临床诊疗 实验室检验

实验室检验,动物医学院：谭菊,兽医临床诊断,兽医临床诊疗实验室检验课件,血样的采集及抗凝处理血沉、血红蛋白含量的测定红细胞压积测定红细胞计数白细胞计数白细胞分类计数血小板计数尿液、粪便的检查,实验检验的主要项目,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验目的:让同学们熟练掌握一些常用动物的采血方法实验器材:采血针、注射器、消毒器皿、剪毛剪、酒精棉灭菌干棉球、小试管、标签纸、试管架等,实验一：血样的采集及抗凝,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验药品：3.8%枸橼酸钠、草酸盐合剂、肝素等等；生理盐水实验动物：猪、羊、兔、鸡等,兽医临床诊疗实验室检验课件,采血方法,末稍采血,心脏采血,静脉采血,可根据动物的种类和用血量的多少来选择适当的采血方法，主要的采血方法有：,兽医临床诊疗实验室检验课件,末稍（毛细血管）采血：用血量比较少，比如马牛在耳尖部；猪、羊在耳边缘；仔猪和小动物还可剪去尾尖部采血。此操作方法比较简单。,末稍采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,适用于一些小动物和家禽用血量大时可采用此方法。操作方法：鸡的采血方法：1、常用方法，右侧卧保定，用手在左侧触摸心搏动最明显的地方刺入或是从胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处垂直刺入24cm或是三叉神经处即可采得。2、对成年鸡还可以将其仰卧保定，在胸腔入口处水平进针。,心脏采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,兔的心脏采血：将兔仰卧保定，在第3肋间胸骨的左缘处用注射针垂直刺入心脏。或用手触摸心搏动最明显处进针。,心脏采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,猪、兔的静脉采血：耳静脉、如用量多时，对仔猪或中等大小的猪可选择前腔静脉采血。部位：将仰卧保定，拉直两前肢使体中线垂直或使两前肢向后与体中红线平行。手持针管，针头斜向后方与地面呈60角，向右侧或左侧胸前窝刺入进2-5cm,即可。,静脉采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,牛、马、羊:一般都在颈静脉，在上1/3与中1/3交界处，局部剪毛，消毒，手压近心端，待静脉怒张时，右手持针头对冷血管刺入即可。奶牛还可以有腹壁皮下静脉（乳前静脉），牛还可能在尾中静脉（2、3尾椎间）。,静脉采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,犬、猫、猴的采血：常在后肢外侧小隐静脉和前臂皮下（头静脉），位于前肢腕关节正前方稍向内。鸡的静脉采血：翼根静脉。,静脉采血,兽医临床诊疗实验室检验课件,1、EDTA二钠盐，一般配成1%的浓度。0.1ml可使5ml的血液不凝固。2、草酸盐合剂，铵盐和钾盐按3:2的比例，配成2%的浓度。此溶液0.5ml可以使5ml的血液不凝固。,常用抗凝剂,兽医临床诊疗实验室检验课件,3、枸橼酸钠，常用3.8%的浓度效果最好，1ml可使4ml的血液不凝固。4、肝素，是一种生理性的抗凝剂。所用制剂多为肝素的钠盐或是钾盐，常用浓度为1%，0.1ml可使10ml的血液不凝固。,常用抗凝剂,兽医临床诊疗实验室检验课件,1、在采血过程中要对动物和用血量的多少选择适当的采血方法。2、采血过程中要对动物进行必要的保定。3、采血的基本步骤为保定、剪毛、消毒、进针、采血、止血几个步骤。,注意事项,兽医临床诊疗实验室检验课件,4、若血液需要加抗凝剂时，应根据实验的项目及抗凝剂的特点来选择适当的抗凝剂。5、实验项目应尽早进行，抗凝血不宜放置过久。,注意事项,兽医临床诊疗实验室检验课件,实习：血沉、血红蛋白测定,实验目的、实验器材实验药品、实验动物操作方法及注意事项临床诊断意义,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验目的：让同学们了解并掌握血沉、血红蛋白测定的方法，及在操作所注意事项。