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文档简介
肠杆菌,1,肠杆菌科细菌,2,肠杆菌,概述埃希菌属沙门菌属志贺菌属耶尔森菌属枸橼酸杆菌属克雷伯菌属肠杆菌属、泛菌属、哈夫尼亚菌属沙雷菌属变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属,3,肠杆菌,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、鉴定原则,概述,返回,4,肠杆菌,返回,5,肠杆菌,肠杆菌科的共同特性,1.形态染色相似革兰阴性杆菌2.培养特性相同普通培养基上生长良好3.生化反应活泼发酵葡萄糖,氧化酶阴性,触酶阳性,还原硝酸盐为亚硝酸盐,O/F试验为发酵型。4.抗原构造复杂5.抵抗力弱6.易变异,返回,6,肠杆菌,O-F试验,7,肠杆菌,氧化酶试验阳性:紫红色阴性:无色,8,肠杆菌,硝酸盐还原试验阳性:红色阴性:淡黄色,9,肠杆菌,肠杆菌科细菌抗原模式图,返回,10,肠杆菌,致病物质所致疾病,临床意义,返回,11,肠杆菌,菌毛或菌毛样结构荚膜或微荚膜内毒素外毒素,致病物质,12,肠杆菌,所致疾病,肠道感染腹泻、食物中毒、肠热症肠道外感染鼠疫(烈性传染病)、泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症,返回,13,肠杆菌,鉴定原则,1.科间鉴别2.将肠杆菌科分为三大类3.属、种、群、型的区分4.肠杆菌科细菌综合鉴定流程,返回,14,肠杆菌,肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,15,肠杆菌,苯丙氨酸脱氨酶试验阳性:绿色阴性:黄色,16,肠杆菌,葡萄糖酸盐试验阳性:黄绿色阴性:蓝色,返回,17,肠杆菌,埃希菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,18,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应抗原结构,19,肠杆菌,大肠埃希菌革兰染色,20,肠杆菌,大肠埃希菌电镜图,21,肠杆菌,大肠埃希菌菌落特征(血平板),22,肠杆菌,大肠埃希菌菌落特征(MAC),23,肠杆菌,大肠埃希菌KIA(AA)MIU(),24,肠杆菌,大肠埃希菌IMViC试验()右侧为对照(),25,肠杆菌,大肠埃希菌抗原结构,26,肠杆菌,致病物质所致疾病,临床意义,27,肠杆菌,致病物质,侵袭力菌毛、K抗原内毒素肠毒素耐热肠毒素(ST)不耐热肠毒素(LT),28,肠杆菌,所致疾病,肠道外感染泌尿道感染(最常见)胆道感染、腹膜炎、肺炎菌血症、新生儿脑膜炎肠道感染ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EaggEC,29,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,30,肠杆菌,大肠埃希菌检验程序,31,肠杆菌,检验方法,1.显微镜检查2.分离培养3.鉴定ETECEPECEIECEHECEaggEC,32,肠杆菌,ST检测(乳鼠灌胃试验),33,肠杆菌,LT检测(CHO细胞培养),34,肠杆菌,O157:H7菌落特征(MAC),35,肠杆菌,O157:H7菌落特征(山梨醇麦康凯琼脂平板),返回,36,肠杆菌,沙门菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,37,肠杆菌,38,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应抗原结构,39,肠杆菌,伤寒沙门菌革兰染色,40,肠杆菌,伤寒沙门菌菌落特征(MAC),41,肠杆菌,伤寒沙门菌菌落特征(SS),42,肠杆菌,伤寒沙门菌菌落特征(血平板),43,肠杆菌,伤寒沙门菌KIA(KA)MIU(),44,肠杆菌,沙门菌IMViC试验(),45,肠杆菌,抗原构造和分类1O抗原O抗原有许多组成成分,每组细菌带有数种O抗原;不同种的细菌可有共同的O抗原。将具有共同抗原的沙门菌归为一组(group),现有42个O组。引起人类沙门菌病的细菌多属AF组2H抗原沙门菌属的H抗原有两种,称第1相(特异相)和第2相(非特异相)。具有两种相抗原的细菌叫双相菌;仅有其中一相者称单相菌。按O抗原分组后,每一组沙门菌再根据H抗原分成不同的种或血清型。3Vi抗原Vi抗原有抗吞噬作用,并保护菌体不受抗体和补体的作用。Vi抗原的抗原性弱,刺激机体产生的抗体效价低。细菌在体内不断地刺激机体才有抗体产生;如果细菌消失则抗体也随之消失。