灵芝抗氧化活性测定.doc

长春科技学院 灵芝、知母抗氧化活性测定（DPPH法） 学院编号： 0801学 号：0801100206长 春 科 技 学 院 学 士 学 位 论 文 灵芝抗氧化活性测定（DPPH法）姓 名：刘丹学 院：生物食品学院专 业：中药学班 级：2010级（2）班指导教师：张晶教授 2014年5月 灵芝抗氧化活性测定（DPPH法）摘要 目的：研究灵芝、知母提取物的体外抗氧化活性。方法：取灵芝的药材打碎，选用一定量的70%乙醇提取三次，提取时间为30分钟每次。过滤，合并滤液，用石油醚和正丁醇进行萃取，把萃取后得到的药材醇相、水相挥干，即得到样品。分别用适量甲醇溶解。利用二苯代苦味酰肼自利用二苯代苦味酰肼法（DPPH）测定其抗氧化活性。结果：灵芝水相和灵芝醇相都具有较强的抗氧化能力，但灵芝水相坑氧化能力较好但灵芝水相抗氧化能力较好。【关键词】灵芝 抗氧化活性 DPPHDetermination ofantioxidant activityof Ganoderma lucidum,Anemarrhena asphodeloides Bge(DPPH method）Abstract Objective: to study the ganoderma lucidum, the in vitro antioxidant activity of extracts from anemarrhena asphodeloides bge. Method: take herbs ganoderma lucidum, rhizoma anemarrhenae, broken, choose three times in a certain amount of 70% ethanol extraction, extraction time for 30 minutes each time. Filtering, merging the filtrate, with petroleum ether and n-butyl alcohol extraction, the extraction of medicinal alcohol after phase, water phase and dry, or get the samples. With a moderate amount of methanol solution, and constant volume to the volumetric flask. Using diphenyl generation bitter hydrazide (DPPH) determination of its antioxidant activity. Results: the ganoderma lucidum and ganoderma lucidum alcohol phase water has strong antioxidant capacity, but the ganoderma lucidum pit water phase oxidation ability is good. 【keywords】Ganoderma lucidum rhizoma anemarrhenae, antioxidant activity and DPPH目 录 引 言41 仪器试剂71.1材料71.2 仪器71.3试剂82. 实验方法8 2.1 药材的总提取8 2.2对照品溶液的制备8 2.4供试品溶液的制备82.4 DPPH溶液的配制82.5测定波长的选择92.6样品测定93 实验结果94 讨论10致谢11参考文献12英文原文22 引 言1、 灵芝概述 灵芝Ganoderma lucidum（Leys.ex Fr.) Karst 为多孔菌科 (polyproraceae)、灵芝属(Ganoderma) 真菌植物，在中华人民共和国药典上收入作为药材灵芝来源的是赤芝Ganoderma lucidum（Leys.ex Fr.) Karst或紫芝Ganoderma japonicum (Fr.) Lloyd的干燥子实体1 灵芝性温、味甘，有补中益气、滋外强壮、扶正固本之功效，主治虚劳、咳嗽、气喘、失眠、消化不良2。在神农本草经中列为上品，谓其“久味苦平，主治胸中结，益心气，补中，增智慧，不忘，久服轻身不老”。临床上用于治疗慢性气管炎、支气管哮喘、白细胞减少症、冠心病、心律失常、急性传染性肝炎等疾病。多分布于云、贵、冀、吉、苏、浙、闽等省。李时珍在本草纲目中对灵芝药性和功效作了详细的记述：“赤芝，苦平无毒，主治胸中结、益心气、补中、增智慧，不忘；紫芝，甘温无毒、好颜色，治虚劳，治痔”。 灵芝的药理作用还具有抗氧化与抗衰老作的作用，灵芝能提高机体超氧化物歧化酶的活性，消除体内自由基，保护细胞膜、细胞器、核酸、酶等具生物活性部分不受自由基破坏；提高细胞合成DNA、RNA及蛋白质的能力：降低血糖和血脂水平，降低血压；提高血液供氧能力，降低血液耗氧量；提高机体的生命力和抗逆能力3,4。 2、灵芝的主要成分研究 灵芝所含化学成分复杂，目前已知的有糖类(还原糖和多糖)、氨基酸、蛋白质、多肽、甾类、三萜类、挥发油、香豆精苷、生物碱、树脂、油脂、多种酶类、微量元素等，其中多糖和三萜两大类活性物质被认为是主要药效成分5,6。 现代药理学研究证明灵芝多糖具有抗肿瘤，保肝解毒，抗过敏，消炎抑菌，降血糖，抗氧化与衰老的作用。在临床上还具有治疗肿瘤，治疗病毒性肝炎以及治疗冠心病心绞痛及高血脂症等作用。 灵芝子实体中主要含有三萜类(包括多种灵芝酸类化合物)、多糖及蛋白质等活性成分7,8,9 ，其中多糖和三萜两大类活性物质被认为是主要药效成分，其含量可作为衡量栽培和野生灵芝质量的标准。