实验器材：血沉架、血沉管、血红蛋白吸管、比色管、比色架、小试管、吸尔球、脱脂棉等。,实验前的准备,兽医临床诊疗实验室检验课件,沙利氏标准比色柱及测定管,血沉及血沉管,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验药品：3.8%枸橼酸钠、1%盐酸溶液、蒸馏水、酒精、乙醚等实验动物：羊、兔等。,实验前的准备,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验主要内容,一、红细胞沉降率的测定,二、血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验步骤(魏氏法)：取5ml刻度试管加3.8%枸橼酸钠1ml再采静脉血4ml将之混匀。用血沉管吸以上血液至“0”刻度处，用脱脂棉擦去管外壁的血液。,一、血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,3.将血沉管垂直放置于血沉架上，并开始计时，每隔15min计下红细胞下降的刻度（毫米数），共计数四次值。附：鸡的血沉正常参考值其它的见书（mm）15min、30min、45min、60min分别为：0.61.31.943.36,一、血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,血沉的病理变化可呈现加快或变慢。血沉测定是一种非特异性试验，它只能说明体内存在有病理过程，不能单独用于疾病诊断。,诊断意义,血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,1血沉加快：见于各种贫血、急性全身性感、各种急性局部炎症、创伤、手术、骨折、创伤等细胞受到损伤及某些毒物中毒等。2血沉变慢：可见于脱水、高热性疾病、心力衰竭、以及某些引起纤维蛋白原含量严重减低的肝脏疾患等。,诊断意义,血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项,血沉管必须垂直放置如果倾斜血沉会加快。血沉管必须是干燥干净的，否则也会影响血沉的速度。,血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项,3.室温条件要在20左右，否则也会影响血沉的速度，温度升高血沉加快，温度降低，血沉减慢。4.血液很抗凝剂的比例应为4:1；否则也会影响结果。,血沉测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验步骤：（1）在测定管内加1%盐酸溶液至“20/2”刻度处。（2）用血红蛋白吸管吸血20l的血液，加入测定管内并混匀，注意不要产生气泡。,二、血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,血红蛋白吸管的使用,1.清洗方法：先用蒸馏水酒精乙醚三个步骤进行。2.注意点：使用前后都要将管内洗干净。特别要将管内的血液挤干净才可进行以上三步的洗涤。,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验步骤,（3）静置十分钟，然后向比色管内滴加盐酸溶液并摇匀，再与标准比色板进行比色。再加再比色，反复进行直到比色管内的颜色与标准比色板一致为止。（4）读取液体凹面的刻度即为血红蛋白的含量。,血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,5.117.07（g/100ml）,附：鸡血红蛋白正常参考值：,其它动物的正常值的见书,血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,（1）血红蛋白含量增多：多见于机体脱水而血液浓缩和各种疾病，腹泻、呕吐等（2）血红蛋白含量降低：主要是由于红细胞损失过多或生成不足所致，可见于各种贫血和失血、溶血、红细胞生成障碍等。,诊断意义,血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,各种器材必须干净干燥用血红蛋白吸血不能多也不能少读数时若管内有气泡可有蘸取酒精少许并接触气泡部位即会消除,注意事项,血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,血红蛋白吸管外壁的液体一定要擦干净，否则结果就会偏大。