分子生物课件题目.doc

一名词解释：（每题4分，共24分）1、基因家族2、mRNA选择性剪接3、RNA干涉技术4、基因定点诱变5、错义突变6、转基因技术二填空题（请将正确答案填在横线上，每空1分，共25分）1、原癌基因可通过_、_、_、_机制激活。获得启动子、增强子；基因易位；原癌基因扩增；点突变2、基因突变可引起遗传密码的改变，根据基因突变产生的遗传效应不同可分为：_、_、_、_人类基因组遗传标记有_、_、_。4、基因是负责编码RNA或_所必需的全部核酸序列。它包括_、_、_三部分序列。5、基因治疗的基本策略有：_、_、_、_、_。6、PCR-SSCP分析是一种基于单链DNA构象差别的快速、敏感、有效地检测DNA_和_的方法。7、_明显扩大了“自杀基因”的杀伤作用，大大放宽了对基因转移效率的限制，对于“自杀基因”分子化疗的发展具有重要意义。8、基因诊断的主要技术有_、_、DNA序列测定、DNA芯片技术。三.单项选择题(请在括号内填写正确答案,每题1分,共15分.)1、原核生物与真核生物基因组比较，以下哪项是原核生物的特点：（）A.基因密度高B.无操纵子结构C.有多基因家族和假基因D.多复制起点2、在真核基因表达调控中，能促进转录的速率。（）A.操纵子B.增强子C.沉默子D. TATAbox3、基因编码序列中中丢失7个核苷酸产生的突变属于：（）A错义突变B移码突变C无义突变D融合突变4、适合制备单链DNA的载体是：（）A.粘性质粒B.M13噬菌体C.逆转录病毒D.腺病毒5、将特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，矫正原有的缺陷基因是：（）A.基因置换B.基因添加C.基因干预D.基因修饰6、逆转录病毒前病毒的结构具有的特点不包括：（）A.有长末端重复序列LTRB.由U3、R和U5三部分组成C.病毒有四个结构基因DLTR中含有增强子、启动子及3加PolyA信号7、可用于分析基因转录水平的变化的是（）A.RT-PCRB. PCR-SSCPC. Southern blotD.DNA测序8、反式作用因子的激活方式不包括：（）A、表达式调节B.共价修饰C. DNA成环D.蛋白质相互作用9、反义RNA是指能与以下哪项互补配对的RNA分子：（）A. cDNAB.编码链DNAC.反义链的DNAD. mRNA10、在基因治疗中常用的抑制基因表达的技术不包括：（）A.反义RNAB.RNAiC.双链DNAD.核酶11、在大肠杆菌中表达真核细胞的目的基因时，下列描述正确的是：（）A.目的基因必须是cDNAB.目的基因必须是基因组DNAC.目的基因必须是mRNAD.必须保留目的基因5端非编码区12、以下哪项不是真核细胞转染的方法：（）A磷酸钙沉淀法B电穿孔法C脂质体介导法D氯化钙转化法13、以下哪项不是基因诊断的特点（）A.高灵敏度B.结果稳定C.早期诊断D.依赖表型改变14、真核生物基因组与原核生物基因组比较，真核生物基因组具有:（）A.多顺反子结构B.衰减子C.基因是连续的D.大量的重复序列15、Southern杂交的原理是根据基因序列合成探针，利用同源互补序列可以退火形成：（）A.杂交双链DNAB.杂交三链DNAC.杂交双链DNA-RNAD.杂交双链RNA四.问答题(五题,共36分。)1、简述转座作用的遗传学效应（4分）2、简述真核生物基因组结构与功能特点（6分）3、比较原核表达系统与真核表达系统各自优缺点（8分）4、基因点突变的基因诊断方法及原理（不少于四种方法）（8分）5、色氨酸操纵子结构与调控机制（10分）一、名词解释：1、基因家族：是指核苷酸序列或编码产物具有一定程度同源性的一组基因.2、mRNA的选择剪接：是指真核细胞基因表达所转录出的前体mRNA的剪接过程中，参加拼接的外显子可以不按其在基因组的线性分布次序拼接，内含子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟的mRNA中是可以选择的。这种剪接称mRNA选择剪接。3、RNA干涉技术是指由短的双链RNA诱导的同源RNA降解的过程，可使基因的表达受到抑制。它是在基因的转录后水平抑制基因表达的一种研究基因功能的方法。4、基因定点诱变：指将基因的某一个或某些位点进行人工替换或删除的过程,称为基因定点诱变.5、错义突变：指DNA分子中碱基的取代，经转录产生的mRNA后，相应密码子发生改变，编码另一种氨基酸，使蛋白质中的氨基酸组成和排列顺序发生改变。转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞或胚胎干细胞中，通过外源基因与细胞染色体DNA之间随机重组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA上的过程。二填空题：每空1分，共25分1、2、同义突变；错义突变；无义突变；移码突变3、限制性片段长度多态性；微卫星序列；单核苷酸多态性4、一条多肽链；编码序列；两侧的侧翼序列；插入序列5、基因添加（增补）； 基因干预； 基因置换 ；导入自杀基因；基因修饰6、点突变；DNA多态性7、旁观者效应8、核酸分子杂交；PCR技术三.