灵芝多糖对链脲霉素诱发的高血糖小鼠，可明显刺激胰岛素分泌，降低小鼠血糖水平10。灵芝多糖对卡介苗诱发的小鼠肝损伤、顺铂诱发的肾损伤及四氧嘧啶诱发的胰腺小岛损伤均有保护作用11。此外，灵芝的热水浸膏能减少DNA的断裂，有较强的抗辐射、抗氧化和减少由诱变剂引发细胞损伤的能力，将灵芝多糖提取出来后灵芝的以上能力几乎没有损失12。灵芝水煎剂能起到抗氧化作用，提高机体免疫能力13。一些初步研究指出，灵芝热水提取物，灵芝多糖均具有清除自由基活性，根据衰老的自由基产生学说，认为自由基的增多是衰老的重要原因，故灵芝的清除自由基作用亦可能参与其抗衰老作用。从灵芝中提取的灵芝多糖肽(GLPP)可以减少人血清低密度脂蛋白的氧化修饰，降低血清和心肌匀浆的丙二醛含量，提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性，降低超氧化物歧化酶活性，但对过氧化氢酶活性无显著影响，证明GLPP具有体内和体外的抗氧化作用，其抗氧化活性可能与其清除氧自由基或提高GSHPx水平的作用有关14。HuiNa Zhang等人的研究发现，灵芝多糖在体内、体外条件下对四氧嘧啶诱导的胰岛损伤均有一定程度的保护作用，而该作用可能与其抗氧化活性相关15。 现代药理研究表明，灵芝多糖具有显著的提高免疫力抗肿瘤功效、清除自由基抗衰老等活性，三萜类具有保肝、辅助降血压、抗组胺、抗HIV等活性，蛋白质类具有促进淋巴细胞增殖调节免疫等活性16,17。1 仪器试剂1.1材料 灵芝：购自于长春，经长春科技学院郑张晶教授鉴定为灵芝Ganoderma lucidum（Leys.ex Fr.) Karst，分别粉碎，待测。1.2 仪器 电热恒温水浴锅 北京市水电明医疗仪器厂 旋转蒸发仪器RE-52AA 上海亚荣生化仪器厂 倾斜式高速万能粉碎机FW400A 北京中兴伟业仪器有限公司 循环水式真空泵SHZD()型 河南省予华仪器有限公司 数显恒温水浴锅 DFS KW-1000D 上海梅香仪器有限公司 紫外可见分光光度计TV-1810 北京普析通用仪器有限责任有限公司 DT系列电子天平DT1002 江苏省常熟市意欧仪器仪表有限公司 超声波清洗机SB2512DT 宁波市新芝生物科技股份有限公司1.3试剂 无水乙醇、95%乙醇、正丁醇、甲醇、石油醚（30-600C）：均为分析纯，天津市光复科技发展有限公司。DPPH粉末;北京诺博莱德科技有限公司。2. 实验方法 2.1 药材的总提取2.1.1灵芝样品制备用搅拌机把灵芝和知母打成粉末， 取50克灵芝粉末于烧杯中，用70%乙醇40超声提取3次，每次30min，70%乙醇加入量分别为：400mL，200ml, 200mL 。合并3次滤液。减压浓缩，挥去乙醇，将浓缩液用石油醚脱脂3次后，用正丁醇各萃取3次，分别将正丁醇相及水相浓缩至干，得醇提取物0.7g及水提取物0.65g。 2.2对照品溶液的制备2ml 30%的乙醇溶液加2mldpph溶液混合后，摇匀，作为对照片。 2.3供试品溶液的制备分别取50克灵芝粉末，于三角烧瓶中加入300mL甲醇，冷浸过夜，超声提取条件为温度35，频率70Hz超声提取 4 次，每次30min，常压过滤，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用甲醇定容至100 mL容量瓶中，然后从中吸取1mL、2mL、4mL、8mL定容至10mL容量瓶中配制成样品溶液待用。2.4 DPPH溶液的配制 取0.0128gDPPH粉末用无水乙醇定容到50ml容量瓶中，然后再容量瓶中用5ml移液管精密取出10ml液体，定容到100ml容量瓶中，得到DPPH贮备液 ，摇匀放置冰箱中冷藏，避光并且实验之前现配，久置则变色。2.5测定波长的选择 将样品溶液在200700nm波长范围进行扫描，其最大吸收波长值为517nm。 2.6样品测定 用移液管准确移取2 mL乙醇溶液于试管中，再向其中加入2 mL的DPPH避光暗处反应30min后，转移至比色皿中测吸光度值为A。用移液管准确移取2 mL样品液于试管中，再向其中加入2 mL的DPPH避光暗处反应30min后，转移至比色皿中测吸光度值为B。用移液管准确移取2 mL样品液于试管中，再向其中加入2 mL的无水乙醇静置30 min后测量吸光度即为C。 根据抗氧化能力公式SA%=A-(B-C）A 100% 计算样品的抗氧化率。第3章 实验结果由表1可知，灵芝水相的抗氧化率的活性强于灵芝醇相的抗氧化率，并且随着浓度的增加清除率增加。 表1 供试品抗氧化率的测定结果样品液1ml样品液的清除率1ml样品液的抗氧化率2ml样品液的抗氧化率4ml样品液的抗氧化率8ml样品液的抗氧化率浓度灵芝醇相10%15%26%50%灵芝水相17%23%38%84%第4章 讨论灵芝水相和灵芝醇相都具有较强的抗氧化能力，但灵芝水相坑氧化能力较好。这次试验的结果有些偏大，原因有以下几点：1、选择药材过少，开始选择了10克药材，虽然后来改成了50克，但是看其结果还是药材放少了。2、液体旋干的时候水相有一部分粘在圆底烧瓶的瓶壁上，溶解不下来，造成了供试品的损失。3、配制DPPH液体时应该现做现配溶液，避光反应30分钟，没有严格执行。4、测吸光度时比色皿擦洗不净。 致谢 在此首先要感谢张晶教授以及所有重要专业的老师们的谆谆教诲和悉心指导，才会有今天的论文。在本次实验中，从实验器材到设备选用，到材料的选购，以及在整个实验过程中感谢老师们提供的帮助。在论文的完成过程中，感谢张晶教授在文章的专业知识及语言措辞方面的帮助，使我懂得如何更加完善的去呈现专业知识，在论文中体现专业素养。同时也要感谢这四年来，中药专业的老师以及同学们在学习和生活中的关心和帮助，使得我的专业知识日益提高，同时教会我如何为人处事，使我在以后的道路上走得更加宽阔，更加稳健。