比色的时候一定要用光面比色，另外加盐酸的时候要一滴一滴的加，不能过快，否则颜色就会变浅。,注意事项,血红蛋白测定,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞压积测定,红细胞压积，又称红细胞比容，是指红细胞在血液中所占容积的比值。红细胞压积与血液中红细胞的数量及其大小有关。兽医临床上常用PCV判定贫血；也通过PCV了解血液的浓缩程度，作为补液量的参考。兽医临床上常采用温氏法测定PCV。,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞压积测定,原理将抗凝血置于特制的温氏管中，并经离心沉淀，红细胞即下沉并压紧到最小容积，可测得每升血液中红细胞所占容积的比值。器材与试剂温氏测定管；细而长毛细吸管或长针头；离心机；抗凝剂等。,温氏管及充血长针头,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞压积测定,测定方法：用长的毛细吸管吸取乙二胺四乙酸二钠（EDTANa2）抗凝血液，插入温氏管底部，自下而上加入血液至刻度“10”处。将压积管置于水平离心机中，以3000r/min速度离心3060min（马30min，牛、羊、猪60min）。离心后，管内血柱分为四层，最上面一层为淡黄色的是血浆，中间一层薄薄的灰白色的为白细胞和血小板层，第三层红黑色薄层为含还原血红蛋白的红细胞层，最下层为含氧合血红蛋白的红细胞层。读取红细胞层所达到的毫米数，即为每100ml血液中红细胞压积容量的百分率。,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞压积测定,注意事项温氏管壁一侧自上而下标有010刻度，供测定血沉之用；另一侧自下而上标有010刻度，供测定PCV用，010之间共有100个刻度，测定时应正确选用。抗凝剂宜选用EDTANa2，因不改变其细胞体积及形态。放置或冷藏的抗凝全血必须让其回到室温，测定时必须轻轻而充分地把血液混匀。血样不能溶血，且用来吸取血液的毛细吸管或长针头的尖端不能离开液面，否则管内会产生气泡。读取结果时不能把细胞层最上方的灰白层（白细胞和血小板）计入。,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞压积测定,诊断意义：红细胞压积容量值增高：多因机体脱水而使血液浓缩，红细胞数相对增多所致，可见于各种脱水性疾病过程中，PCV是判定动物脱水程度的标准之一，并可依此而计算补液数量，但要结合临床症状及其他检测方法综合判断。红细胞压积容量值降低：多因红细胞减少所致，可见于各型贫血及伴有贫血的其他疾病过程中。,兽医临床诊疗实验室检验课件,实习:红细胞计数,红细胞计数概念、实验原理实验目的、实验所需的试剂实验器材、实验的主要方法及步骤注意事项、临床意义,兽医临床诊疗实验室检验课件,概念,红细胞计数（Redbloodcellcount，简称RBC）是指计算每mm3血液中所含红细胞的数目。其计数方法有显微镜计数法、光电比浊法、电子计数仪计数法等。目前兽医临床多采用在试管内稀释的血液后的显微镜计数法。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验原理：将全血在试管内用稀释液稀释400倍或200倍，在血细胞计数室内，数一定体积的红细胞数，然后再计算出1mm3血液内的红细胞数。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验目的掌握红细胞计数方法，并能判断红细胞的形态了解它的临床意义实验所需的试剂生理盐水、蒸馏水、酒精、乙醚及动物血液等。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验器材显微镜、计数板、计数器、血盖片、小试管、5ml吸管、吸（洗）尔球、脱脂棉、擦镜纸等,红细胞计数,血球计数板的正面及侧面图,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验的主要方法及步骤此实验常用的方法为试管稀释法血液的稀释（400倍）取4ml（精确的应该取3.99ml）生理盐水于小试管中，然后用血红蛋白吸管吸血液10l，将管外壁的血液擦拭干净，放置于装有生理盐水的小试管中，混匀，吸上清液清洗数次后备用。