,生物学性状,46,肠杆菌,变异性,S-RH-O位相变异V-W,47,肠杆菌,抵抗力,不强对胆盐、煌绿有抵抗力,48,肠杆菌,致病物质所致疾病,临床意义,49,肠杆菌,致病物质,侵袭力Vi-Ag内毒素肠毒素,50,肠杆菌,所致疾病,伤寒和副伤寒急性胃肠炎或食物中毒菌血症(或败血症),51,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,52,肠杆菌,沙门菌检验程序,、,53,肠杆菌,标本菌血症时取血,胃肠炎取粪便、呕吐物或可疑食物。肠热症在病程不同阶段采取不同标奉:第1w取血或骨髓。第1w血培养阳性率达80以上;骨髓培养阳性率可达9095%以上:第2、3w以后取粪便、尿。粪便标本应做多次培养;全程均可取骨髓培养。,微生物学检查法,54,肠杆菌,55,肠杆菌,检验方法,1.显微镜检查2.分离培养3.鉴定4.血清学诊断,56,肠杆菌,57,肠杆菌,沙门菌血清学鉴定,58,肠杆菌,微生物学检查法,血清学诊断常规方法是肥达反应(Widalreaction),即用已知的伤寒沙门菌O、H和甲、乙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验。一般说,间隔5-7d重复采血,如凝集价随病程延长而升高4倍以上,方有诊断价值。1正常凝集价一般情况下,伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1:80以上,H抗体凝集价在1:160以上,甲、乙型副伤寒沙门菌H抗体凝集价在1:80以上有诊断意义。2病程。3H抗体与O抗体的性质及其消长的意义1)若0与H凝集价均超过正常值,则伤寒的可能性很大;2)若二者均低于正常值,则可能性甚小;3)若O凝集价高而H低于正常值,则可能是感染早期或沙门菌属中其他的细菌感染引起的O凝集的交叉反应;4)若O凝集价低而H高于正常值,则可能是以往预防接种的结果或非特异性回忆反应。,59,肠杆菌,肥达反应(Widaltest),O凝集(1:201:1280,效价1:80),H凝集(1:201:1280,效价1:320),返回,60,肠杆菌,志贺菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,61,肠杆菌,志贺菌属分为A、B、C、D4群:A群为痢疾志贺菌(S.dysenteriae),B群为福氏志贺菌(S.flexneri),C群为鲍氏志贺菌(S.boydii),D群为宋内志贺菌(S.sonnei)。,62,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应抗原结构,63,肠杆菌,形态、染色、培养及生化反应G-杆菌、无鞭毛、无动力,有些菌体周围有菌毛。在S-S培养基上形成无色半透明光滑型菌落。分解葡萄糖产酸不产气,大多数志贺菌不发酵乳糖。抗原构造与分类志贺菌属缺少H抗原,其抗原结构主要由O抗原和K抗原组成。根据生化反应和O抗原结构的差异,将志贺菌属分为A、B、C、D4个群。抵抗力本属细菌对理化因素抵抗力较弱,对酸性环境也较敏感。对多种抗生素易形成耐药性(主要由R质粒决定),并在菌间传递。,生物学性状,64,肠杆菌,志贺菌革兰染色,65,肠杆菌,志贺菌菌落特征(MAC),66,肠杆菌,志贺菌KIA(KA)MIU(),67,肠杆菌,志贺菌IMViC试验(),68,肠杆菌,致病物质所致疾病,临床意义,69,肠杆菌,致病物质,侵袭力菌毛内毒素外毒素志贺毒素(ST),70,肠杆菌,所致疾病,急性细菌性痢疾慢性菌痢带菌者,71,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,72,肠杆菌,志贺菌检验程序,73,肠杆菌,在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分,床边接种或立即送检,不能及时接种者可用卡-布运送培养基送检,昏迷不能排便病人可用肛拭取样。,返回,74,肠杆菌,耶尔森菌属,一、分类二、鼠疫耶尔森菌三、小肠结肠炎耶尔森菌四、其他耶尔森菌,返回,75,肠杆菌,其他尚有:假结核耶尔森菌(Y.pseudotuberculosis)奥氏耶尔森菌(Y.aldouae)伯氏耶尔森菌(Y.bercovieri)弗氏耶尔森菌(Y.frederiksenii)中间耶尔森菌(Y.intermedia)等9种耶尔森菌。均可从临床标本中分离得到,其相互之间的生化性状相似,均能在4以及在CIN上生长,可在冷冻食品中增殖,并具有潜在的致病性。