总之，大学四年因为有你们风雨兼程的陪伴，我才能够取得学业上的成功。在这里，我要由衷说一句：“老师！您们辛苦了！”最后，祝所有老师身体健康，万事如意，工作顺利！也祝长春科技学院越来越美丽！参考文献1国家药典委员会中华人民共和国药典2000年版一部.化学工业出版社：2962江苏新医学院中药大辞典1985年第版上海科学技术出版社：1180-11823范春玲，王依群，等灵芝对肛半乳搪亚急性损伤的预肪作用中药药理与临床，1998,14(1)：304邵红霞，郑有顺，朱全红等灵芝复方抗氧化作用的实验研究中药药理与临床，1996，12(6)：33 5郑虎占，董泽宏中药现代研究与应用IM北京：学苑出版社，1997：24962499 6Shiao MSNatural products of the medicinal fungus Ganoderma lucidum：occurrence，biological activities，and pharmacological function J.Chem Rec,2003,3(3)；172180 7 国家中医药管理局中华本草M上海：上海科学技术出版社，1999：2348 Bojana Boh， Marin Berovic， Jingsong zhang， et a1Ganoderma lucidum and is pharmaceutically active compounds J Biotechnology Annual，2007(13) : 265 9 陈若芸，于德泉灵芝三萜化学成分研究进展J药学学报，1990，25(12)：94010罗少洪，杨红灵芝多糖调节血糖作用的实验研究J广东药学院学报，2000，16(2)：11912011Zhang HN，He JH，Yuan L，et a1In vitro and in vivo protective effect of Ganoderma Lucidum polysaccharides on alloxan-induced pancreatic islet damageJLifesc 2003，73(18)：2307231912Boh B，Berovic M，Zhang J，Zhi-Bin L Ganoderma lucidum and its pharmaceutically active compoundsJBiotechnol Anna Rev2007，13：265301 13王英灵芝水煎剂对老年大鼠NO、Gs卜Px、LIP以及免疫功能影响的实验研究J牡丹江医学院学报，2003，24(5)：6814游育红，林志彬灵芝多糖肽的抗氧化作用J药学学报，2003，3B 12)：85 15 Zhang HuiNaZhang，JingHuaHc，LanYuan，et a1In vitro and in vivo protective effect of Ganoderma lucidum polysaccharides on alloxanindced pancreatic islets damage JLife Sciences,2003，73(18)：2307 16 叶波平，王庆华，周书进，等灵芝蛋白质的分离及其免疫活性研究J药物生物技术，2002，9(3)：15017 陈勇，曾萍，温庆伟，等灵芝配方颗粒中麦角甾醇的含量测定J中国实验方剂学杂志，2010， 18 国家药典委员会中华人民共和国药典(2005年版一部)M北京：化学工业出版社，2005：14819崔岚，安富荣，王平全知母宁的药理作用J中药材，2000，23(2)：112-114.Cui lan，An Furong,Wang PingquanJournd of Chinese Medicinal Materials，2000，23(2)：1 12-1 1420 Pardo-Andreu GL，Dorta DJ，Delgado R，et a1Vimang(Mangiferaindica L extract) induces permeability transition in isolated mitochondria，closely re roducing the effect of mangiferin，Vimangsmain componentJChem Biol Interact，2006，159(2)：14121廖洪利，吴秋业，叶光明，等芒果苷药理研究进展J天津药学，2005，17(2)：5022 柳爱莲 ，刘绣华天然产物抗 D P P H 自由基活性研究 J .周1 ：3师范学院学报，2 0 0 7 ，2 4( 5 )：8 0 8 2 23彭长连, 陈少薇, 林植芳, 等. 用清除有机自由基DPPH法评价植抗氧化 J. 生物化学与生物物理进展, 2000, 27(6):658-661.英文翻译 English translation灵芝有效成分生物活性作用的研究进展Research Progress on biological activity of the active ingredients of Ganoderma lucidum摘要：灵芝作为我国的药用珍品具有悠久的使用历史，灵芝所含化学成分复杂，其中多糖和三萜两大类活性物质被认为是主要药效成分，具有广泛的生物学活性。本文就近年来对灵芝主要有效成分的生物学活性研究作一综述，为进一步对灵芝进行深入研究打下基础。