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,2、寻找计数室：将计数板盖上血盖片平放在显微镜的载物台上，在低倍镜下，暗视野下寻找计数室。（一个计数室有九个大方格，其中中间的一个大方格为红细胞计数室，共有25个中方格，每个中方格又分成16个小方格）。,红细胞计数,血细胞计数室,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞计数室,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,3、充液：将配好的稀释液用吸管吸取一滴充在计数板与血盖片之间，并静置12min，等待红细胞全部下沉方可计数。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,计数室充液方法,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,4.计数：在高倍镜下计数，计红细胞计数室中的四角的及中央的一个总共是5个中方格的红细胞数，分别按照一定的顺序及压线的原则(数上不数下，数左不数右)来计数，五个中方格分别用：x1、x2、x3、x4、x5表示。总数用X表示。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,红细胞计数,其中一个中方格计数方法,兽医临床诊疗实验室检验课件,5.计算：每立方毫米血液中所含的红细胞总数用“R”表示R=（x1+x2+x3+x4+x5）510400=x20000各种动物正常数值见参考书（注意单位）,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,其中：x1x5为五个中方格的红细胞数5表示：红细胞室的面积为1平方mm,计数室有25个中方格，而计数时只数5个中方格的数目，要算成1平方mm要乘以510表示：计数室的深度为0.1mm，要算成1mm,所以要乘以10400表示：血液的稀释倍数,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项：1.所用的器材必须是清洁干燥的，否则就会影响结果2吸取液体的量一定要准确，过多或过少都会影其结果3使用显微镜一定要规范，将其平放4.充液时要将稀释液摇匀，量不可过多也不能太少，不能有气泡,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项：5寻找计数室时光圈要尽量关小，不要关死，否则在高倍镜下就看不到计数室6在计数时，不要把杂质和红细胞相混淆，否则就会影响结果7五个中方格一定要找准确，特别是中间的中方格的确定,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,临床意义:红细胞增多：红细胞和血红蛋白含量增多，绝大多数为相对增多，见于各种因素导致的脱水等。红细胞减少：红细胞和血红蛋白含量降低，主要是由于红细胞损失过多或生成不足所致，可见于各种贫血和失血、溶血、红细胞生成障碍等。,红细胞计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,白细胞计数,概念及实验原理实验目的实验所需的试剂实验器材实验的主要方法及步骤注意事项临床意义,兽医临床诊疗实验室检验课件,概念及实验原理,白细胞计数（whitebloodcellcount）指一定体积血液内所含的白细胞总数。白细胞计数是用1%3%冰醋酸或1%盐酸将血液中的红细胞破坏后，只保留白细胞并计数每微升血液中的白细胞数，再推算出每升血液中的白细胞数(109个/L)。,兽医临床诊疗实验室检验课件,白细胞计数,实验目的掌握白细胞计数方法，并能判断白细胞的形态了解它的临床意义实验所需的试剂1%3%冰醋酸或1%盐酸、蒸馏水、酒精、乙醚及动物血液等。