,76,肠杆菌,鼠疫耶尔森菌,(一)细菌特性(二)临床意义(三)微生物学检验,77,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,78,肠杆菌,鼠疫耶尔森菌镜下形态(Wayson染色),79,肠杆菌,鼠疫耶尔森菌菌落特征(MAC),80,肠杆菌,致病物质所致疾病,临床意义,81,肠杆菌,致病物质,侵袭力FI抗原(封套抗原)V/W抗原(毒力抗原)内毒素鼠毒素,82,肠杆菌,所致疾病,甲类烈性传染病鼠疫常见临床类型:腺鼠疫败血型鼠疫肺鼠疫,83,肠杆菌,84,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)结果分析与报告,微生物学检验,85,肠杆菌,一旦疑为本菌,应立即向本地区疾病控制中心等部门报告,并将菌种送检验中心或专业实验室作进一步鉴定。诊断确立后除对患者进行隔离治疗外,对疫区及有关人员须采取有效的预防隔离措施,防止疫情扩散。,86,肠杆菌,鼠疫耶尔森菌检验程序,87,肠杆菌,标本采集,1.临床标本淋巴结穿刺液、血液或痰标本2.非临床标本尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行采集,返回,88,肠杆菌,小肠结肠炎耶尔森菌,(一)细菌特性(二)临床意义(三)微生物学检验,89,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,90,肠杆菌,小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色,91,肠杆菌,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(MAC),92,肠杆菌,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(CIN琼脂平板),93,肠杆菌,致病物质侵袭力肠毒素所致疾病小肠炎、结肠炎、胆囊炎腹膜炎、菌血症,临床意义,94,肠杆菌,小肠结肠炎耶尔森菌检验程序,95,肠杆菌,KIA:AA-或KA-枸橼酸盐(-)脲酶(+)吲哚(-/+)鸟氨酸脱羧酶(+)动力、V-P反应结果与孵育温度有关(2225阳性,3537阴性)根据菌落特征,菌体形态染色特点、嗜冷性及典型生化结果即可初步诊断本菌。,返回,96,肠杆菌,枸橼酸杆菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,97,肠杆菌,弗劳地枸橼酸杆菌(C.freundii)异型枸橼酸杆菌(C.diversus)无丙二酸盐枸橼酸杆菌(C.amalonaticus),98,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,99,肠杆菌,弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征(MAC),100,肠杆菌,枸橼酸杆菌IMViC(),返回,101,肠杆菌,克雷伯菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,102,肠杆菌,肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)产酸(催娩)克雷伯菌(K.axytoca)解鸟氨酸克雷伯菌(K.ornithinolytica)植生克雷伯菌(K.planticola)土生克雷伯菌(K.terrigena)肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种:肺炎克雷伯菌肺炎亚种(subsp.pneumoniae)肺炎克雷伯菌臭鼻亚种(subsp.ozaenae)肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种(subsp.rhinoscleromatis),返回,103,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,104,肠杆菌,肺炎克雷伯菌革兰染色,105,肠杆菌,肺炎克雷伯菌电镜图,106,肠杆菌,肺炎克雷伯菌荚膜染色,107,肠杆菌,肺炎克雷伯菌的菌落特征(血琼脂平板),108,肠杆菌,肺炎克雷伯菌的菌落特征(MAC),109,肠杆菌,肺炎克雷伯菌粘丝试验,110,肠杆菌,肺炎克雷伯菌KIA(AA)、MIU(),111,肠杆菌,肺炎克雷伯菌IMViC试验(),112,肠杆菌,克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群,是医院感染中最重要的条件致病菌。