Abstract: Ganoderma lucidum as medicinal treasures of China with a long history of use, Ganoderma Lucidum with complex chemical composition, the polysaccharide and three terpene two kinds of active material is considered to be the main active component, has a wide range of biological activity. This paper is a review of research on biological activity of the main effective component of Ganoderma lucidum. In recent years, to lay the foundation for further study of Ganoderma lucidum.关键词：灵芝；多糖；三萜；生物活性Keywords: Ganoderma lucidum; polysaccharide; three terpene; biological activity灵芝(Ganoderma lueidum)，属于担子菌类多孔菌科赤芝或紫芝的干燥子实体，是一种大型真菌。以灵芝之名闻名的这种树生真菌在中国和日本被当做一种半神化的治疗药草，其比人参更受尊崇，且具有很长的使用历史。中医角度认为灵芝通过扶正固本使人体处于平衡状态。从西医学的眼光看是起了生物反应调节剂(BRM)的作用。Ganoderma lucidum (Ganoderma lueidum), belonging to the Basidiomycetes Polyporaceae or Ganoderma sporophore of Ganoderma lucidum drying, is a major fungal. This tree is known as the name of the Ganoderma lucidum fungus is used as a semi deification in Chinese and Japan for the treatment of herbs, the respected more than ginseng, and has a long history of use. Chinese medicine point of view of Ganoderma lucidum by Fuzheng Guben make the body in a state of balance. Is a biological response modifier from western medicine perspective (BRM) function.1灵芝活性成分1 active components of glossy ganoderma灵芝所含化学成分复杂，目前已知的有糖类(还原糖和多糖)、氨基酸、蛋白质、多肽、甾类、三萜类、挥发油、香豆精苷、生物碱、树脂、油脂、多种酶类、微量元素等，其中多糖和三萜两大类活性物质被认为是主要药效成分。Ganoderma lucidum contained in the chemical composition of complex, now known to have carbohydrates (sugar and polysaccharide, amino acid, protein, polypeptide), steroids, three terpenes, volatile oil, coumarin glycosides, alkaloids, resins, oils, enzymes, trace elements, including polysaccharides and three terpene two categories of activity the material is considered to be the main efficacy components.2灵芝多糖的生物活性研究Study on the biological activity of 2 ganoderma polysaccharide灵芝多糖是从灵芝中提取的一种新内源活性物质，其所含的化学成分能够显著提高吞噬细胞的吞噬能力，增强体液免疫和细胞免疫功能，还能提高红细胞中超氧化物歧化酶活性，对人体具有多种功能，近年逐步得到验证，具体表现如下：The Ganoderma lucidum polysaccharide is a kind of new endogenous active substances extracted from Ganoderma lucidum, contains chemicals that can significantly improve the phagocytosis of phagocytic cells, enhance the humoral and cellular immune function, can increase the red blood cell superoxide dismutase activity, with a variety of functions to the human body, in recent years has been verified, the details are as follows:21免疫调节作用Regulation of 2.1 immune灵芝多糖是一种生物免疫调节剂，能增强机体的细胞免疫与体液免疫，表现在：(1)刺激腹腔巨噬细胞释放并增强其吞噬功能34。