实验器材显微镜、计数板、计数器、血盖片、小试管、0.5ml吸管、吸尔球、擦镜纸等,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验的主要方法及步骤(注意与红细胞区别),白细胞计数,血细胞计数室,右上角的一个白细胞计数室,兽医临床诊疗实验室检验课件,一个大方格内的白细胞数,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项(与红细胞计数相似),所用的器材必须是清洁干燥的，否则就会影响结果吸取液体的量一定要准确，过多或过少都会影其结果使用显微镜一定要规范，一定要平放,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项,寻找计数室时光圈一定要关到最小，太亮就会找不到计数室在计数时，不要把杂质和白细胞相混淆，否则就会影响结果四个大方格的白细胞数之间的误差不能超过20%,兽医临床诊疗实验室检验课件,诊断意义,白细胞总数增多：多数细菌感染性疾病，如链球菌、肺炎双球菌等，在严重的组织损伤，急性大出血，急性溶血，某些中毒（敌敌畏中毒、酸中毒及尿毒症等）以及注射异体蛋白（血清、疫苗）后，均可导致白细胞数目增多。白血病时，白细胞(病理性)数持久性、进行性增多，红细胞数目却明显下降。,兽医临床诊疗实验室检验课件,诊断意义,白细胞总数减少：某些病毒性疾病，如犬传染性肝炎、猫泛白细胞减少症、流行性感冒、马传染性贫血时，白细胞总数减少；伴有再生障碍性贫血的疾病时，白细胞总数减少；此外长期使用磺胺类及氯霉素类药物、X线照射，恶病质及各种疾病的濒死期等均会引起白细胞数减少。在治疗过程中，全身症状好转，白细胞减少时说明病情好转。如果病情没有好转，白细胞总数减少时说明机体已进入败血症期，病情恶化。,兽医临床诊疗实验室检验课件,白细胞分类计数概念实验目的实验所需的试剂实验器材实验步骤注意事项临床意义,实习：白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,概念白细胞分类计数（Differentialcountofwhitecell，简称DC）是指将血液制成薄片，染色后用油镜观察，求出各种白细胞所占百分比。即可计算出每mm3血液中各类白细胞的绝对值。白细胞分类计数对疾病的诊断、预后及疗效观察具有重要的意义,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验目的让同学们掌握血涂片的制作的方法和染色方法，并能够识别涂片制作的好坏并能识别各种白细胞。实验所需的试剂瑞氏染色液、缓冲液、蒸馏水、香柏油等实验器材载玻片、脱脂棉、玻璃铅笔、吸水纸、染色缸及染色架、试管架、显微镜、擦镜纸、分数计数器等,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验步骤（一）血涂片的制作：1、取两张载玻片，一张作为载片，选一张边缘比较光滑的玻片作为推片。2、将被检血液滴在载片的右端中间。3、右手持推片置于血滴前方，并轻轻向后移动推片，使之与血液接触，待血液扩散开后，再以3045角度向前均速推进涂抺，即形成一血膜。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,推片,兽医临床诊疗实验室检验课件,推片,兽医临床诊疗实验室检验课件,影响血膜厚薄长短的几个因素：血液的多少角度（指两玻片之间的锐角）的大小推片的速度,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,合格血涂片应具备：血液分布应均匀，厚度适宜，白细胞分类计数的血膜宜稍厚，进行红细胞形态及血液原虫检查的血片宜稍薄。边缘整齐，能明显分出头、体、尾三部分。对光观察呈霓虹色。血膜位于玻片中央，占玻片面积中间的2/3为最佳,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,血涂片,兽医临床诊疗实验室检验课件,实验步骤（二）血涂片的染色（瑞氏染色法）：1.待血膜干燥后在血膜的两端用玻璃铅笔划两条竖线。2.把玻片平放在染色架上，滴加瑞氏染液数滴（以盖满血膜为度）染色12min。3.加等量的缓冲液，用吸尔球吹匀，再染色35min4.用细小的流水冲洗，吸水纸吸干，待检。