流式细胞术的基本原理及其应用ppt课件_第1页
流式细胞术的基本原理及其应用ppt课件_第2页
流式细胞术的基本原理及其应用ppt课件_第3页
流式细胞术的基本原理及其应用ppt课件_第4页
流式细胞术的基本原理及其应用ppt课件_第5页
已阅读5页，还剩12页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

流式细胞术基本原理及应用 漆冬梅 流式细胞仪 flowcytometer 是一种集激光技术 电子物理技术 光电测量技术 电子计算机以及细胞荧光化学技术 单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器 台式机 临床型 大型机 科研型 目前最新型流式仪 流式细胞术 flowcytometry 利用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒进行多参数 快速的定性 定量分析或分选的技术 流动室与液流系统 光源与光学系统 信号收集与信号转换系统 计算机与分析系统 分选系统 流式细胞仪基本结构 流式细胞仪的液流系统 激光器 流动室 检测点 流式细胞仪的光学系统 光电转换器件 流式细胞仪的光信号 1 散色光信号前向角散色 ForwardScatter FSC 小角散色 与细胞直径成近似直线关系 侧向角散色 SideScatter SSC 90 散色 与细胞内颗粒结构的质量成近似直线关系 物理属性 用来区分不同细胞群体的基本形态上的差异 利用FSC SSC可将混合细胞分群 R1粒细胞群R2淋巴细胞群R3单核细胞群R4红细胞裂解碎片和少量血小板 图注 为外周血白细胞分群情况 由于淋巴细胞体积较小 细胞内颗粒较少 故其分布处于FSC SSC都较小的区域 即R2区 粒细胞体积较大 细胞内颗粒较多 故其分布处于FSC SSC最大的区域 即R1区 单核细胞体积较大 细胞内颗粒较粒细胞少 淋巴细胞多 故其分布于二者之间 2 荧光信号荧光素与特异抗体结合荧光素吸收激光能量 发生能量跃迁 产生荧光荧光信号被特定波长的光学元件传递到信号收集器中 PMT 形成信号脉冲 每种颜色的荧光占用一个特定波长的检测器 即荧光通道 化学属性 荧光标记抗体与细胞结合原理模式图 常用抗体标记荧光染料的特性及其应用 BDLSR 四种激光器355nm405nm488nm633nm 可进行多达10色以上的多色荧光分析 流式细胞术的应用 细胞表面分子细胞内或细胞核内抗原细胞凋亡DNA含量检测与细胞周期的分析细胞增殖细胞毒的检测与分析可溶性蛋白分子报告基因其它 样品处理 全血直接标记法溶血 红细胞裂解液膜表面抗原染色 孵育温度 时间 对照固定与透膜 固定剂 透膜剂细胞内抗原染色 透膜上机检测 加入PBS200 500 l 上机检测 如不能及时上机检测 则加入0 5ml1 多聚甲醛 混匀后置于4度冰箱内保存后检测 24h
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论