(2)刺激B细胞产生抗体，灵芝菌丝体多糖GLB7在215mg/kg时可使小鼠抗体生成细胞数提高183倍。(3)刺激大量细胞因子产生，促进T细胞活化增殖。(4)对混合淋巴细胞培养(MLC)的促进作用，同时增强刀豆球蛋白或细菌脂多糖诱导的淋巴细胞增殖，并拮抗环孢素A、丝裂霉素C或足叶乙苷(VP-16)对MIX：反应的抑制作用。灵芝多糖还可拮抗60Co辐射引起的小鼠白细胞下降及胸腺缩小。The Ganoderma lucidum polysaccharide is a biological response modifier, can enhance the performance in the cellular immunity and humoral immunity, the body: (1) to stimulate the release of peritoneal macrophages and enhance the phagocytic function of 34. (2) stimulate B cells to produce antibodies, Ganoderma lucidum mycelium polysaccharide GLB7 increased the number of antibody producing cells increased 1.83 times in 2.15mg/kg. (3) stimulate massive cytokine production, promote the proliferation and activation of T cells. (4) for mixed lymphocyte culture (MLC) role, while enhancing the ConA or LPS induced lymphocyte proliferation, and ciclosporin A, mitomycin C or foot Ye Yigan (VP-16) on MIX: the inhibition reaction. Ganoderma lucidum polysaccharide can reduce the decrease of white blood cells and thymus of mice induced 60Co radiation.22抗肿瘤活性2.2 anti tumor activity张群豪等给Balbc小鼠皮下接种S-180肉瘤后，灌胃灵芝提取物(GLE)5、10、20g(生药)kg，共10d，可显著抑制S-180肉瘤生长，其抑瘤率分别为2277、4158和6089。林志彬以同样的方法给予灵芝多糖灌胃，从而观察其抑瘤率如何，结果发现抑瘤率与给予GLE的结果相近，甚至有一定提高。GLP与环磷酰胺(Cyclophosphamide，Cy)并用还能增强后者的抗肿瘤作用。由此证明，灵芝具有抗肿瘤作用。灵芝的这种抗肿瘤机制，主要是含有高分子多糖体，可显著增加抗体，诱导血液单核细胞分泌细胞因子，如肿瘤坏死因子、干扰素、白细胞介素与造血因子的产生，增强自然杀伤细胞的活性，增强吞噬细胞的吞噬作用，从而达到增强宿主免疫功能，抑制不正常的肿瘤细胞的分裂并诱导其分化完全。此外，有学者利用比较法发现灵芝的不同部位提取出来的灵芝多糖的抗肿瘤活性也不相同。Zhang Qunhao to the Balb / c mice were inoculated with S-180 sarcoma, intragastric administration of Ganoderma lucidum extract (GLE) of 5, 10, 20g (crude drug) / kg, 10d, could significantly inhibit the growth of S-180 sarcoma, the tumor inhibition rates were 22.77%, 41.58% and 60.89%. Lin Zhibin in the same way given Ganoderma lucidum polysaccharide orally, to observe the inhibition rate of tumor showed how, the tumor inhibition rate was similar with the GLE results, even have improved. GLP and cyclophosphamide (Cyclophos, phamide, Cy) and enhance the antitumor effect of the latter can still. Hence, Ganoderma lucidum has anti-tumor effect. The antitumor mechanism of Ganoderma lucidum, mainly polysaccharides containing polymer, can significantly increase antibody, cytokine secretion of peripheral blood mononuclear cells, such as tumor necrosis factor, interferon, interleukin and hematopoietic cytokine production, enhances the activity of