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,染色,兽医临床诊疗实验室检验课件,（三）镜检先用低倍镜找到图像，再用高倍镜观察血膜细胞上分布情况及染色质量等。再换用油镜进行观察计数。计数方法：通常在血片的两端或两端的上下部按二区或四区计数法有顺序地移动血片，分别记录各种白细胞数，最后计算出各种白细胞所占百分比。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,计数方法,兽医临床诊疗实验室检验课件,白细胞的分类及识别,白细胞,有粒白细胞,无粒白细胞,嗜酸性粒白细胞,嗜碱性粒白细胞,嗜中性粒白细胞,晚幼型,杆状核,分叶核,单核细胞,淋巴细胞,小淋巴细胞,大淋巴细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,绵羊血涂片1.嗜碱性粒细胞2.杆状核型嗜酸性粒细胞3.分叶型嗜酸性粒细胞4.晚幼型嗜中性粒细胞5.杆状核嗜中性粒细胞6.分叶型嗜中性细胞7.单核细胞8大淋巴细胞9.中淋巴细胞10.小淋巴细胞11.血小板12.红细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,猪血涂片1.嗜碱性粒细胞2.晚幼型嗜酸性粒细胞3.分叶型嗜酸性粒细胞4.晚幼型嗜中性粒细胞5.杆状核嗜中性粒细胞6.分叶型嗜中性细胞7.单核细胞8大淋巴细胞9.中淋巴细胞10.小淋巴细胞11.浆细胞12.血小板13.红细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,牛血涂片1.分叶型嗜碱性粒细胞2.杆状核型嗜酸性粒细胞3.分叶型嗜酸性粒细胞4.晚幼型嗜中性粒细胞5.杆状核嗜中性粒细胞6、7分叶型嗜中性细胞8.单核细胞9大淋巴细胞10.中淋巴细胞11.小淋巴细胞12.血小板13红细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,鸡血涂片1.嗜碱性粒细胞2.嗜酸性粒细胞3.嗜中性粒细胞4.淋巴细胞5.单核细胞6.红细胞7.血小板8.核的残余,兽医临床诊疗实验室检验课件,嗜碱性白细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,嗜酸性白细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,嗜中性白细胞,杆状核,分叶核,幼稚,兽医临床诊疗实验室检验课件,淋巴细胞,小淋巴细胞,大淋巴细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,中淋巴细胞,单核细胞,兽医临床诊疗实验室检验课件,血小板,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项：载玻片应事先处理干净。推制血片时用力要均匀，两张玻片不要压的太紧推片的边缘要平整光滑，否则血膜边缘不均匀且不整齐。画线是起到防止染色液外溢的作用，对染色效果没有影响。滴加瑞氏染液的量不宜太少。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项：冲洗时应将蒸馏水或清水直接向血膜上倾倒，使液体自血片边缘溢出，让沉淀物从液面浮去染色良好的血涂片应呈樱桃红色，若呈淡紫色，是染色时间过长造成的，若呈红色是染色时间过短造成的。染色液偏碱时血片呈烟灰色；偏酸时血片呈鲜红色。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,两个概念：核左移：分析嗜中性白细胞的增减变化时，杆状核和晚幼细胞增多，甚至出现髓细胞的比例增高，称为“核左移”。核右移：若分叶核细胞显著增多，并且细胞核分为45叶甚至多叶的比例较多者，则称为“核右移”，表示造血机能减退。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,临床意义：嗜中性白细胞增多：常见于各种急性感染性疾病、急性炎症及重症烧伤、创伤。嗜中性白细胞减少：由于骨髓造血机能受到抑制，对嗜中性白细胞的生成不足，最急性感染。常见于病毒性疾病及各种疾病的重危期（如中毒性休克、胃肠破裂等）。