所致疾病:肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、败血症,临床意义,113,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,114,肠杆菌,肺炎克雷伯菌易产生超广谱-内酰胺酶(ESBL),近年来文献报道我国产酶率已达30%左右,产酶株对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环-内酰胺类抗生素均产生耐药,而仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感。ESBL检测现已作为医院细菌室常规检测项目。,115,肠杆菌,肺炎克雷伯菌检验程序,116,肠杆菌,检验方法,1.显微镜检查2.分离培养3.鉴定,117,肠杆菌,肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验,返回,118,肠杆菌,肠杆菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,119,肠杆菌,产气肠杆菌(E.aerogenes)阴沟肠杆菌(E.cloacea)日勾维肠杆菌(E.gergoviae)阪崎肠杆菌(E.sakazakii)中间型肠杆菌(E.intermedium)泰洛肠杆菌(E.taylorac)河生肠杆菌(E.amnigenus)阿氏肠杆菌(E.asburiac)致癌肠杆菌(E.cancerogenus)溶解肠杆菌(E.dissolvens)超压肠杆菌(E.nimipressualis),120,肠杆菌,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,121,肠杆菌,阴沟肠杆菌革兰染色,122,肠杆菌,阴沟肠杆菌菌落特征(MAC),123,肠杆菌,产气肠杆菌IMViC试验(),124,肠杆菌,肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环境菌群,医院感染的重要病原菌。在临床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌和产气肠杆菌,可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染以及败血症。,临床意义,125,肠杆菌,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,126,肠杆菌,IMViC试验大肠埃希菌为+-肠杆菌属细菌大多为-+动力和鸟氨酸脱羧酶试验肺炎克雷伯菌为阴性肠杆菌属多数为阳性,127,肠杆菌,肠杆菌科细菌常产生AmpC酶,尤以阴沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性菌尤其是阴沟肠杆菌对13代头孢菌素、单环-内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的复合制剂耐药的重要原因。产AmpC酶细菌的治疗,首选4代头孢(头孢吡肟)和碳青霉烯类抗生素。近年来已有质粒介导的AmpC酶出现。,返回,128,肠杆菌,泛菌属与哈夫尼亚菌属,一、泛菌属(一)分类(二)细菌特性(三)临床意义(四)微生物学检验二、哈夫尼亚菌属(一)分类(二)细菌特性(三)临床意义(四)微生物学检验,返回,129,肠杆菌,聚团泛菌(P.agglomerans)弥散泛菌(P.dispersa)聚团泛菌包括以前的典型聚团肠杆菌、草生欧文氏菌和鸡血藤欧文氏菌。,130,肠杆菌,聚团泛菌菌落特征(普通琼脂),131,肠杆菌,蜂房哈夫尼亚菌菌落特征(MAC),返回,132,肠杆菌,沙雷菌属,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验,返回,133,肠杆菌,粘质沙雷菌(S.marcescens)沙雷菌液化群(S.liquefaciensgroup)臭味沙雷菌(S.odorifera)普城沙雷菌(S.plymuthica)深红沙雷菌(S.rubidaea)无花果沙雷菌(S.ficaria)嗜虫沙雷菌(S.entomophila)居泉沙雷菌(S.fonticola),134,肠杆菌,粘质沙雷菌菌落特征(普通琼脂平板),135,肠杆菌,粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都
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