natural killer cells, enhance the phagocytic phagocytosis, so as to enhance host immune function, inhibit abnormal cell division and differentiation of completely. In addition, some scholars found that Ganoderma Polysaccharides in different parts of Ganoderma lucidum extract antitumor activity is not the same with the comparative method.23降血糖、护肝，抗氧化及抗辐射2.3 blood glucose, liver, antioxidant and anti radiation灵芝多糖对链脲霉素诱发的高血糖小鼠，可明显刺激胰岛素分泌，降低小鼠血糖水平。灵芝多糖对卡介苗诱发的小鼠肝损伤、顺铂诱发的肾损伤及四氧嘧啶诱发的胰腺小岛损伤均有保护作用。此外，灵芝的热水浸膏能减少DNA的断裂，有较强的抗辐射、抗氧化和减少由诱变剂引发细胞损伤的能力，将灵芝多糖提取出来后灵芝的以上能力几乎没有损失。Hyperglycemia mice of Ganoderma lucidum polysaccharides on streptozotocin induced, can obviously stimulate insulin secretion, reduce blood glucose levels in mice. Renal injury of Ganoderma lucidum polysaccharides on BCG induced liver injury in mice induced by cisplatin, and four alloxan induced pancreatic islets damage has a significant protective effect. In addition, fracture of hot water extract of Ganoderma can reduce the DNA, has the strong anti radiation, anti-oxidation and decrease the ability of cell damage caused by mutagens, the extraction of Ganoderma lucidum polysaccharides from Ganoderma lucidum above ability after almost no loss.24心血管系统2.4 cardiovascular system灵芝多糖具有缩短小鼠血栓长度，减轻血栓重量的作用。此外灵芝的提取液能有效缓解心脏舒张期功能障碍和防止在心肌缺血和再灌注时产生的不可逆心肌Ganoderma lucidum polysaccharide has shortened the length of thrombus in mice, decrease the weight of thrombus. In addition, extract of Ganoderma lucidum can effectively relieve cardiac diastolic dysfunction and prevent the irreversible myocardium in myocardial ischemia and reperfusion损伤口引。Damage export.3三萜生物活性研究Study on biological activity of 3 three terpene灵芝中的三萜类成分是灵芝中另一类主要的有效成分，多数具有苦味；灵芝三萜化学结构较复杂，为高度氧化的羊毛甾烷衍生物。灵芝三萜类成分的种类繁多，1988年从灵芝属中分离得到103种三萜类化合物E203，其中主要是灵芝酸(约占13)，随后新的三萜类化合物不断被发现，至2004年，由赤芝中发现的灵芝三萜已达到135种左右2。灵芝三萜由于其种类多，化学结构多样，因此其具有较广泛的药理作用。例如：保肝、抗肿瘤、抗微生物、抗高血压；抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性；抑制组胺释放；抑制血管紧张素转化酶；抑制血小板聚集；抗氧化等重要作用。Three terpenoid components in Ganoderma lucidum in another kind of main effective components, many with bitterness; chemical structure of Ganoderma lucidum three terpene is complex, as highly oxygenated lanostane derivatives. Species of Ganoderma lucidum three terpenoids are separated in 1988, 103 of three terpenoids E203 from ganoderma, especially ganoderic acid (about 1 / 3), then three new terpenoids have been discovered, to 2004, discovered