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,嗜酸性白细胞增多：见于某些寄生虫病（如肝片吸虫病、球虫病、旋毛虫病等），某些过敏性疾病（荨麻疹等）以及湿疹、疥癣等皮肤病。嗜酸性白细胞减少：见于某些疾病的重症期，也可见于应用皮质类固醇药物。嗜酸性白细胞长时间消失，表示预后不良，但消失后又重新出现则说明病情好转。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,淋巴细胞增多：见于某些慢性传染病（如结核病、布氏杆菌病等)、淋巴性白血病；急性传染病的恢复期、某些病毒性疾病（如流行性感冒等）及血孢子虫病等。淋巴细胞减少：当嗜中性白细胞绝对值增多时，伴随减少的常常是淋巴细胞。说明机体与病原处于斗争阶段，此后淋巴细胞由少逐渐增多，往往是预后良好的指征。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,单核细胞增多：原虫病（如锥虫病、梨形虫病等）、慢性细菌性疾病（如结核、布氏杆菌病等）以及病毒性疾病（如马传染性贫血）。单核细胞减少：急性传染病的初期和各种疾病的垂危期。嗜碱性白细胞的增多或减少：此种情况较少见，对其增多、减少的意义尚不是很清楚。诊断意义不是很大。,白细胞分类计数,兽医临床诊疗实验室检验课件,血小板计数,血小板计数概念原理实验目的器材与试剂操作方法注意事项临床意义,兽医临床诊疗实验室检验课件,概念,血小板是哺乳动物血液中的有形成分之一，它有质膜，没有细胞核结构，一般呈圆形或椭圆形棒状体，直径24m。猫的血小板较大，与红细胞大小相似。血小板具有特定的形态结构和生化组成，在正常血液中有较恒定的数量。血小板寿命约714d，每天约更新总量的1/10，衰老的血小板大多在脾脏中被清除。,兽医临床诊疗实验室检验课件,原理,尿素能溶解红细胞和白细胞而使血小板形态保持完整性，稀释液中的枸橼酸钠有防凝作用，甲醛可固定血小板的形态。血液经此稀释液稀释后，在血细胞计数室内直接计数，以求得每微升血液中的血小板数。,兽医临床诊疗实验室检验课件,器材与试剂,器材：血小板计数使用的器材与白细胞计数相同。试剂：常用复方尿素稀释液：尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛液0.1ml，加蒸馏水至100ml，此液在室温中可保存10d左右。稀释液中的枸橼酸钠有抗凝作用，甲醛可固定血小板的形态。,兽医临床诊疗实验室检验课件,操作方法,（一）稀释血液：取稀释液0.38ml（或0.4ml）置于小试管中，用血红蛋白吸管吸取血液20l，用脱脂棉擦去管外壁的血液后将其吹入盛有稀释液的试管底部，再吸吹数次，以洗出血红蛋白吸管内粘附的血液，混匀，静置15min左右，以使红细胞和白细胞溶解，然后再混匀。,兽医临床诊疗实验室检验课件,操作方法,（二）寻找计数室：方法同红白细胞计数一致。（三）充液：用毛细吸管或用玻棒蘸取稀释好的血液充入计数室内，静置15min左右（使血小板下沉）。（四）计数及计算：在高倍镜下计数一个大方格内的血小板总数，乘以200，或计数5个中方格（80个小方格）内的血小板数乘以1000，即得每微升血液中血小板个数。,兽医临床诊疗实验室检验课件,注意事项,所用的器材必须清洁干燥，稀释液必须新鲜无沉淀。所有的操作必须规范操作。采血要迅速，以防止血小板离体后破裂、聚集等造成误差。由于血小板体积小，质量轻，不易下沉，所以要静置一段时间，在夏季还应保持湿度。另外在计数时由于血小板体积小，常不在同一焦距上，要利用显微镜的细调节器来调节焦距，才能看清楚。,兽医临床诊疗实验室检验课件,诊断意义,1.血小板数增多：原发性血小板增多。见于原发性血小板增多症，是一种原因不明的出血性疾病。继发性血小板增多。多为暂时性的，见于急性、慢性出血，骨折，创伤，手术后；也可见于其他骨髓增生性疾病，如真性红细胞增多症；慢性粒细胞性白血病、肺炎、胸膜炎及传染性胸膜肺炎等。,兽医临床诊疗实验室检验课件,诊断意义,2.血小板数减少：血小板生成减少:见于穗状葡萄菌中毒病、某些真菌毒素中毒、某些蕨类植物中毒、马传染性贫血和急性白血病、败血性疾病等。血小板破坏过多:见于免疫性血小板减少性紫斑（同族免疫性、自体免疫性）、感染以及伴有弥散性血管内凝血过程的各种疾病。