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文档简介
.,1,第二节器皿用具,一、组培器皿(一)器皿的类型培养器皿分注器离心管刻度移液管细菌过滤器,.,2,1培养器皿,(1)概念培养器皿-指用于盛放培养基和接种培养材料的器皿。要求透光度好,能耐高压灭菌。(2)类型按材料分:玻璃培养器皿:优点是透光度好、容易清洗;缺点是容易破碎;塑料培养器皿:优点是不容易破碎、成本较低,但缺点是透光度较玻璃的差、遇火焰易被熔化。,.,3,按形状分试管特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用,在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培养时更显方便。有圆底的和平底的两种。三角瓶是植物组织培养中最常用的培养器皿,适合于各种培养,固体或液体、大规模或小规模都行。其优点是:采光好、瓶口较小不易失水和污染。L形管和T形管为专用的旋转式液体培养试管。培养皿适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。角形培养瓶和圆形培养瓶适于液体培养用。果酱瓶常用于试管苗大量繁殖,200ml-500ml规格,.,4,2分注器作用-分装培养基。分注器可以把配置好的培养基按一定量注入到培养器皿中。一般由4cm-6cm的大型滴管、漏斗、橡皮管及铁夹组成。还有量筒式的分注器,上有刻度,便于控制。微量分注还可采用注射器。,.,5,3离心管离心管用于离心,将培养的细胞或制备的原生质体从培养基中分离出来,并进行收集。,.,6,4刻度移液管在配制培养基时,生长调节物质和微量元素等溶液,用量很少,只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时,不同种类的生长调节物质,不能混淆,这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml等。,.,7,4刻度移液管在配制培养基时,生长调节物质和微量元素等溶液,用量很少,只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时,不同种类的生长调节物质,不能混淆,这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml等。,.,8,移液器,.,9,5细菌过滤器培养基中有些生长调节物质以及有机附加物质如吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)等,在高温条件下易被分解破坏,而用细菌过滤器(图17)既可除菌又可保持试剂的功效。可用金属制的蔡式漏斗,以石棉滤膜来除去细菌。在过滤少量的液体时,宜用醋酸纤维素和硝酸纤维素混合物制成的微孔滤膜,其孔径为0.45m。在过滤时需要一套减压吸滤设备(通常使用真空泵),漏斗下接吸滤瓶,吸嘴处接上一只内装脱脂棉的滤气玻璃管。,.,10,图17细菌过滤器灭菌装置,.,11,(二)器皿的清洗植物组织培养除了要对待培养的实验材料和接种用具进行严格消毒外,各种培养器皿也要求洗涤清洁,以防止带入一些有毒的或影响培养效果的化学物质或一些微生物等,对那些常用的玻璃器皿的清洁程度要求更为严格。,.,12,1洗涤剂清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤液(由重铬酸钾和浓硫酸混合而成)。配制铬酸洗涤液的注意事项:(1)在配制时重铬酸钾一定要冷却后才能加浓硫酸,且只能把浓硫酸缓慢加入重铬酸钾溶液中,决不能将重铬酸钾溶液或蒸馏水倒入浓硫酸中。(2)由于铬酸洗涤液具有极强的氧化能力和腐蚀作用,故不要用手直接接触洗涤液。,.,13,2洗涤方法使用前先用1%稀盐酸浸泡1夜,然后用肥皂水洗净,清水冲洗,最后用蒸馏水冲淋1遍,干后备用。已用过的玻璃器皿洗涤方法:去残渣水洗热肥皂水(或洗洁精)水洗蒸馏水冲洗1次。较脏的玻璃器皿的洗涤:洗衣粉或洗洁精刷洗几次并冲净浸入洗涤液中流水中冲洗蒸馏水冲洗。,.,14,已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿的洗涤:1210C高温高压蒸汽灭菌30min趁热倒去残渣清水中冲洗浸泡在浓的重铬酸钾洗涤液中2h后取出水洗数次蒸馏水冲淋1次。用过的吸管和滴管的清洗:洗涤液中浸泡2h以上取出在流水中冲洗半小时蒸馏水冲淋1次。,.,15,用过的载玻片和盖玻片的清洗:洗涤液中浸泡数小时水洗绸布擦干放在95%的洒精中备用。总之,要求洗净的玻璃器皿应透明发亮,内外壁水膜均匀,不持水珠。,.,16,二、器械用具组织培养所需要的器械用具,可选用医疗器械和微生物实验所用的器具。常用的器械用具如图18所示。镊子尖头镊子,适用于取植物组织和分离茎尖、叶片表皮等。长20cm-25cm的枪形镊子,可用于接种和转移植物材料。剪刀常用的有解剖剪和弯头剪,一般在转移植株时用。解剖刀常用的解剖刀,有长柄和短柄两种。刀片也有双面及单面之分,可以经常更换。对大型材料如块茎、块根等就需用大型解剖刀。,.,17,4.显微接种工具包括接种针、接种钩及接种铲,由白金丝或镍丝制成,用来接种花药或转移植物组织。5.钻孔器取肉质茎、块茎、镜肉质根内部的组织时使用。钻孔器一般做成T形,口径有各种规格6.其它燃烧工具用的酒精灯、用于熔解培养基的带有磁搅拌器
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