发于成年人病灶多局限易发生干酪样坏死和形成空洞为开放性肺结核,1,36,肺外感染,免疫力低下患者常见于脑、肾、骨、关节、生殖系统少数形成全身粟粒性结核或播散性结核,细胞免疫：属传染免疫（infection immunity），又叫带菌免疫，即只有结核杆菌在体内才会有免疫力，一旦体内结核菌被杀灭，免疫也随之消失。体液免疫：机体能够产生抗体但无保护性作用。,以细胞免疫为主,Mycobacterium tuberculosis,二、致病性与免疫性,细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在郭霍现象免疫和超敏反应的物质基础结核分枝杆菌核糖核酸（rRNA）-免疫反应结核菌素蛋白、蜡质D-超敏反应,三、免疫与超敏反应,郭霍现象,是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验。,结核菌素实验,Mycobacterium tuberculosis,结核菌素试验,目的,判断人群对结核有无免疫力（超敏反应）,原理,VI型变态反应或迟发性超敏反应,旧结核菌素（old tuberculin，OT）：主要成分是通过将结核菌接种于甘油肉汤培养基中，培养4-8周加热浓缩过滤而成。纯蛋白衍化物（purified protein derivative，PPD）: OT经三氯醋酸沉淀而成。,试剂,Mycobacterium tuberculosis,方法,OT或PPD5个单位注射前臂屈侧内皮48-72h后观察,阳性：0.5-1.5cm：感染过结核杆菌，但不一定是结核病。强阳性：1.5cm：可能有活动性结核病。阴性： 0.5cm：未感染过结核；感染初期；老年人；严重结核患者或正患有其他传染病；获得性细胞免疫低下者,Mycobacterium tuberculosis,结果判断及意义,选择卡介苗接种效果或免疫效果的测定。婴幼儿结核病诊断的参考。测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能。未接种卡介苗人群中结核病的流行病学调查。,Mycobacterium tuberculosis,应用,三、微生物学检查,标本取材涂片染色镜检：抗酸染色培养法：罗氏固体培养基动物试验细菌学基因诊断：PCR,Mycobacterium tuberculosis,四、防治原则,卡介苗预防接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童免疫时间：3-5年,新生儿即使注射了卡介苗，还有潜在威胁。从接种卡介苗到人产生免疫力约需2个月。其间，小儿基本上不具有抗结核病的免疫力。另外，对大量、反复、毒性较强的结核杆菌感染，卡介苗不一定能抵御，要让孩子避免接触病人,治 疗,要正规彻底治疗结核病必须有6至8个月的疗程，且必须要多种药物联合使用，才能彻底治愈。常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨酸、乙胺丁醇等。,多重耐药结核杆菌（MDR-TB）,现阶段结核防治过程中的主要问题,HIV与结核的双重感染,下列细菌中繁殖最慢的是：A.大肠埃希菌 B.丙型链球菌 C.脑膜炎奈瑟菌 D.结核分枝杆菌 E.肺炎链球菌,在液体培养基中形成菌膜生长的细菌是：A.变形杆菌 B.布氏杆菌 C.脑膜炎奈瑟菌 D.结核分枝杆菌 E.产气荚膜梭菌,结核分枝杆菌常用的培养基是：A.沙保弱培养基 B.罗氏培养基 C.疱肉培养基 D.巧克力色培养基 E.亚碲酸钾培养基,细胞壁含脂类最多的细菌是：A.结核分枝杆菌 B.白喉棒状杆菌 C.衣氏放线菌 D.霍乱弧菌 E.幽门螺杆菌,不以内毒素或外毒素为致病物质的细菌是：A.白喉棒状杆菌 B.炭疽杆菌 C.结核分枝杆菌 D.绿脓假单胞杆菌 E.布氏杆菌,从痰中检出具有临床诊断意义的细菌是：A.表皮葡萄球菌 B.金黄色葡萄球菌 C.甲型溶血型链球菌 D.脑膜炎奈瑟菌 E.结核分枝杆菌,第一节 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis),第二节 麻风分枝杆菌 (Mycobacterium leprae)掌握：麻风分枝杆菌：形态、染色和致病性,一、生物学性状 二、致病性 三、免疫性 四、微生物学检查法 五、防治原则,主线,麻风病的病原菌（慢性传染病）世界各地均有报道主要分布在亚、非和拉丁美洲,麻风分枝杆菌- 麻风病,麻风病的病原菌: 慢性传染病世界各地均有报道 主要分布在亚、非和拉丁美洲主要侵犯神经、皮肤,家庭内传播多见,Mycobacterium leprae,形态与染色,细长略弯曲无芽胞，无荚膜，无鞭毛抗酸染色阳性典型的胞内寄生菌泡沫细胞（麻风细胞）唯一不能人工培养的细菌,Mycobacterium leprae,麻风杆菌,麻风细胞,致病性与免疫性,传播方式呼吸道也可通过接触传染发病慢, 病程长潜伏期： 一般是6个月至5年麻风的免疫主要是靠细胞免疫麻风结节,麻风两型两类相互间的关系图,Mycobacterium leprae,致病,结核样型麻风,瘤型麻风,界线类麻风,微生物学诊断,显微镜检查可从患者鼻粘膜或皮损处取材，用抗酸性染色后检查一般瘤型和界线类患者标本中可找到细菌在细胞内存在，有诊断意义PCR,Mycobacterium leprae,麻风分枝杆菌的特性不包括：A.