单项选择题(每题1分,共15分.)1-5（ABBBA）6-10（CACDC）11-15（ADDDA）四、问答题一、简述转座作用的遗传学效应（4分）1、转座引起插入突变（1分）当插入序列或转座子插入某个基因的操纵序列前时，可引起操纵子后的结构基因表达失活。2、转座可产生新基因（1分）如果转座子上带有某些抗药性基因，它一方面会造成靶位点DNA突变，同时会使该位点产生抗药性。3、转座可出现染色体畸变发生（1分）当转座发生在宿主DNA原有位点时，往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA的缺失或倒位。4、转座可以引起生物进化（1分）由于转座作用，使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起，构建成一个操纵子或表达单元，也可能产生上些具有新的生物学功能的基因和新的蛋白质分子。二、真核生物基因组结构与功能特点（6分）：每点1分1、每一种真核生物都有一定的染色体数目，除了配子为单倍体外，体细胞一般为双倍体。而原核生物为单倍体。2、真核基因组远远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数多。具有多个复制起始点。3、真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于核内。4、真核生物中含有大量的重复序列。5、真核生物基因组内非编码序列占90%以上。基因组中非编码序列所占比例是真核生物与细菌、病毒的重要区别，且在一定程度上也是生物进化的标尺。6、真核基因是断裂基因，即编码序列被非编码序列分隔开。比较原核表达系统与真核表达系统各自优缺点（8分）（2分）1遗传背景清楚，易于遗传操作；2蛋白表达水平高; 3生长快,培养条件要求较低;原核系统缺陷：（2分）没有真核转录后加工的功能，不能进行mRNA的剪接，所以只能表达cDNA而不能表达真核的基因组基因；没有真核翻译后加工的功能，表达产生的蛋白质，不能进行糖基化、磷酸化等修饰，难以形成正确的二硫键配对和空间构像折叠，因而产生的蛋白质常没有足够的生物学活性；表达的蛋白质经常是不溶的，会在细菌内聚集成包涵体（inclusiion body），尤其当表达目的蛋白量超过细菌体总蛋白量10%时，就很容易形成包涵体。利用真核细胞作宿主表达系统的优点是：（2分）真核细胞能够识别和除去外源基因中的内含子，剪接加工形成成熟的mRNA。真核细胞将表达的蛋白糖基化，而大肠杆菌表达的蛋白是没有糖基化的，糖基化对某些表达蛋白的免疫原性影响很大。真核细胞作宿主表达系统尚存在以下几个问题：（2分）选择标记及选择系统只有少数几个；转化效率低，一般只有10-610-4；外源基因转移并整合到细胞染色体DNA上带有一定的自发性和盲目性，整合的拷贝数和位置都还不能控制；细胞培养及细胞的挑选要求比较高，手续繁琐费时。此外，细胞大量培养还有不少问题，而且成本较高，利用培养细胞方式大量生产某些表达蛋白，从工艺到成本都要很好地考虑。基因点突变的基因诊断方法及原理（不少于四种方法）（8分）：每点2分采用PCR产物的限制性片段长度多态性分析PCRRFLP就是利用PCR技术先将包含待测位点的DNA片段扩增出来，然后用识别该位点的限制性内切酶水解，根据限制性片段数量和长度作出诊断。采用PCR结合等位基因特异性寡核苷酸探针杂交技术针对已知突变位点的基因，可以分别针对已知突变位点的序列，设计一对寡核苷酸探针，其中一条为野生型探针，与无突变序列互补，另一个为突变型探针，与突变序列互补。同时设计探针时，突变碱基应位于探针的中央，这样在严格控制杂交和洗脱条件下，只有完全互补的探针保留下来，形成稳定杂交分子，而中央碱基与靶序列不匹配的探针则被洗脱。PCR产物的反相点杂交分析技术此项技术与PCR/ASO技术原理完全相同，只是杂交时采用的是反相杂交。是将探针固定在膜上成为固定相，用PCR产物作为液体相，进行杂交实验。采用PCR产物的单链构象多态性分析进行基因诊断PCR-SSCP技术就是利用PCR扩增目的基因片段，通过变性成为单链，然后进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，单个核苷酸的改变会造成DNA片段构象的改变，其迁移率也会改变，从而检测基因的突变。5、采用PCR结合变性梯度凝胶电泳技术该技术是先制备浓度从低到高的变性剂的凝胶，然后将待测分析的PCR扩增产物进行电泳，到DNA电泳到变性剂浓度能使DNA发生变性的位置时，DNA双链分开，由于不同DNA片段的碱基组成不同，因此在凝胶中泳动发生变性的位置不同，迁移率也不同，因此可以将相同长度但碱基组成不同的DNA片段分开，从而能检测出基因的突变。色氨酸操纵子结构与调控机制（10分）1、色氨酸操纵子（trpoperon）结构特点（4）E.coli的色氨酸操纵子有五个结构基因E、D、C、B、A基因编码三