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿液检验,尿液样品的采集和保存尿液的物理性质检验：尿量、混浊度（透明度）、尿色、气味比重（密度）尿液的化学性质检验酸碱度测定（pH值）、蛋白质检验、尿中血液及血红蛋白的检验,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿液样品的采集和保存,尿样的采集：动物的尿液可通过排尿、压迫膀胱、导尿或膀胱穿刺等采集。通常最好在早上采取尿样，因为这通常是一天中尿样浓度最高的时候常用的防腐剂：甲醛、甲苯、硼酸、麝香草酚,兽医临床诊疗实验室检验课件,物理性质检查,尿量动物的尿量不仅与饲料、饮水、运动有关，而且与环境温度相关。当尿量增高到一定程度时便出现多尿。多尿可可分为生理性多尿和病理性多尿。混浊度（透明度）马尿混浊度增加或其他动物新鲜尿液呈混浊不透明者，均为异常现象。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿色检验,正常颜色：是由尿液中胆红素的浓度和尿量决定的，马尿呈黄色，牛尿呈淡黄色，猪尿呈水样无色，犬尿呈鲜黄色。异常颜色：黄尿红尿：1血尿2血红蛋白尿、肌红蛋白尿、药物性红尿乳白尿,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿色检验,黄尿：尿色变棕黄色或深黄色，多为饮水不足或脱水性疾病所致。当阻塞性黄疸或肝实质性黄疸时，尿中胆色素增加，此时尿液呈黄褐色或啤酒色，摇振时易起泡沫，其泡沫也被染为黄色。,兽医临床诊疗实验室检验课件,异常尿色检验-红尿,血尿浑浊而不透明，摇振时呈云雾状，放置后有沉淀，镜检可发现多量红细胞血红蛋白尿尿色褐红或呈酱油色，尿液透明、均匀，放置或离心后无沉淀，镜检无红细胞。肌红蛋白尿尿色为红褐色，可见于肌病、马肌红蛋白尿症及硒缺乏症。动物用药后也可出现红尿,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿色检验,乳白尿：泌尿道细菌感染引起的脓尿和菌尿。肾盂及尿路的化脓性炎症尿中含有脂肪而使尿液呈乳白色，镜检可观察到脂肪滴和脂肪管型，见于犬脂肪尿病。,兽医临床诊疗实验室检验课件,气味检验,尿液的气味正常略有有机芳香族气味。气味可较强。尿液存储较长时间后，因尿素分解而有氨臭味，见于膀胱炎、膀胱麻痹、膀胱括约肌痉挛、尿道阻塞等时；当发生膀胱或尿道溃疡、坏死、化脓或组织崩解时，由于蛋白质分解而尿液带腐臭味；羊妊娠毒血症、牛酮病、产后瘫痪等时，尿液有酮味，如同烂苹果样气味。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿比重测定,正常情况下，尿比重与肾脏排出的水分、盐类和尿素量有关。在病理情况下，尿比重还与糖、蛋白、细胞损伤程度、代谢、组织分解与合成情况等有关测定时应在15的室温中进行，因为尿比重计上的刻度是以尿温为15时而制定的，故当尿温高于15时，则每高3应于测定的数值中加0.001；温度每低3，则于测定的数值中减去0.001。如尿比重计标明是以20为标准制定的，亦应用同法修正测定的结果。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿液化学性质测定,酸碱性（PH值）检查尿的酸碱度常用广泛pH试纸法，将试纸浸入被检尿内后立即取出，根据试纸的颜色改变与标准色板比色，判定尿的pH。健康动物尿液的pH值为：马7.27.8，牛7.78.7，犊牛7.08.3，山羊8.08.5，羔羊6.46.8，猪6.57.8，犬6.07.0，猫6.07.0，兔7.68.8。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿的酸碱度测定,酸性尿液：生理性酸性尿液主要见于食肉、吃奶仔畜、过量饲喂蛋白质、饥饿和长时间运动等。病理性酸性尿液主要见于各种热性病、严重腹泻、呼吸性酸中毒、酸中毒（糖尿病、尿毒症），内服酸性盐类药物（如酸性磷酸盐、氯化铵等）碱性尿液：生理性碱性尿液见于草食动物。病理性碱性尿液主要见于膀胱炎和膀胱麻痹造成的尿潴留、碱中毒等，及使用碱性盐类药物（如碳酸氢钠、柠檬酸钠、乳酸钠等）。,兽医临床诊疗实验室检验课件,尿蛋白定性试验,健康动物尿中仅有微量蛋白质，一