by Ganoderma lucidum Ganoderma lucidum triterpenoids in three has reached about 135 2 . Ganoderma lucidum three terpene because of its variety, chemical structure, so it has wide pharmacological actions. For example: liver, anti tumor, anti microbial, anti hypertension; anti HIV-1 and HIV-1 protease activity; inhibition of the release of histamine; angiotensin converting enzyme inhibition; platelet aggregation; an important role in antioxidation.31抗微生物作用3.1 anti microbial effectSmarlia EF等在2003年首次发现Ganoderma annulare(长管树舌，灵芝属的一种)中的三萜类成分在5001000ugmL有抗Microsporum cannis和Trichophyton mentagrophytes两种真菌的作用；Niedermeyer TH从灵芝中分离出10种三萜类化合物，其中lucialdehyde D1、ganoderone C3和ganoderone A2为新发现的三萜类化合物，而ganoderone A2、lucialdehyde B4等成分具有抗单纯疱疹病毒的活性,1watsuki K等指出灵芝三萜中的Lucidenic acids P、Q和methyl lucidenate P能有效抑制EB病毒；秦莲花等经过研究发现，灵芝三萜中CMll9、fi6、Pa59、Sdl64对结核杆菌具有抑菌作用。此外，灵芝三萜还能对HIV-I蛋白酶有显著的抑制作用。Smarlia EF for the first time that Ganoderma annulare in 2003 (long tube tree tongue, a lucid ganoderma spp.) in three terpenoids in the 500 1000ug / mL with anti Microsporum cannis and Trichophyton mentagrophytes two fungal effect; Niedermeyer TH isolated from 10 of three triterpenoids from ganoderma, where lucialdehyde D1, ganoderone C3 and ganoderone A2 three terpenoids new found, while ganoderone A2, lucialdehyde B4 and other ingredients with anti herpes simplex virus activity, 1watsuki K pointed out that Ganoderma lucidum three terpene in Lucidenic acids P, methyl Q and lucidenate P can effectively inhibit the EB virus; Qin lotus, after the research discovery, Ganoderma lucidum three terpene in CMll9, fi6, Pa59, Sdl64 has the Bacteriostasis of Mycobacterium tuberculosis. In addition, Ganoderma lucidum three terpene also has significant inhibitory effects on HIV-I protease.32保肝作用3.2 the hepatoprotective effect蔺丽等报道灵芝总三萜GT和其组分GTz与阳性对照药物洛潜酯均可明显降低模型动物的血清AIT和肝脏TG含量；王明宇等利用CCl4、D-Gal和BCG+LPS诱导肝损伤小鼠模型，而GT 05，5，50，100ugmL和GTz 05，2，10，50ugmL均不同程度地使肝损伤小鼠已升高的血清ALT和肝脏TG明显下降。由此可见，灵芝三萜能不同程度地减轻动物肝损伤。Lin Li reported Ganoderma lucidum total three terpene GT and the component GTz and the positive control drug Luo latent ester can obviously reduce the model animal serum AIT and liver TG content; Wang Mingyu, using CCl4, D-Gal and BCG+LPS induced liver injury mouse model, while the GT 0.5, 5, 50100ug / mL and GTz 0.5, 2, 10, 50ug / mL were different degrees of the liver injury mice have elevated serum ALT and liver TG decreased