磷酸缓冲液及(PH6.doc

此文档收集于网络，如有侵权，请联系网站删除磷酸缓冲液的（PH6.8）配制A：磷酸二氢钾：4.559g +500ml蒸馏水B：磷酸氢二钠：11.908g +500 ml蒸馏水C：Giemsa原液A+B+C=22ml+27ml+7.5ml 磷酸缓冲液的（PH7.2）配制A：磷酸二氢钾：1.77g +1000ml蒸馏水B：磷酸氢二钠：19.4g +1000 ml蒸馏水C带制作法1. 用0.0175M的NaOH溶液处理半分钟后再处理1分钟，取出放在75、75、95、95的各级酒精中漂洗1-2分钟（脱水），将玻片干燥后置于已经预热650C的6SSC溶液中，放在水浴箱中12-17小时，再用370C预热的蒸馏水漂洗干净，染色。试剂的配制方法1. NaOH 0.7g+蒸馏水1000ml2. 12SSC溶液微核率操作步骤培养72小时标本-收集离心1500/分钟（10分钟）-去上清-加预热的0.1MKCL（37度）-混匀，培养箱5分钟-预固定（1ML） 室温5分钟-离心-去上清，固定（5ML）20分钟-离心，去上清，加适量的固定液、混均-制片。3ml的蒸馏水+3ml的Giemsa.McI1vaines储藏液、染色液、冲洗液的配置一 目的：McI1vaines储藏液是为玻片染色准备。McI1vaines冲洗液是为产前染色体检查准备。二料和试剂1 磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O），分子量是3282 柠檬酸（C6H8O7），分子量是210.143 去离子超纯水4 甲醇（CH3OH）三操作步骤McI1vaines储藏液：1A液：0.2M的磷酸氢二钠溶液(71.6g+1000ml水)B液：0.1M的柠檬酸溶液(21.014g+1000ml水)2375ml的A液+125ml的B液3用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.84贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）McI1vaines染色缓冲液1 2730ml水+180ml McI1vaines储藏液+30ml甲醇2 用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.83 贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）McI1vaines冲洗缓冲液1 2820ml水+180mlMcI1vaines储藏液2 1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.83 贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）染色液配制：24ml麦氏染色缓冲液+16ml水+14ml磊氏染色储存液（1.6mg/mL）磊氏染色储存液：0.8g(磊氏染色液Sigma)+500ml(甲醇)，磁力搅拌器搅拌2小时，置于37度的恒温箱72小时。pH值；Na2HPO4溶液（mL）； NaH2PO4溶液（mL）5.8 ；8.0； 92.05.9 ；10.0 ； 90.06.0； 12.3 ； 87.76.1 ；15.0 ； 85.06.2 ；18.5 ； 81.56.3 ；22.5； 77.56.4 ；26.5 ； 73.56.5 ；31.5 ； 68.56.6 ；37.5； 62.56.7 ；43.5 ； 56.56.8 ；49.0； 51.06.9； 55.0 ； 45.07.0 ；61.0 ； 39.07.1 ；67.0 ； 33.07.2 ；72.0 ； 28.07.3 ；77.0 ； 23.07.4 ；81.0； 19.07.5 ；84.0 ； 16.07.6 ；87.0；