抗酸染色阳性 B.专性需氧，在人工培养基中生长缓慢 C.胞内寄生 D.以家庭内传播多见 E.患者标本中有麻风细胞，有诊断和鉴别意义,目前麻风病的实验诊断主要是：A.标本直接涂片染色镜检 B.分离培养 C.麻风菌素试验 D.动物试验 E.血清学试验,第十五章 嗜血杆菌属,嗜血杆菌属细菌是一类革兰阴性小杆菌，常呈多形态性，无鞭毛、无芽胞。,嗜血杆菌属（Haemophilus）,流感嗜血杆菌（H. influenzae） 杜克嗜血杆菌（H. ducreyi） 埃及嗜血杆菌（H. aegyptius） 副流感嗜血杆菌（H. parainfluenzae） 嗜沫嗜血杆菌（H. aphrophilus） 溶血性嗜血杆菌（H. paraphrophilus ）,嗜血杆菌属,流感嗜血杆菌杜克嗜血杆菌埃及嗜血杆菌,致病嗜血杆菌,17个种,名称由来,于1892年由费佛博士在流行性感冒的瘟疫中发现。曾误认为它是1889年流感大流行的原因。直至1933年，发现流行性感冒的病毒性病原后，才消除了这种误解。,与流感的关系,是流感时继发感染的常见细菌,H. influenzae,一、生物学性状,G小杆菌，多形性，有毒菌株形成荚膜,培养较难，必须借助于血液中的X、V两种辅助因子才能合成完整的酶，参预细菌的代谢过程。,培养特性,巧克力色平板上培养：经35，1824h培养形成微小（0.50.8mm）无色透明，不溶血，呈露滴样小菌落。 48h后形成灰白色较大的菌落。,培养特性,当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，并弥散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。,卫星现象（satellite phenomenon）：,抵抗力：弱，对热和干燥均敏感根据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强可产生自溶酶,H. influenzae,一、生物学性状,荚膜：抗吞噬菌毛：黏附、定植内毒素：致病作用尚不清IgA蛋白酶：水解sIgA,H. influenzae,二、致病性,该菌较广泛地寄居于正常人呼吸道 冬季带菌率较高 本病遍布世界各国 4-18月龄儿童发病率最高，脑膜炎多见体液免疫为主,H. influenzae,二、致病性,标本（痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液）,涂片染色镜检,分离培养,G-杆菌多形性,鉴定试验,“卫星现象”,报告结果,b型抗原检测,核酸检测-PCR,检流感嗜血杆菌,检出病原体,H. influenzae,三、微生物学检查,H. influenzae,四、防治,流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌共同孵育，可促进其生长，主要因为，金黄色葡萄球菌能产生下列何种物质：A.X因子 B.Y因子 C.Z因子 D.V因子 E.M因子,如何提高流感嗜血杆菌的阳性率：A.初次培养应置于5%-10%的CO2环境B.在培养基中添加X、V因子C.用巧克力平板培养D.在培养基中添加某些抗生素以抑制杂菌E.以上均是,流感嗜血杆菌不引起：A.流行性感冒 B.化脓性脑膜炎 C.鼻咽炎 D.化脓性关节炎E.心包炎,根据抗原结构分类,链球菌分20个群,对 人致病的90%属于： AA群 BB群 CC群 DD群 EE群,关于肠道杆菌的描述不正确的是：A所有肠道杆菌都不形成芽胞 B肠道杆菌都为G杆菌 C肠道杆菌中致病菌一般可分解乳糖D肠道杆菌中非致病菌一般可分解乳糖E. 肠道杆菌中少数致病菌可迟缓分解乳糖,关于金黄色葡萄球菌,下列哪种说法是错误的： A耐盐性强 B在血平板上形成完全透明的溶血环 C引起局部化脓性感染时病变比较局限D不易产生耐药性，抵抗力强 E革兰阳性菌,引起肠道疾病的无动力细菌是：A沙门菌 B霍乱弧菌 C副溶血性弧菌 D痢疾杆菌 E肠产毒性大肠杆菌,鉴别肺炎链球菌比较可靠试验是：A发酵菊糖 B发酵蔗糖 C发酵乳糖 D胆汁溶菌试验 E发酵麦芽糖,肠热症发热一周内,检出伤寒沙门菌最高阳性率的方法是： A血培养 B尿培养 C便培养 D痰培养 E胆汁培养,葡萄球菌致急性胃肠炎的致病因素是：A杀白细胞素 B溶血毒素 C肠毒素 D血浆凝固酶 E红疹毒素,SPA在致病中的作用是：A抑制吞噬细胞的吞噬作用 B因其有抗原性 C是一种毒素 D能破坏吞噬细胞E在菌 体表面形成保护层,肥达反应