对液体菌种设备及工艺认识误区的剖析.doc

对液体菌种设备及工艺认识误区的剖析我们结合液体菌种推广以来人们最担心、最关心和最容易出现失误的问题，例如液体菌种易染杂菌、单核化不长子实体、出畸形菇以及不能工厂化生产等问题做以探讨分析： 一、 膜过滤技术解决易染杂菌问题 几十年前和我国现在土办法制作液体菌种的设备不具备生产高纯度菌种的条件，其中最重要的是过滤材料。今天我们采用的是国际发酵行业先进的膜过滤材料，它具有过滤效果好（氧气纯度达99.999999%）耐高温高压，使用寿命长（可连续高压灭菌200小时，使用2-3年），不受环境湿度影响的优点。关键是这种滤膜的孔径为0.01微米，而空气中的杂菌，最小的细菌个体大小长为15微米，宽0.51微米，而放线菌、酵母菌等其它杂菌个体比细菌还要大，因而杂菌被拦截过滤在膜网外，保证进入培养器内的空气100%的纯度，解决了液体制种最为关键的供气纯度问题，也就解决了液体制种多年不能解决的染菌。 二、 提升式气体搅拌解决单核化问题 传统的液体制种，采用的是机械搅拌，机械搅拌解决了液体的溶氧，促进菌体断落分裂，增加菌球的问题，但长期不间断的剧烈机械刺激，不断地撞击正在形成和生长的菌球，使菌球缺少一个较为稳定的吸取营养、完成一个生长过程的时间条件，产生大量不规则、不完整的菌球。再者剧烈碰撞可产生大量热量，在培养器内30度的温度极易形成，此温度是菌丝代谢受到严重干扰，菌球极易发生变异，出现单核化。 现在我们采用的是空气提升式搅拌，气体由下向上、气泡均匀、流速稳定、保证培养液随着气体从下向上均匀、有序、协调运动，既保证了供氧量，又避免了机械搅拌对菌球反复撞击所造成的伤害，因而避免了单核化。 三、 同功酶性状、数量的稳定解决了不长子实体和畸形菇问题 同功酶是一种属于不同基因编码的蛋白质，它参与菌体细胞整个物质代谢、能量传递、生长发育的全过程。传统的液体制种过多过频的使用化学试剂，接入的菌种培养基和培养液的培养基全部采用化学试剂，这些小分子营养物培养而成的菌体因在培养和生长过程中没有分解大分子化合物、纤维素、木质素的过程，这样就会出现菌体内同功酶积累的减少或部分失去，同功酶是基因分化的产物，因小分子营养物培养基培养而成的菌体同功酶的减少和失去，接入固体大分子化合物培养基中的菌体就不能适应愈趋复杂的代谢而引起的分子进化，就不能适应大分子化合物培养基在代谢上的不同需要，所以就造成遗传性能的不稳定，导致菌体结构的变异、退化，直致不长子实体或出畸形菇。 四、 大分子培养基的应用解决菌种种性不稳定问题 食用菌的培养基如采用小分子化合物（单糖、有机酸、醇）都可被菌丝细胞直接吸收，但是，第一代母种是PDA斜面培养基，第二代上摇床做液体，然后再做种源接入液体培养基内培养，这几次培养都采用化学试剂培养基，菌丝分解木质素，纤维素的能力逐渐下降的原因是菌丝体中酶的减少，特别是纤维素酶，因为反复大量使用小分子化合物培养基，酶的活力和含量逐渐减少和消失，因酶的失去和减少，菌丝对大分子化合物的分解吸收能力就下降，菌种质量就无法保证。 通过我们五年大量的实践，近千台培养器的投入使用，充分证明液体菌种的种源采用固体天然培养基，对保持各种酶的活性，保证菌丝旺盛的生命力特别重要。 五、 工业化生产液体菌种的可行性 食用菌研究所在国内率先推出的液体菌种培养器就是以实验室提供的技术参数为基础，通过对空气膜过滤系统，提升管式气体搅拌，天然培养基的配制，液体专用母种的研制，培养基灭菌温度、时间、培养温度的电子自控等几大主体课题的攻克，使菌丝细胞在培养器中处于最适宜的温度、酸碱度、氧气和碳氮比等条件，自由、充分地呼吸纯度为99.999999%的氧气，及时排出呼吸作用所产生的代谢废物，能在短时间内产生大量菌丝体，完成工业化制备液体菌种的过程。 六、 液体专用母种的优势 液体培养由于其特殊性决定了对接入的菌种有其独特的要求。在实践中我们首先对用液体培养的种子进行纯化，另外还对使用的菌种进行多次筛选，选出那些大小均匀，直径0.51毫米之间，悬浮在培养液上层的菌球提出来再培养使用。再次我们还使用了匀质化，易分散的原材料作为母种培养基的主料，萌发点多，周期短，这些处理方法及措施，既降低了液体菌种生产中的染菌率，